Perilipin1表达干预剂在制备抗肝纤维化药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了Perilipin1表达干预剂在制备抗肝纤维化药物中的应用。相对于现有技术，本发明专利技术公开了Perilipin1表达干扰剂在制备抗肝纤维化药物中的应用，通过在肝细胞中过表达Perilipin1进而显著对抗肝纤维化，维持肝细胞形态和结构的完整性，降低血清转氨酶。因此，将Perilipin1表达干扰剂用于肝纤维化的治疗，具有重要意义。

Application of Perilipin 1 expression intervention in preparation of anti-hepatic fibrosis drugs

The invention discloses the application of Perilipin 1 expression intervention in the preparation of anti-hepatic fibrosis drugs. Compared with the prior art, the invention discloses the application of Perilipin 1 expression interfering agent in the preparation of anti-hepatic fibrosis drugs. By overexpressing Perilipin 1 in hepatocytes, it can significantly resist hepatic fibrosis, maintain the integrity of hepatocyte morphology and structure, and reduce serum transaminase. Therefore, the use of Perilipin 1 expression interfering agent in the treatment of liver fibrosis is of great significance.

【技术实现步骤摘要】
Perilipin1表达干预剂在制备抗肝纤维化药物中的应用
本专利技术涉及Perilipin1表达干预剂在制备抗肝纤维化药物中的应用，属于药物新用途

