The invention discloses a multiplex PCR amplification kit for MTHFR gene and an amplification method. The kit comprises an amplification primer, a Taq enzyme, a dNTPs and a buffer for the SNP locus of MTHFR gene. The SNP loci of MTHFR gene are selected from C667T, A1298C, MTRR and/or A66G. The invention adopts multiplex PCR amplification method and simultaneously amplifies several important SNP loci of MTHFR, and can flexibly select the amplified loci combination according to actual needs, which can play a multipurpose role. The primers in the kit have high specificity, low mismatch rate, reasonable design of primer length and Tm value, and the amplified products are convenient for detection and separation.
【技术实现步骤摘要】
一种MTHFR基因的多重PCR扩增试剂盒及扩增方法
本专利技术涉及一种MTHFR基因的多重PCR扩增试剂盒及扩增方法,属于生物领域,尤其是生物检测领域。
技术介绍
亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR),主要作用是在叶酸代谢通路中将5,10-亚甲基四氢叶酸转化为具有生物学功能的5-甲基四氢叶酸。5-甲基四氢叶酸可以进一步进入甲基传递通路,通过同型半胱氨酸的重新甲基化过程间接为DNA甲基化和蛋白质甲基化提供甲基并且使血液中的同型半胱氨酸水平保持在一个较低的水平。此外叶酸的中间代谢产物在核苷酸合成过程中也有重要的作用,通过一碳单位代谢为嘌呤环的形成提供碳原子。MTHFR基因的缺陷将导致机体多个基础生化过程的紊乱,包括细胞周期调控、DNA复制、DNA以及蛋白质甲基化修饰等,并进而引发神经管缺陷、癌症、心脑血管疾病等多种病症。MTHFR基因的缺陷对孕妇人群会引起神经管缺陷、先天性心脏病、唇腭裂、妊娠期高血压疾病,自发性流产。MTHFR是常规的孕妇检查项目,由于MTHFR基因多态性具有2个SNP位点,因此MTHFR的SNP位点就成为了最重要的检测指标,而现有的MTHFR检测一般采用常用的测序法,测序过程耗时较长且效率较低,一次只能检测一个位点,2个位点需要进行2次检测,检测成本较高,因此,针对MTHFR的SNP位点设计一种高针对性的多重PCR扩增方法和扩增检测试剂盒成为了目前市场上的一个空缺。
技术实现思路
针对现有技术存在的上述问题,本专利技术的目的是获得一种MTHFR基因的多重PCR扩增试剂盒及扩增方法。为实现上述专利技术目的之一,本专利技术采用的MTHFR基因的多重P ...
【技术保护点】
1.一种MTHFR基因的多重PCR扩增试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括MTHFR基因SNP位点的扩增引物、Taq酶、dNTPs和缓冲液,其中MTHFR基因的SNP位点选自:C667T、A1298C、MTRR和/或A66G。
【技术特征摘要】
1.一种MTHFR基因的多重PCR扩增试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括MTHFR基因SNP位点的扩增引物、Taq酶、dNTPs和缓冲液,其中MTHFR基因的SNP位点选自:C667T、A1298C、MTRR和/或A66G。2.根据权利要求1所述的MTHFR基因的多重PCR扩增试剂盒,其特征在于,所述试剂盒的SNP位点为C667T和A1298C,其中C667T的序列如序列表SEQIDNO:1所示,A1298C的序列如序列表SEQIDNO:2所示。3.根据权利要求2所述的MTHFR基因的多重PCR扩增试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒包括用于扩增SEQIDNO:1所示片段的上下游引物序列和用于扩增SEQIDNO:2所示片段的上下游引物序列。4.根据权利要求3所述的MTHFR基因的多重PCR扩增试剂盒,其特征在于:用于扩增SEQIDNO:1所示片段的上下游引物序列如序列表SEQIDNO:3和SEQIDNO:4所示,用于扩增SEQIDNO:2所示片段的上下游引物序列如序列表SEQIDNO:5和SEQIDNO:6所示。5.根据权利要求1所述的MTHFR基因的多重PCR扩增试剂盒,其特征在于,所述扩增试剂盒还包括全血样品...
【专利技术属性】
技术研发人员:不公告发明人,
申请(专利权)人:湘潭智联技术转移促进有限责任公司,
类型:发明
国别省市:湖南,43
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