一种饲用γ-氨基丁酸的生产方法技术

本发明专利技术公开了一种饲用γ‑氨基丁酸的生产方法，包括步骤：(1)采用基因工程大肠杆菌经种子培养基培养的种子液，按照1％～4％接种量接种于发酵培养基；(2)加入4‑8g/L诱导剂进行诱导谷氨酸脱羧酶的表达，当OD600达到10‑18，开始梯度调整发酵液的培养条件，同时不断检测菌体酶活力，当酶活力达到55U以上时，发酵结束；(3)将完成的发酵液通过加热系统，将温度升到30‑38℃，搅拌转速100‑200rpm，加入转化原料；(4)将转化后的发酵液直接进行喷雾干燥，即得。本发明专利技术饲用γ‑氨基丁酸的生产方法，通过优化谷氨酸生产菌的生产条件，快速检测和控制谷氨酸脱羧酶活力，提高控制谷氨酸脱羧酶活力的方法，达到提高生产效率和稳定生产的能力。

A Production Method of Feed Gamma-Aminobutyric Acid

The invention discloses a method for producing feeding gamma aminobutyric acid, which comprises the following steps: (1) using seed liquid of genetically engineered Escherichia coli cultured in seed medium and inoculated in fermentation medium according to 1%-4% inoculation amount; (2) adding 4 8g/L inducer to induce the expression of glutamate decarboxylase, when OD600 reaches 10 18, the gradient adjustment of fermentation medium culture conditions is started, and at the same time The enzyme activity was continuously detected. When the enzyme activity was above 55U, the fermentation was finished. (3) the fermentation broth was heated through the heating system to increase the temperature to 30 200rpm 38 centigrade, and the stirring speed was 100 200rpm. By optimizing the production conditions of glutamic acid producing bacteria, rapidly detecting and controlling the activity of glutamic acid decarboxylase, and improving the method of controlling the activity of glutamic acid decarboxylase, the production efficiency and the ability of stable production are improved.

【技术实现步骤摘要】
一种饲用γ-氨基丁酸的生产方法
本专利技术涉及饲料加工
，尤其涉及一种饲用γ-氨基丁酸的生产方法。
技术介绍
γ-氨基丁酸作为一种非蛋白质氨基酸，是很好的医疗药物及保健品的原料，具有降血压、保持神经安定、改善脑机能、保肝利肾等作用,可作为治疗脑损伤药物的成分，对畜禽具有抗热应激、促生长等作用，目前已发戓成为一种新型功能性因子，被广泛用于医药、食品保健、化工及农业等行业。近年来，国内外市场对γ-氨基丁酸的需求逐年增长。γ-氨基丁酸的生产方法主要有化学合成法、固态发酵法和生物酶转化法。化学合成法主要采用吡咯烷酮、氢氧化钠和水按一定比例混合后，在高温下进行反应，反应条件剧烈，然后通过树脂分离纯化，浓缩结晶而成。吡咯烷酮与氢氧化钠都为腐蚀性物质，影响人体健康。特别是吡咯烷酮在高温下，有引起燃烧的危险，且可分解释放有毒的氧化氮烟气，操作过程存在危险性，不利于工业化大规模生产。固态发酵法效率低下，产量仅为0.35mg/g，最终纯度只35％。生物酶催化合成法主要以重组基因工程菌代谢中产生的谷氨酸脱羧酶GAD，转化底物谷氨酸生产γ-氨基丁酸，与化学法相比，生物酶催化合成法具有条件温和、安全和成本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种饲用γ‑氨基丁酸的生产方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)采用基因工程大肠杆菌经种子培养基培养的种子液，按照1％～4％接种量接种于发酵培养基，空气量1：0.4～1.2vvm，温度32‑37℃，搅拌200‑300rpm培养至OD6001.5～2.5降温至25‑28℃；(2)加入4‑8g/L诱导剂进行诱导谷氨酸脱羧酶的表达，当OD600达到10‑18，开始梯度调整发酵液的培养条件，最低降至温度20℃、转速30rpm、风量1：0.1vvm，同时不断检测菌体酶活力，当酶活力达到55U以上时，发酵结束；(3)将完成的发酵液通过加热系统，将温度升到30‑38℃，搅拌转速100‑200rpm，加入...

【技术特征摘要】
1.一种饲用γ-氨基丁酸的生产方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)采用基因工程大肠杆菌经种子培养基培养的种子液，按照1％～4％接种量接种于发酵培养基，空气量1：0.4～1.2vvm，温度32-37℃，搅拌200-300rpm培养至OD6001.5～2.5降温至25-28℃；(2)加入4-8g/L诱导剂进行诱导谷氨酸脱羧酶的表达，当OD600达到10-18，开始梯度调整发酵液的培养条件，最低降至温度20℃、转速30rpm、风量1：0.1vvm，同时不断检测菌体酶活力，当酶活力达到55U以上时，发酵结束；(3)将完成的发酵液通过加热系统，将温度升到30-38℃，搅拌转速100-200rpm，加入转化原料，通过控制添加转化原料的速度，控制发酵液的pH为4.0-6.5，待反应至转化原料浓度0.6％(w/v)以下时，停止转化反应；(4)将转化后的发酵液直接进行喷雾干燥，即得高含量的饲用γ-氨基丁酸。2.根据权利要求1所述的饲用γ-氨基丁酸的生产方法，其特征在于，步骤(1)中，所述种子培养基为：酵母粉3-6g/L，蛋白胨5-12g/L，氯化钠5-12g/L；种子培养条件为：温度32-38℃，空气量0.5～1.0VVM，搅拌200-500rpm，培养至OD6001.1～3.0。3.根据权利要求1所述的饲用γ-氨基丁酸的生产方法，其特征在于，步骤(1)中，所述发酵培养基为：(NH4)2SO4氮源10g/L，葡萄糖碳源5g/L,K2HPO410-18g/L，KH2PO41-3.5g/L，MgSO418-28g/L，谷氨酸0.04-0.12g/L；培养条件温度32-38℃，空气量0.5～1.2vvm，搅拌200-500rpm，培养至OD6003.0～5.0。4.根据权利要求3所述的饲用γ-氨基丁酸的生产方法，其特征在于，所述(NH4)2SO4氮源...

【专利技术属性】
技术研发人员：张继学，陆克文，
申请(专利权)人：上海邦成生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31