一种三倍体鲤鱼的育种方法技术

本发明专利技术公开了一种三倍体鲤鱼的育种方法，涉及鲤鱼育种技术领域，技术方案包括以下步骤：取鲤鱼成熟的卵和精液，混合均匀后撒在筛网上，浸入水中完成授精，得到受精卵；进行静水压力处理后浸入冷水中处理；转移到水中孵化，得到三倍体鲤鱼。本发明专利技术提供的方法便于现场操作、安全可靠、简单易行，三倍体转化率高，在鲤科鱼类三倍体诱导和规模化养殖中具有重要应用价值。

A Breeding Method of Triploid Carp

The invention discloses a breeding method for triploid carp, which relates to the technical field of carp breeding. The technical scheme includes the following steps: taking mature eggs and semen of carp, mixing them evenly, sprinkling them on a screen, immersing them in water to complete fertilization and obtain fertilized eggs; treating them in cold water after hydrostatic pressure treatment; transferring them to water for hatching and obtaining triploid carp. The method provided by the invention is convenient for field operation, safe, reliable, simple and feasible, and has high triploid transformation rate. It has important application value in triploid induction and large-scale breeding of Cyprinidae fish.

【技术实现步骤摘要】
一种三倍体鲤鱼的育种方法
本专利技术涉及鲤鱼育种
，具体涉及一种三倍体鲤鱼的育种方法。
技术介绍
自然界绝大部分鱼类是由二倍体形式存在的，并以两性融合的方式繁殖后代，在二倍体鱼类的性成熟阶段，其性腺发育消耗大量能量，且由于性腺发育阶段和产卵季节鱼肉质量下降并延长上市时间，同时，性腺发育阶段个体生长停滞和死亡率增加，并且个体体型受到很大限制。自然二倍体鱼类需要人工诱导才能产生三倍体。人工诱导三倍体鱼的方法主要有冷休克、热休克、静水压等物理方法，采用化学物质(如6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)、秋水仙素等)处理的化学方法。目前用温度休克、静水压、药物处理等办法抑制受精卵第二极体外排，使染色体组三倍化来生产三倍体鱼在国内外也有不少报道，但大多数仍然处于探索与试验阶段，离实践应用仍有一定的距离，许多结果仍没有完全摸索出最佳的诱导参数，受精卵坏死率高、出苗率低、幼鱼畸形率高及三倍化比率偏低等现象，影响了三倍体产业化的进程。从目前水产养殖行业的发展现状看，如果进一步优化三倍体诱导的处理条件，完善三倍体的诱导方法与技术流程，将会有更多的三倍体鱼类在水产养殖业中应用，促进鱼类养殖业的健康发展。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术提供一种三倍体鲤鱼的育种方法，技术方案包括以下步骤：1)取鲤鱼成熟的卵和精液，混合均匀后撒在筛网上，浸入水中完成授精，得到受精卵；2)将步骤1)得到的受精卵放入静水压力器仓内，进行静水压力处理；3)将步骤2)静水压力处理后的受精卵取出，浸入冷水中处理；4)将步骤3)得到的受精卵转移到水中孵化。步骤1)所述鲤鱼优选镜鲤，更优选松浦镜鲤。步骤1)所述精液和卵的体积比为500μL:(50-100)mL。步骤1)中的水温为23-25℃。步骤1)所述授精过程完成后，受精卵在水中继续发育3-4.5min。步骤2)所述静水压力器仓内有500μg/ml的秋水仙素水溶液，步骤1)所得受精卵浸入秋水仙素水溶液中。步骤2)所述静水压力处理，压力为600kg/cm2，处理时间为3min。步骤2)所述静水压力处理过程中，秋水仙素水溶液温度为23-25℃。步骤3)所述冷水温度为0-2℃，所述处理时间为10-15min。步骤4)中的水温为23-25℃。有益效果本专利技术提供的方法便于现场操作、安全可靠、简单易行，利用本专利技术提供的方法培育三倍体鲤鱼，经检验三倍体转化率为91％，培育得到的三倍体鲤鱼，与普通二倍体相比，红细胞体积比为1.63:1，红细胞核体积比为1.56:1，三倍体鱼红细胞核长径、红细胞面积、核面积以及核体积与二倍体相比，差异极显著；三倍体鲤鱼性腺不发育，精巢切片观察呈现大面积空泡化；3龄鱼对比，三倍体鲤鱼与二倍体鲤鱼体重比为1.7±0.21。利用本方法培育的三倍体鲤鱼，不存在二倍体鱼类的性成熟阶段性腺发育消耗大量能量、由于性腺发育阶段和产卵季节鱼肉质量下降并延长上市时间、性腺发育阶段个体生长停滞和死亡率增加、等问题，在鲤科鱼类三倍体诱导和规模化养殖中具有重要应用价值。