卷曲乳杆菌制剂及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种微生态制剂及其应用，具体涉及主要活性成分包含卷曲乳杆菌的微生态制剂，及该制剂在预防或治疗相关疾病中的应用。

Lactobacillus curvulus preparation and its application

The invention relates to a microecological preparation and its application, in particular to a microecological preparation containing Lactobacillus curvulus as the main active ingredient and its application in the prevention or treatment of related diseases.

【技术实现步骤摘要】
卷曲乳杆菌制剂及其应用
本专利技术涉及一种微生态制剂及其应用，具体涉及主要活性成分包含卷曲乳杆菌的微生态制剂，及该制剂在预防或治疗相关疾病中的应用。
技术介绍
卷曲乳杆菌是女性阴道常见有益菌，对于维护女性阴道健康发挥了重要作用，但由于滥用抗生素等原因，导致女性阴道卷曲乳杆菌大量减少，阴道菌群失调，发生大肠杆菌、金黄色葡萄球菌或白色念珠菌感染，导致各种阴道疾病发生。分离卷曲乳杆菌开发微生态制剂成为目前研究的热点，但生长活性高、抑制致病菌效果好的卷曲乳杆菌的筛选是目前的难点。本专利技术人经过研究发现，卷曲乳杆菌DH200具有高的生物活性，主要活性成分包含卷曲乳杆菌DH200的微生态制剂可以有效调节机体微生态平衡，预防或治疗相关疾病，安全没有任何毒副作用，具有巨大的经济价值和社会价值，且未见相关研究报道，特申请此专利技术专利。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种微生态制剂，该制剂的主要活性成分包含DH200，保藏编号CGMCCNo.16193，并提供该制剂在预防或治疗相关疾病中的应用。根据菌种细胞形态、生理生化特征、16SrRNA序列对比分析等结果来确认菌株在分类学地位，发现编号DH200的菌株为卷曲乳杆菌；该株菌在形态学及一般性质上的特征如下：细胞形态和理化实验结果：本专利技术所述卷曲乳杆菌DH200，抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌或白色念珠菌的作用显著，具有预防或治疗大肠杆菌、金黄色葡萄球菌或白色念珠菌感染的应用，具有预防或治疗阴道炎的应用，阴道炎包括细菌性阴道病、霉菌性、老年性阴道炎，霉菌性阴道炎进一步包括念珠菌性阴道炎。本专利技术的微生态制剂也可作为有效组成成分应用在相关组合物中用来预防或治疗上述疾病。本专利技术人经多次筛选和培育，分离得到一株卷曲乳杆菌菌株DH200，该菌株较其他菌株具有更高的活性，更优异的调节机体微生态平衡能力和益生作用。本专利技术所述卷曲乳杆菌还包括衍生自卷曲乳杆菌DH200的菌株，尤其是具有高活性，或具有优异的调节机体微生态平衡能力和益生作用的衍生菌株。主要活性成分包含卷曲乳杆菌DH200及其衍生菌株的微生态制剂均落入本专利技术的保护范围。本专利技术所述微生态制剂，主要活性成分包括但不限于卷曲乳杆菌DH200，保藏编号CGMCCNo.16193，也可加入其他活菌、水苏糖、低聚果糖等低聚糖或其他活性成分。本专利技术的微生态制剂，是以所述卷曲乳杆菌作为主要活性成分或主要活性成分之一，按照一定的制剂工艺，加入常规的赋形剂、调味剂、崩解剂、防腐剂、润滑剂、湿润剂、黏合剂、溶剂、增稠剂、增溶剂等辅料，制成的任何一种适合于使用的剂型，如片剂、栓剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、液体制剂、粉剂等剂型。本专利技术所述微生态制剂包括但不限于药品组合物、保健品、食品或消毒产品，消毒产品进一步包括抑菌制剂。本微生态制剂所述卷曲乳杆菌指活的生物个体。本微生态制剂所述卷曲乳杆菌具有高的生物活性。本微生态制剂，固体制剂包含的卷曲乳杆菌总活菌数不低于1×106CFU/g，一般在1×107CFU/g以上，最高可达到1×1012CFU/g或1×1012CFU/g以上；或液体制剂包含的卷曲乳杆菌总活菌数不低于1×106CFU/mL，一般在1×107CFU/mL以上，最高可达到1×1012CFU/mL或1×1012CFU/mL以上。具体实施方式制备例说明：上述已经对卷曲乳杆菌制剂的制备进行说明，这里通过卷曲乳杆菌DH200为例进行具体说明，其他卷曲乳杆菌菌种制剂的制备方法本领域技术人员通过本实施例很容易掌握，其他剂型的制备方法本领域技术人员通过本实施很容易掌握，在此不再一一叙述说明。制备方法并不局限于本专利技术实施例所述，公知的能够达到制备目的的方法均可以，实施例的制备说明只是对本专利技术的说明，并不是对本专利技术保护范围的限制。