通过PARIS的法尼基化预防或治疗帕金森症的方法技术

揭示预防或治疗受试者的帕金森症的方法，其中，将有效量的药物给药至受试者，以造成PARIS的法尼基化以及脑内PGC‑1α表达的提升。这些方法部分地通过预防多巴胺神经元的丢失而减轻受试者帕金森症的效应。

Prevention or treatment of Parkinson's disease by farnegization of PARIS

To reveal ways to prevent or treat Parkinson's disease in subjects, in which effective doses of drugs are administered to subjects to cause farnegization of PARIS and elevation of the expression of PGC_1a in the brain. These methods partially alleviate the effects of Parkinson's disease by preventing the loss of dopamine neurons.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】通过PARIS的法尼基化预防或治疗帕金森症的方法关于政府利益的声明本专利技术在美国国立卫生研究院的政府资助(批准号：NS38377)下作出。政府享有本专利技术的某些权利。相关申请的交叉引用本申请主张2016年3月17日递交的美国临时专利申请US62/309,583的优先权，其公开内容通过引用而以其整体并入本文。
技术介绍
帕金森症(Parkinson’sdisease(PD))是一种无法治愈的进行性神经变性疾病。其临床特征为由于黑质(SN)中多巴胺能神经元的优先丢失造成的运动功能障碍。PD的几种基因性肇因已经得以鉴定，提供了理解该疾病过程的基础性分子机制。目前，用于PD的治疗策略主要受限于以药物如L-DOPA或多巴胺受体进行运动症状的管理以及神脑部刺激。不幸的是，这些疗法没有成功预防多巴胺能神经元(DA)的进行性死亡。此外，没有疗法被证实能迟滞或预防PD的发作或进展。因此，亟需新的药理学途径来治疗PD。
技术实现思路
本专利技术通过提供预防或治疗受试者的帕金森症的方法而满足这些需求，该方法通过给药有效量的药物造成parkin相互作用底物(parkininteractingsubstrate,PARIS)的法尼基化以及提升脑内过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活剂-1α(PGC-1α)的表达。这些方法部分地通过预防多巴胺神经元的丢失而减轻受试者体内的帕金森症效应。本专利技术的一种具体实施例为预防或治疗受试者的帕金森症的方法，包含将有效量的一种或多种PGC-1α诱导物给药至该受试者。尽管PGC-1α的任何直接诱导物或间接诱导物均可用于本公开的方法中，但在具体实施例中，该诱导物是法尼醇或其药学可接受的盐、溶剂合物、磷酸酯衍生物或立体异构体。法尼醇的结构为(2E,6E)-3,7,11-三甲基十二-2,6,10-三烯-1-醇本专利技术的另一具体实施例为预防或治疗受试者的帕金森症的方法，包含向该受试者给药有效量的过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活剂-1α(PGC-1α)表达的一种或多种诱导物。优选的诱导物是法尼醇，或其药学可接受的盐、溶剂合物、磷酸酯衍生物或立体异构体。该诱导物可口服给药，通过注射给药，或外用给药。如果法尼醇是该诱导物，则优选以导致该受试者体NRF-1的mRNA水平比未给药法尼醇的受试者增加的量给药法尼醇。还优选以令该受试者脑内的法尼基转移酶活性比未给药法尼醇的受试者增加的量给药法尼醇。还优选以令该受试者脑内的parkin相互作用底物(PARIS)法尼基化比未给药法尼醇的受试者增加的量给药法尼醇。还优选该法尼基化出现在PARIS的残基631处的半胱氨酸残基上。还优选，与未给药法尼醇的受试者相比，法尼醇基本上消除了该受试者体内结合至其靶标DNA的PARIS。还优选，与未给药法尼醇的受试者相比，该法尼醇预防了该受试者体内多巴胺神经元的丢失。本专利技术的另一具体实施例为预防或治疗受试者的帕金森症的方法，包含对该受试者给药有效量的选自AVS-3648、ABT-0529、法尼醇、及其组合，或其药学可接受的盐、溶剂合物、磷酸酯衍生物、或其立体所组成组的实体。关于AVS-3648及ABT-0529的化学结构，请参见图9。优选以导致该受试者体NRF-1的mRNA水平比未给药该实体的受试者增加的量给药该实体。优选以令该受试者脑内的法尼基转移酶活性比未给药该实体的受试者增加的量给药该实体。优选以令该受试者脑内的parkin相互作用底物(PARIS)法尼基化比未给药该实体的受试者增加的量给药该实体。优选该法尼基化出现在PARIS的残基631处的半胱氨酸残基上。优选地，与未给药该实体的受试者相比，该实体基本上消除了该受试者体内结合至其靶标DNA的PARIS。还优选地，与未给药该实体的受试者相比，该实体预防了该受试者体内多巴胺神经元的丢失。本专利技术的另一具体实施例为鉴别预防或治疗受试者的帕金森症的药物的方法，包含向第一受试者给药该实体，导致该受试者脑内PGC-1α的表达比未给药该实体的第二受试者脑内PGC-1α的表达增强。该实体可口服给药或通过本说明书中提及的其它方法给药。该方法导致该第一受试者的NRF-1的mRNA实体比该第二受试者增加。该方法导致该第一受试者脑内的法尼基转移酶活性比该第二受试者增加。