一种柿叶发酵提取液及制备方法与应用技术

本发明专利技术提出涉及来源于纯天然材料的发酵提取物和制备方法及应用，具体地，涉及柿叶发酵提取液及其制备方法和用于化妆品领域的应用。所述柿叶发酵提取物包括多糖、黄酮、多酚、蛋白、维生素C组分，所述发酵提取液的制备方法包括柿叶的烘干、粉碎后，以离子水混合均匀灭菌，加入酿酒酵母菌发酵后，离心取得柿叶发酵提取液。本发明专利技术的发酵提取物能够通过添加不同的功能性材料实现不同的功能，使其在化妆品领域广泛应用，本发明专利技术的发酵提取物制备方法中无需添加有机溶剂、通过酵母菌发酵，由于无外源碳源和氮源，单纯利用柿叶本身成分发酵，因而使得反应体系纯净，节省原料成本，发酵时间短，制备过程简单，且提取液方便回收。

A Fermentation Extract of Persimmon Leaves and Its Preparation Method and Application

The present invention relates to fermentation extract from pure natural material, preparation method and application, in particular to persimmon leaf fermentation extract, preparation method and application in cosmetics field. The fermentation extract of persimmon leaves includes polysaccharides, flavonoids, polyphenols, proteins and vitamin C components. The preparation method of the fermentation extract includes drying and crushing persimmon leaves, homogeneous sterilization with ionic water, fermentation with Saccharomyces cerevisiae and centrifugation to obtain the fermentation extract of persimmon leaves. The fermentation extract of the present invention can achieve different functions by adding different functional materials, so that it can be widely used in cosmetics field. The fermentation extract preparation method of the present invention does not need to add organic solvents and ferment by yeast. Because there are no external carbon and nitrogen sources, the fermentation of persimmon leaves can be carried out solely by utilizing the components of persimmon leaves themselves, thus purifying the reaction system and saving the cost of raw materials. The fermentation time is short, the preparation process is simple, and the extract is easy to recover.