制备实施例1卷曲乳杆菌粉剂的制备1菌粉的制备和菌种的鉴定采取女性阴道分泌物等样品，然后将样品置于灭菌瓶内，从中取2克样品加入18mL灭菌的稀释液中，充分混匀，在无菌操作台内，进行10-1、10-2、10-3、10-4，10-5，10-6，10-7梯度稀释，取10-5，10-6，10-7三个稀释梯度，涂布于MRS固体培养基上，置于培养箱，37℃下培养48小时，选择长势良好的单菌落接种到MRS液体培养基中，37℃下扩增培养48小时。将所得培养液离心(12000rpm)分离出菌体后，将菌体冷冻真空干燥，调制出干燥菌粉，活菌数均为1×1010CFU/g以上，然后进行菌种鉴定。经生理生化和16SrRNA序列对比分析鉴定为卷曲乳杆菌，为卷曲乳杆菌DH200，保藏编号CGMCCNo.16193。2毒性试验2.1动物及分组取20只SPF级别小鼠，6-8周龄，体重14-18g，随机分为卷曲乳杆菌组和未给药组，每组10只。2.2制备菌液将上述卷曲乳杆菌菌粉用纯化水调制为含菌数均为1×109CFU/mL的菌液。2.3方法卷曲乳杆菌组和未给药组均给予相同的基础饲料，且饲养条件均一致，卷曲乳杆菌组每天灌服卷曲乳杆菌菌液0.5mL，未给药组每天灌服纯化水0.5mL，饲喂14天，观察体重及毒性反应。2.4结果各组小鼠均未出现异常情况，未发生振颤、痉挛、运动失调、姿态异常，无眼球突出，排尿正常，皮肤、呼吸正常，无死亡情况，未见中毒反应。3制备成片剂等剂型根据上述步骤和方法分离鉴定后，经实验检验无毒性，就可将卷曲乳杆菌菌种制成菌粉，然后按照需要添加相关辅料制成各种剂型，优选根据卷曲乳杆菌菌粉的活菌数，按比例添加微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁等制成片剂，使活菌数不低于1×107CFU/g，然后装瓶。本专利技术人使用上述分离和制备方法，同时还分离获得了卷曲乳杆菌DH144和卷曲乳杆菌DH134。应用效果实施例说明：本专利技术以卷曲乳杆菌DH200，保藏编号CGMCCNo.16193制成的微生态制剂为代表说明卷曲乳杆菌制剂的应用效果。应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。为更好的说明本专利技术的应用效果，本专利技术人还使用卷曲乳杆菌DH144、卷曲乳杆菌DH134和市售卷曲乳杆菌制成的微生态制剂来进行对比说明。本专利技术中使用的市售卷曲乳杆菌来自于市场销售的活性卷曲乳杆菌产品。下面结合具体实施例，进一步阐述本专利技术。应用效果实施例1：卷曲乳杆菌的生物活性1菌粉的制备采用上述菌粉的制备方法，制备获得了卷曲乳杆菌DH200、卷曲乳杆菌DH144、卷曲乳杆菌DH134和市售卷曲乳杆菌菌粉。2发酵培养将上述菌粉稀释成含菌数为1×106CFU/mL的菌液，使用液体扩增培养基，在37℃下扩增培养48小时(3个平行)。检测培养液中的卷曲乳杆菌活菌数。3结果经48h扩增培养，卷曲乳杆菌DH200培养液中活菌数显著高于卷曲乳杆菌DH144、卷曲乳杆菌DH134和市售卷曲乳杆菌培养液中活菌数(P＜0.05)，见表1。表1卷曲乳杆菌活菌数(Log10CFU·mL-1，n＝3)4讨论上述实验结果表明同等条件下卷曲乳杆菌DH200明显较其他菌株以及市售菌株生长旺盛。益生菌活性高、繁殖快是其发挥益生作用的基础和保障。实验结果表明卷曲乳杆菌DH200较其他卷曲乳杆菌菌株具有更高的生物活性，具有很高的益生价值。应用效果实施例2：卷曲乳杆菌对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌或白色念珠菌的抑制作用1材料与方法融化MH培本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种微生态制剂，其特征在于该制剂主要活性成分包括卷曲乳杆菌，所述卷曲乳杆菌包括卷曲乳杆菌DH200，保藏编号CGMCC No.16193。

【技术特征摘要】
1.一种微生态制剂，其特征在于该制剂主要活性成分包括卷曲乳杆菌，所述卷曲乳杆菌包括卷曲乳杆菌DH200，保藏编号CGMCCNo.16193。2.按权利要求1所述的微生态制剂，其特征在于卷曲乳杆菌指活的生物个体。3.按权利要求1所述的微生态制剂，其特征在于所述制剂包括药品组合物、保健品、食品或消毒产品，消毒产品进一步包括抑菌制剂。4.按权利要求1所述的微生态制剂，其特征在于卷曲乳杆菌具有高的生物活性。5.权利要求1所述的微生态制剂在制备预防或治疗大肠杆菌、金黄色葡萄球菌或白色念珠菌感染制剂中的应用。6.按权利要求5所述应用，其特征在于所述微生态制剂在制备抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌或白色念珠菌制剂中的应用。7.权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔云龙，李洪福，赵婀姿，
申请(专利权)人：青岛东海药业有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37