生物体肝脏组织中脂质的提取和检测方法技术

本申请公开了一种生物体肝脏组织中脂质的提取方法，包括以下步骤：取肝脏组织进行组织匀浆；加入甲基叔丁基醚和甲醇进行脂质萃取；取上层有机相再次加入甲基叔丁基醚和甲醇二次萃取；取上层有机相，完成脂质提取。本申请还给出了基于上述提取方法的生物体肝脏组织中脂质的检测方法。本申请解决了目前常用组织提取方法存在的组织样本用量大、提取效率低、提取溶剂毒性大，以及现有检测方法在肝脏组织中检测分析出的脂质数量少，种类少的技术问题。

Extraction and Detection of Lipids in Liver Tissues of Organisms

The application discloses a method for extracting lipid from liver tissue of organism, which includes the following steps: extracting liver tissue for tissue homogenate; adding methyl tert-butyl ether and methanol for lipid extraction; adding methyl tert-butyl ether and methanol for secondary extraction of upper organic phase; and taking upper organic phase to complete lipid extraction. The application also provides a method for detecting lipids in liver tissues of organisms based on the above extraction method. The application solves the technical problems of large amount of tissue samples, low extraction efficiency, high toxicity of extracting solvents, and small amount and variety of lipids detected and analyzed by existing detection methods in liver tissues.

【技术实现步骤摘要】
生物体肝脏组织中脂质的提取和检测方法
本申请涉及生物检测领域，具体而言，涉及一种生物体肝脏组织中脂质的提取和检测方法。
技术介绍
肝脏作为机体脂质代谢和炎症控制的重要器官，人们对肝脏脂类代谢组学的研究日益广泛和深入。随着分析技术的进步，针对脂质化合物的分析技术不断完善和提高，脂质类化合物能够更好、更全面的被表征、鉴定及定量分析。基于脂质组学分析技术揭示脂质代谢异常与疾病的相关性，寻找潜在生物标志物是目前研究的热点。根据研究模式不同，可将脂质代谢组学分为非靶向和靶向脂质代谢组学，非靶向脂质代谢是从全局分析的角度将样本中所有的代谢物质识别出来，该研究模式的优势在于全面寻找有差异的代谢物，其缺点是对代谢物识别的准确性不高，只能进行半定量测定。理想的非靶向脂质代谢组学样品采集和制备方法应满足：①非选择萃取出样品中含尽可能多的代谢物；②简便、快速、尽量避免或减少代谢物丢失或降解；③方法重现性和稳定性好；④有样品淬灭步骤，以确保代谢轮廓的真实性。而靶向代谢组学的特点则是利用相应的标准品对既定的一组代谢物质进行精确的定性定量分析，两者互相结合，使得脂质代谢组学研究结果更加完善。由于生物样本的稀缺性本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种生物体肝脏组织中脂质的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：取肝脏组织进行组织匀浆；加入甲基叔丁基醚和甲醇进行脂质萃取；取上层有机相再次加入甲基叔丁基醚和甲醇二次萃取；取上层有机相，完成脂质提取。

【技术特征摘要】
1.一种生物体肝脏组织中脂质的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：取肝脏组织进行组织匀浆；加入甲基叔丁基醚和甲醇进行脂质萃取；取上层有机相再次加入甲基叔丁基醚和甲醇二次萃取；取上层有机相，完成脂质提取。2.根据权利要求1所述的生物体肝脏组织中脂质的提取方法，其特征在于，所述组织匀浆步骤包括：准确称取肝脏组织于离心管中加水，离心管中加入钢球，间隔匀浆，间隔时冷却，匀浆后取出钢珠，得到均匀的肝脏组织匀浆液。3.根据权利要求2所述的生物体肝脏组织中脂质的提取方法，其特征在于，加入钢球的数量为每离心管2～3个，组织匀浆时转速为2000～3000rpm，每次匀浆5～10s，间隔5～10s后再匀浆，反复匀浆10～12次，间隔时将离心管置于冰块中冷却。4.根据权利要求1所述的生物体肝脏组织中脂质的提取方法，其特征在于，加入所述甲基叔丁基醚和甲醇的比例为5：1～6：1。5.根据权利要求1所述的生物体肝脏组织中脂质的提取方法，其特征在于，所述萃取步骤包括：加入甲基叔丁基醚和甲醇后旋涡30～40s，超声10～20min，在3000～4000rpm转速下离心10～15min。6.一种生物体肝脏组织中脂质的检测方法，其特征在于，利用权利要求1至5任一项所述的提取方法对生物体肝脏组织中的脂质进行前处理。7.根据权利要求6所述的生物体肝脏组织中脂质的检测方法，其特征在于，对所述生物体肝脏组织中的脂质进行前处理后利用色谱-质谱联用方法进行脂质检测。8.根据权利要求7所述的生物体肝脏组织中脂质的检测方法，其特征在于，将两次萃取后的上层有机相氮吹至干，加入甲醇复溶，在12300-13000rpm转速下离心1-2min，取上清液进样。9.根据权利要求7所述的生物体肝脏组织中脂质的检测方法，其特征在于，使用QExactive高分辨液质...

【专利技术属性】
技术研发人员：范德玲，吉贵祥，刘济宁，汪贞，王蕾，周林军，郭敏，古文，石利利，刘明庆，
申请(专利权)人：环境保护部南京环境科学研究所，
类型：发明
国别省市：江苏,32