【技术实现步骤摘要】
一种柿叶发酵提取液及制备方法与应用
本专利技术涉及来源于纯天然材料的发酵提取物，具体涉及一种柿叶发酵提取液及其制备方法和应用
技术介绍
柿子叶(简称柿叶)为我国常见植物柿子树新鲜或干燥时的叶子，主要产地有我国华东、中南及辽宁、河北、山西、陕西、甘肃、台湾等地。柿叶的主要成分包含机酸类、黄酮类、维生素C、多糖、胡萝卜素、多酚类、脂肪酸、香豆素类、植物甾醇等，主要有治疗心脑血管疾病、抗氧化、抗癌、活血止血、抗菌、解热、抗老化、防晒等作用，使其在药品、食品、化妆品领域都有着巨大的市场价值和发展前景。目前，在现有研究或市场中，将柿叶作为原材料进一步加工制备产品已有报道，例如，中国专利CN105779210A公开了柿叶酒的发酵制备方法，主要通过先将柿叶用80-90℃的热水烫漂，随后制成柿叶原浆，将蔗糖作为柿叶发酵的碳源，在7-12天厌氧发酵柿叶后，以明胶澄清处理后制得柿叶酒，然而这种方法的缺陷在于，热水烫漂容易使柿叶中的天然成份受到高温破坏，不能最大限度的保持柿叶中对人体有益的天然成份；中国专利CN101194921B公开了柿叶黄酮提取物的制备方法及其制备/预防糖脂代谢相关疾病的药物，主要通过将原料加热煎煮，过滤，乙醇沉淀后，以乙酸乙酯萃取，又通过大孔树脂吸附，乙醇洗脱得到黄酮提取物后将其应用。然而，虽然采用这些方法能够利用纯天然植物柿叶，发挥柿叶中成分的作用，得到更具备市场应用的产品，但是在制备方法中常常需要添加蔗糖或其他成分作为发酵的碳源，这些物质的加入，使制备成分复杂，成本增高；另外，在制备过程中，使用有机溶剂进行萃取，影响提取物的性能；而产品的的后处理回收中，明胶澄清处理，这也造成了工艺繁琐。CN107468568A公开了一种具有美白防晒活性的柿叶多酚及其制备方法和应用，包含如下制备步骤：(1)将柿叶残渣经40～60℃干燥，过60～80目筛后，得到柿叶残渣粉末；(2)将柿叶残渣粉末，加入3倍重量份的蒸馏水，调节PH至5.5，加入蛋白酶后充分混匀，置于60℃恒温水浴保温1h后，加入有机提取剂静置8h，超声处理20min，3000r/min转速离心，得上清液，重复2次，合并上清液，减压回收有机提取剂，得浓缩液；(3)将浓缩液用有机萃取剂进行萃取，将混合后的萃取液静置10h，待其分层后弃去有机萃取剂层，减压浓缩，真空冷冻干燥，得柿叶多酚。本专利技术能够清除自由基，具有抗氧化作用，能够很好地吸收紫外线，抑制黑色素的生成，从而达到美白防晒的功效。然而，该方法在制备过程中加入了有机提取剂，众所周知，有机溶剂对于人体及皮肤均具有伤害，此类产品长期使用造成不良影响。CN107440963A公开了一种具有美白抗衰老活性的柿叶黄酮及其制备方法和应用，包含以下制备步骤：(1)将柿叶残渣，经过干燥粉碎得到柿叶残渣粉末；(2)将柿叶残渣粉末，加入8倍重量份的无水乙醇，均匀分散后，在75℃水浴恒温煎煮2次，各1～2小时，过滤得滤液；(3)将滤液采用旋转蒸发仪回收液中乙醇溶液，得浓缩液；(4)将浓缩液置于分液装置中，加入有机萃取剂进行萃取，弃去有机层，减压浓缩，真空冷冻干燥，得柿叶黄酮。本专利技术具有抑制酪氨酸酶、清除自由基、减少活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)，同时增加过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)，起到美白抗衰老的功效。然而，该方法在制备过程中同样也加入了有机提取剂，众所周知，有机溶剂对于人体及皮肤均具有伤害，此类产品长期使用造成不良影响。CN102846518A涉及一种利用微波萃取和膜分离联用技术，提取柿叶中的活性成分柿叶果酸的方法。将晾干的柿叶粉碎后，加入乙醇在常压和微波环境下萃取，再以膜分离技术去除叶绿素，鞣质，树脂，还原糖，多糖等非有机酸类物质，浓缩后依次加碱和酸处理，最后重结晶得到柿叶果酸。本专利技术所用的原料为天然柿子叶，不产生三废，工艺简单且绿色环保。所用萃取时间短，收率高，杂质含量较少，质量稳定，所得产品柿叶果酸已经达到作为化妆品原料所要求，经济效益显著。然而，该方法在制备过程中同样也加入了乙醇作为有机提溶剂，众所周知，有机溶剂对于人体及皮肤均具有伤害，此类产品长期使用造成不良影响。目前较为常用的柿叶提取方法为热水浸提法、酸提取法、碱提取法、酶提取法，而单纯仅使用微生物发酵法提取柿叶活性物还未见报道。因此，开发一种能够不采用有机溶剂对柿叶进行提取的方法，是亟待解决的技术问题。
技术实现思路