该方法导致该第一受试者脑内的PARIS法尼基化比该第二受试者增加。优选该法尼基化出现在PARIS的残基631处的半胱氨酸残基上。优选地，与该第二受试者相比，该第一受试者体内结合至其靶标DNA的PARIS减少。该方法导致该第一受试者体内的多巴胺神经元的丢失比该第二受试者更少。本专利技术的另一具体实施例为对于预防及/或治疗帕金森症的药剂的体外筛选方法，包含下述步骤：提供表达PARIS蛋白或其功能性DNA结合部分的细胞；经一种或多种实体施加至该细胞；确定，与未经该一种或多种实体处理的细胞相比，经该实体处理的一个或多个细胞是否已经失去了该PARIS蛋白或其功能性DNA结合部分与其靶标序列的结合。该实体优选为选自化学品、蛋白质、肽、核酸序列或其组合所组成的组。附图说明图1A至图1D举例说明用以鉴定提升PGC-1α表达的化合物的高通量筛选。图2A至图2J举例说明在PARIS的存在下激活PGC-1α启动子的化合物。图3A至图3J举例说明，评估在PARIS的存在下激活PGC-1α启动子的9种化合物，以确定哪些化合物诱导SH-SY5Y细胞内的PGC-1α水平。图4A至图4H举例说明PARIS的法尼基化位点。图5A至图5I举例说明通过法尼醇保护多巴胺能神经元。图6A至图6K举例说明法尼醇的保护效果。图7A至图7G举例说明，PARIS的法尼基化为体内的法尼醇保护效应所需。图8举例说明法尼醇如本专利技术所定的作用的方法。图9举例说明AVS-3648、ABT-0529的化学结构。图10A至图10D举例说明，本专利技术中使用的试验对于高通量(HTS)筛选是可靠的。图11举例说明本专利技术中使用的高通量筛选方案。图12举例说明从初步筛选中鉴定的17种化合物。图13A至图13F举例说明，实时qRT-PCR显示，在肝脏、肾脏、结肠和卵巢中观察到了明显的FXRmRNA，并在脾脏、气管、食道、睾丸和前列腺中观察到了温和表达。图14A和图14B举例说明，法尼醇彻底清除了结合核染色质的PARISWT的水平但未清除PARISC631S，同时，PARIS在细胞质部分、细胞膜部分和可溶性细胞核部分中的分布没有变化。图15A至图15D举例说明，共免疫染色分析表明，法尼醇导致多巴胺能神经元的PGC-1α免疫反应性增加。具体实施方式本公开的具体实施例涉及用于治疗及/或预防与parkin-PARIS-PGC1α途径的调整直接或间接相关的神经障碍的方法及/或组合物。某些具体实施例中，以该途径的调节剂治疗患有神经障碍如帕金森症的个体，而在具体的具体实施例中，向患有PD的个体提供PGC1α表达的调节剂，如其表达的诱导物。某些具体实施例中，PGC1α表达的诱导物的水平可以是任意水平，只要其提供对包括PD在内的神经障碍的至少一种症状的缓解即可。在至少一些情况下，与标准的表达水平相比，该表达水平被增加至少2、3、4、5、10、25、50、100、1000、或更多倍。可使用该领域中的标准方法，如北方墨点分析法或定量PCR监控个体本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种预防或治疗受试者的帕金森症的方法，其包含向该受试者给药有效量的一种或多种诱导物，该诱导物诱导过氧化物酶体增殖物激活受体‑γ共激活剂‑1α(PGC‑1α)的表达。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.03.17 US 62/309,5831.一种预防或治疗受试者的帕金森症的方法，其包含向该受试者给药有效量的一种或多种诱导物，该诱导物诱导过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活剂-1α(PGC-1α)的表达。2.如权利要求1所述的方法，其中，该诱导物是法尼醇或其药学可接受的盐、溶剂合物、磷酸酯衍生物或立体异构体。3.如权利要求2所述的方法，其中，该法尼醇是口服给药。4.如权利要求2或3所述的方法，其中，该法尼醇的给药量为导致该受试者体内NRF-1的mRNA水平增加至高于未向该受试者给药法尼醇时水平的量。5.如权利要求2至4中任一项所述的方法，其中，该法尼醇的给药量为令该受试者脑内法尼基转移酶的活性比未向该受试者给药法尼醇时的活性增加的量。6.如权利要求2至5中任一项所述的方法，其中，该法尼醇的给药量为令该受试者脑内parkin相互作用底物(PARIS)的法尼基化比未向该受试者给药法尼醇时的法尼基化增加的量。7.如权利要求6所述的方法，其中，该法尼基化出现于PARIS的残基631处的半胱氨酸残基上。8.如权利要求2至7中任一项所述的方法，其中，当与未给药法尼醇的该受试者相比，该法尼醇实质上消除了结合至其靶标DNA的PARIS。9.如权利要求2至8中任一项所述的方法，其中，当与未给药法尼醇的该受试者相比，该法尼醇预防该受试者体内多巴胺神经元的丢失。10.一种预防或治疗受试者的帕金森症的方法，包含向该受试者给药有效量的选自由AVS-3648、ABT-0529、法尼醇、及其组合、或其药学可接受的盐、溶剂合物、磷酸酯衍生物或立体异构体所组成组的实体。11.如权利要求10所述的方法，其中，该实体是口服给药的。12.如权利要求10或11所述的方法，其中，该实体的给药量为导致该受试者体内NRF-1的mRNA水平增加至高于未向该受试者给药该实体时水平的量。13.如权利要求10、11或12所述的方法，其中，该实体的给药量为令该受试者脑内法尼基转移酶的活性比未向该受试者给药该实体时的活性增加的量。14.如权利要求10至13中任一项所述的方法，其中，该实体的给药量为令该受试者脑内的PARIS法尼基化比未向该受...

【专利技术属性】
技术研发人员：申周虎，曹雅凛，李尹宗，T·M·道森，V·L·道森，
申请(专利权)人：约翰·霍普金斯大学，
类型：发明
国别省市：美国,US