技术介绍
肝脏疾病尤其是病毒性肝炎、脂肪肝病、肝纤维化和肝癌等，在全球范围的发病率居高不下。如NAFLD在欧美普通成年人中的发病率为20-33％，肥胖人群中发病率达60-90％；在中国普通成年人患病率约为15％(FanJG,FarrellGC.Epidemiologyofnon-alcoholicfattyliverdiseaseinChina.Journalofhepatology,2009,50(1):204-10.)。肝纤维化(Fibrosis)是一种病理状态，是指肝脏纤维结缔组织的过渡沉积。肝纤维化是慢性病毒性肝炎、代谢紊乱和慢性酒精性/非酒精性脂肪肝等慢性肝脏疾病进一步向肝硬化发展的中间环节，肝纤维化是慢性肝病的共同重要特征，且25-40％的慢性肝病患者最终发展为肝硬化甚至是肝癌。近几年的研究表明，肝纤维化是一个可以逆转的病变，而肝硬化是不可逆性病变。因此，抑制、阻止并逆转肝纤维化是治疗各种慢性肝病的中心环节。肝星状细胞(HSCs)是促进肝纤维化发生发展的关键细胞(TsuchidaT,FriedmanSL.Mechanismsofhepaticstellatecellactivation.NatRevGastroenterolHepatol.2017Jul；14(7):397-411.)。HSCs位于肝脏Disse腔中，程梭形或者多边形，胞浆内含有多个富含维生素A等脂质的脂滴(Lipiddroplet,LD)，其细长的突起想歪延伸环绕在血窦内皮细胞外边。在正常肝脏中，HSCs处于静息态，胞浆中富含LD，不表达α-SMA，增殖能力低。HSCs受到刺激后开始活化，活化态的HSCs胞浆中LD大量脱落，表达丰富的α-SMA，具有很强的增殖能力。因此，抑制HSCs的活化是治疗肝纤维化的关键。目前认为LD丢失是促进HSCs活化的重要因素，而逆转LD丢失或者维持LD含量，可以有效缓解和逆转HSCs的活化。脂滴包被蛋白的丢失是导致脂滴丢失的主要原因；脂滴包被蛋白有多种，Perilipin1是其中最重要的一种(KimmelAR,SztalrydC.ThePerilipins:MajorCytosolicLipidDroplet-AssociatedProteinsandTheirRolesinCellularLipidStorage,Mobilization,andSystemicHomeostasis.AnnuRevNutr.2016Jul17；36:471-509.)。抗肝纤维化药物的研发是当前肝药的研发热点，同时也取得了一定的研究进展。当前申报的防治肝纤维化相关的治疗药物主要有以下几类：1)中草药及其提取物，如姜黄、白藜芦醇、水飞蓟宾、别隐品碱及其盐(授权公告号CN10132721B)；2)化学药物及其制剂，如吡非尼酮和肌酐组合物(授权公告号CN103550242B)、闭花木酮Cleistanone衍生物(授权公开号CN104095857B)；3)生物制剂，包括重组蛋白和基因药物等，前者包括TGFβ1-抑制肽(授权公告号CN1203091C)、IL-4(授权公告号CN101318013B)、单克隆抗体HAb18GC2及其重链和轻链可变去基因和多肽(授权公告号CN100586960C)；基因药物包括肝细胞核因子1α基因(授权公告号CN102552935B)、表达肝细胞生成素的基因药物(申请号200610145523.0)、人肝细胞生长因子基因(授权公告号CN1142272C)等。尽管治疗药物很多，但是目前尚未发现对肝纤维化的特效药物。基因治疗是一种以改变基因表达为基础的治疗与预防疾病的方法，它通过基因工程的实验手段，将正常基因导入靶细胞中，以纠正或补充因基因缺陷或异常所引起的疾病，从而达到治疗的目的。目前全世界已获准的基因治疗临床试验方案达一千多项。已经报道的基因治疗的临床方案中，约26％是用腺病毒作为载体，如CN201410249547.5(申请号)公开了一种含有CRISPR/Cas9系统的靶向敲除载体及其腺病毒和应用，CN1142272C(授权公开号)公开了一种通过腺病毒载体携带的基因在纤维化疾病防治中的应用，腺病毒载体基因治疗具有巨大的潜力和广阔的前景。
技术实现思路
专利技术目的：为解决上述技术问题，本专利技术提供了Perilipin1(简写为Plin1)表达干预剂在制备抗肝纤维化药物中的应用，对肝纤维化的治疗具有重要意义。技术方案：为了实现上述专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案：Plin1表达干预剂在制备抗肝纤维化药物中的应用。所述Plin1表达干预剂为能够诱导(上调)Plin1表达(mRNA水平和蛋白水平)或者阻断Plin1蛋白降解的各种化学合成物质、天然产物或生物制品。所述Plin1表达干预剂包括携带Plin1质粒的载体，其能够诱导(上调)Plin1表达，如病毒性载体(慢病毒、腺病毒和腺相关病毒等)；或者非病毒性载体(如阳离子多聚物载体，纳米颗粒载体，聚乙烯亚胺，脂质体，生物相容性载体材料等)，以及对载体表面进行基团修饰得到的多种载体。或者，所述Plin1表达干预剂选自能够使细胞/组织中Plin1表达水平升高的化学试剂或者天然产物。或者，所述Plin1表达干预剂选自能够使细胞/组织中Plin1蛋白降解延缓/阻断的化学试剂、天然产物或者生物制品。所述药物是以Plin1表达干预剂作为仅有的成分所制成的药物。或者，所述药物是以Plin1表达干预剂作为活性成分，加上药学上可接受的辅料所制成的药物。本专利技术所述药学上可接受的辅料，是指制备不同剂型时加入所需的各种常规辅料，例如稀释剂、黏合剂、崩解剂、助流剂、润滑剂、矫味剂、包合材料、吸附材料等以常规的制剂方法制备成任何一种常用的口服制剂，例如可以是颗粒剂、散剂、片剂、胶囊剂、丸剂、口服液、汤剂、滴丸剂等。技术效果:相对于现有技术，本专利技术公开了Plin1表达干扰剂在制备抗肝纤维化药物中的应用，通过在肝细胞中过表达Plin1进而显著对抗肝纤维化，维持肝细胞形态和结构的完整性，降低血清转氨酶。因此，将Plin1表达干扰剂用于肝纤维化的治疗，具有重要意义。附图说明图1：HSCs活化过程中脂质含量显著下调(TG,TC,RA定量分析)。*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001与第一天细胞含量相比。图2：HSCs活化过程中Plin1表达水平显著下调。*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001与第一天细胞相比。图3：HSCs转染Plin1表达质粒后转染效率验证(Plin1蛋白表达水平分析)。图4：HSCs转染Plin1表达质粒后可以维持脂滴含量(TG,TC,RA定量分析)。*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001与对照组相比。图5：HSCs转染Plin1表达质粒后可以抑制细胞的活化(αSMA蛋白表达水平分析)。具体实施方式本专利技术通过比较静息态和活化态HSCs，发现活化态HSCs脂质含量显著降低，脂滴包被蛋白Plin1表达水平本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.Perilipin1表达干预剂在制备抗肝纤维化药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.Perilipin1表达干预剂在制备抗肝纤维化药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述Perilipin1表达干预剂为能够增加Perilipin1表达或者阻断Perilipin1蛋白降解的各种化学合成物质、天然产物或生物制品。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述Perilipin1表达干预剂为携带Perilipin1质粒的载体。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述载体为病毒性载体和非病毒性载体。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述病毒性...

【专利技术属性】
技术研发人员：郝海平，王洪，周济宇，王广基，何青娴，崔双，章鹏飞，潘晓洁，葛朝亮，程龙浩，黄宁宁，郭怡彤，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32