本专利技术正是为了克服现有技术中的上述缺陷，提供一种采用天然酵母菌液对柿叶进行处理的提取液，同时，还提供了相应的提取液制备方法及其应用，尤其是作为化妆品的应用。本专利技术的柿叶发酵提取物的制备方法工艺简单、操作容易、发酵速度快、无需添加额外的发酵碳源或氮源、回收方便，本专利技术的柿叶提取过程中中不添加有机溶剂，不影响健康，尤其能够突破性的解决现有技术中柿叶提取物在化妆品领域应用时，有机溶剂对于皮肤和人体健康产生负面影响的技术问题。本专利技术提供一种柿叶发酵提取液的制备方法，所述发酵方法不使用有机溶剂，也不添加额外的碳源和氮源；包括如下步骤：(1)将柿叶烘干至恒重，粉碎成柿叶粉末后备用；(2)取所述柿叶粉末与去离子水按照重量比为1:5-25混合均匀后形成悬浊液，对所述悬浊液进行灭菌处理，得到灭菌后的悬浊液；(3)以所述悬浊液为重量百分比基准，向所述悬浊液中加入1％-10％重量比的酿酒酵母菌液，在25℃--45℃温度下，以100-200r/min进行发酵，得到柿叶发酵液；(4)将步骤(3)得到的所述柿叶发酵液进行离心，取离心后的上层清液即为柿叶发酵提取液。优选地，所述灭菌处理为，在100-200℃高温下灭菌20-60min；更优选地，所述灭菌处理为，在121℃下高温灭菌30min。优选地，所述酿酒酵母菌液的浓度为，在600nm条件下测吸光值(OD600)为0.5-1。更优选地，以所述悬浊液为重量百分比基准，向所述悬浊液中加入5％重量比的酿酒酵母菌液。进一步地，所述制备方法中，发酵时间为12-60小时。进一步地，所述制备方法中，所述柿叶粉末与去离子水的重量比为1:5、1：10、1:15、1:20或1:25。进一步地，所述制备方法中，所述发酵温度为25℃、30℃、35℃、40℃或45℃。进一步地，所述制备方法中，所述发酵时间为12h、24h、36h、48h或60h。进一步地，所述制备方法中，所述柿叶粉末与去离子水的重量比为1:25、所述发酵温度为40℃、所述发酵时间为24h时，所述黄酮的提取率为5.57％。进一步地，所述制备方法中，所述柿叶粉末与去离子水的重量比为1:25、所述发酵温度为40℃、所述发酵时间为36h时，所述黄酮的提取率为7.4％。本专利技术前述方法制备得到的提取液，是一种不使用任何有机溶剂、不需要额外添加碳源和氮源的柿叶发酵提取液，该提取物的主要成份包括总糖、柿叶黄酮、多酚、蛋白质、维生素C组分。进一步地，所述总糖含量为7-13mg/ml、所述蛋白质含量为34-44μg/ml、所述柿叶黄酮含量为4.2-5.3mg/ml、所述多酚含量为0.72-1.2mg/ml、所述维生素C含量为201-230mg/ml。其中，所述黄酮包括山萘酚、黄芪苷、山萘酚3-O-β-D-葡萄糖苷、山萘酚3-O-α-L-本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种柿叶发酵方法，其特征在于，所述发酵方法不使用有机溶剂，也不添加额外的碳源和氮源；所述发酵方法包括如下步骤：(1)将柿叶烘干至恒重，粉碎成柿叶粉末后备用；(2)取所述柿叶粉末与去离子水按照重量比为1:5‑25混合均匀后形成悬浊液，对所述悬浊液进行灭菌处理，得到灭菌后的悬浊液；(3)以所述悬浊液为重量百分比基准，向所述灭菌后的悬浊液中加入1％‑‑10％重量比的酿酒酵母菌液，得到混合反应液，将所述混合反应液在25℃‑‑45℃下，以100‑200r/min进行发酵，得到柿叶发酵液原液；(4)将步骤(3)得到的所述柿叶发酵液原液进行离心，取离心后的上层清液即为柿叶发酵提取液。

【技术特征摘要】
1.一种柿叶发酵方法，其特征在于，所述发酵方法不使用有机溶剂，也不添加额外的碳源和氮源；所述发酵方法包括如下步骤：(1)将柿叶烘干至恒重，粉碎成柿叶粉末后备用；(2)取所述柿叶粉末与去离子水按照重量比为1:5-25混合均匀后形成悬浊液，对所述悬浊液进行灭菌处理，得到灭菌后的悬浊液；(3)以所述悬浊液为重量百分比基准，向所述灭菌后的悬浊液中加入1％--10％重量比的酿酒酵母菌液，得到混合反应液，将所述混合反应液在25℃--45℃下，以100-200r/min进行发酵，得到柿叶发酵液原液；(4)将步骤(3)得到的所述柿叶发酵液原液进行离心，取离心后的上层清液即为柿叶发酵提取液。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中发酵时间为12-60小时。.3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中柿叶粉末与去离子水的重量比为1:5、1：10、1:15、1:20或1:25。4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：张兰英，金雪坤，马信贞，刘彦彦，尹家振，
申请(专利权)人：北京思尔根生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11