附图说明图1二倍体与三倍体鲤大小比较(3龄组)；图23龄二倍体与三倍体性腺差异对比；其中2n表示二倍体，3n表示三倍体；图33龄二倍体鲤鱼精巢组织切片光学显微镜40倍照片；图43龄三倍体鲤鱼精巢组织切片光学显微镜40倍照片；图5二倍体松浦镜鲤红细胞(HE染色)；图6三倍体松浦镜鲤红细胞(HE染色)；图7二倍体松浦镜鲤中期分裂相；图8三倍体松浦镜鲤中期分裂相；图9二倍体松浦镜鲤DNA含量；图10三倍体松浦镜鲤DNA含量。具体实施方式实施例1一种三倍体鲤鱼的育种方法，包括以下步骤：1)取鲤鱼成熟的卵和精液，混合均匀后撒在筛网上，浸入水中完成授精，得到受精卵；2)将步骤1)得到的带有受精卵的筛网迅速折叠放入静水压力器仓内，进行静水压力处理；3)将步骤2)静水压力处理后的受精卵取出，浸入冷水中处理；4)将步骤3)得到的受精卵转移到水中孵化。步骤1)所述鲤鱼为松浦镜鲤。步骤1)所述精液和卵的体积比为500μL:100mL。步骤1)中的水温为23℃。步骤1)所述授精过程完成后，受精卵在水中继续发育3min。步骤2)所述静水压力器仓内有500μg/ml的秋水仙素水溶液，步骤1)所得受精卵浸入秋水仙素水溶液中。步骤2)所述静水压力处理，压力为600kg/cm2，处理时间为3min。步骤2)所述静水压力处理过程中，秋水仙素水溶液温度为23℃。步骤3)所述冷水温度为0℃，所述处理时间为10min。步骤4)中的水温为23℃。步骤1)-3)受精卵均在筛网承载下进行操作。实施例2一种三倍体鲤鱼的育种方法，包括以下步骤：1)取鲤鱼成熟的卵和精液，混合均匀后撒在筛网上，浸入水中完成授精，得到受精卵；2)将步骤1)得到的带有受精卵的筛网迅速折叠放入静水压力器仓内，进行静水压力处理；3)将步骤2)静水压力处理后的受精卵取出，浸入冷水中处理；4)将步骤3)得到的受精卵转移到水中孵化。步骤1)所述鲤鱼为松浦镜鲤。步骤1)所述精液和卵的体积比为500μL:50mL。步骤1)中的水温为25℃。步骤1)所述授精过程完成后，受精卵在水中继续发育4.5min。步骤2)所述静水压力器仓内有500μg/ml的秋水仙素水溶液，步骤1)所得受精卵浸入秋水仙素水溶液中。步骤2)所述静水压力处理，压力为600kg/cm2，处理时间为3min。步骤2)所述静水压力处理过程中，秋水仙素水溶液温度为25℃。步骤3)所述冷水温度为2℃，所述处理时间为15min。步骤4)中的水温为25℃。步骤1)-3)受精卵均在筛网承载下进行操作。实施例3一种三倍体鲤鱼的育种方法，包括以下步骤：1)取鲤鱼成熟的卵和精液，混合均匀后撒在筛网上，浸入水中完成授精，得到受精卵；2)将步骤1)得到的带有受精卵的筛网迅速折叠放入静水压力器仓内，进行静水压力处理；3)将步骤2)静水压力处理后的受精卵取出，浸入冷水中处理；4)将步骤3)得到的受精卵转移到水中孵化。步骤1)所述鲤鱼为松浦镜鲤。步骤1)所述精液和卵的体积比为500μL:80mL。步骤1)中的水温为24℃。步骤1)所述授精过程完成后，受精卵在水中继续发育4min。步骤2)所述静水压力器仓内有500μg/ml的秋水仙素水溶液，步骤1)所得受精卵浸入秋水仙素水溶液中。步骤2)所述静水压力处理，压力为600kg/cm2，处理时间为3min。步骤2)所述静水压力处理过程中，秋水仙素水溶液温度为24℃。步骤3)所述冷水温度为1℃，所述处理时间为13min。步骤4)中的水温为24℃。步骤1)-3)受精卵均在筛网承载下进行操作。对比例实验组11)取鲤鱼成熟的卵和精液，混合均匀后撒在筛网上，浸入水中完成授精，得到受精卵；2)将步骤1)得到的带有受精卵的筛网迅速折叠放入静水压力器仓内，进行静水压力处理；3)将步骤2)静水压力处理后的受精卵取出，转移到水中孵化；步骤1)所述鲤鱼为松浦镜鲤。步骤1)所述精液和卵的体积比为500μL:80mL。步骤1)中的水温为24℃。步骤1)所述授精过程完成后，受精卵在水中继续发育4min。步骤2)所述静水压力器仓内有水，步骤1)所得受精卵浸入水中。步骤2)所述静水压力处理，压力为600kg/cm2，处理时间为3min。步骤3)中的水温为24℃。步骤1)-2)本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种三倍体鲤鱼的育种方法，其特征在于：包括以下步骤：1)取鲤鱼成熟的卵和精液，混合均匀后撒在筛网上，浸入水中完成授精，得到受精卵；2)将步骤1)得到的受精卵放入静水压力器仓内，进行静水压力处理；3)将步骤2)静水压力处理后的受精卵取出，浸入冷水中处理；4)将步骤3)得到的受精卵转移到水中孵化。

【技术特征摘要】
1.一种三倍体鲤鱼的育种方法，其特征在于：包括以下步骤：1)取鲤鱼成熟的卵和精液，混合均匀后撒在筛网上，浸入水中完成授精，得到受精卵；2)将步骤1)得到的受精卵放入静水压力器仓内，进行静水压力处理；3)将步骤2)静水压力处理后的受精卵取出，浸入冷水中处理；4)将步骤3)得到的受精卵转移到水中孵化。2.根据权利要求1所述的三倍体鲤鱼的育种方法，其特征在于：步骤1)所述精液和卵的体积比为500μL:(50-100)mL。3.根据权利要求1所述的三倍体鲤鱼的育种方法，其特征在于：步骤1)中的水温为23-25℃。4.根据权利要求1所述的三倍体鲤鱼的育种方法，其特征在于：步骤1)所述授精过程完成后，受精卵在水中继续发育3-4.5mi...

【专利技术属性】
技术研发人员：薛淑群，石连玉，李池陶，
申请(专利权)人：中国水产科学研究院黑龙江水产研究所，
类型：发明
国别省市：黑龙江,23