一种甜叶菊发酵产物及其极性组分和在制备香肠防腐剂中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种甜叶菊发酵产物及其极性组分和在制备香肠防腐剂中的应用，所述甜叶菊发酵产物通过以下制备方法制得：将甜叶菊叶片去杂后进行干燥粉碎，过筛，灭菌冷却至室温；接种植物乳杆菌、酵母菌、放线菌和黑曲霉种子液，震荡培养；发酵结束后，用纱布过滤并离心，浓缩后，加入乙酸乙酯进行萃取，合并萃取液，浓缩得到膏状物样品；将得到的膏状物样品用DMSO配制成样品溶液，低温保存。本发明专利技术的甜叶菊发酵产物在香肠防腐中具有广泛的应用，可以延长香肠的货架期，具有广泛的市场应用前景。

A Fermentation Product of Stevia rebaudiana and Its Polar Components and Their Application in the Preparation of Sausage Preservatives

The invention provides a fermentation product of Stevia rebaudiana and its polar components and its application in the preparation of sausage preservatives. The fermentation product of Stevia rebaudiana is prepared by the following preparation methods: the leaves of Stevia rebaudiana are dried, crushed, screened, sterilized and cooled to room temperature; the seeds of Lactobacillus plantarum, yeast, actinomycetes and Aspergillus Niger are inoculated and cultured concussively after fermentation; After filtration and centrifugation with gauze, ethyl acetate was added to extract the paste sample, then the paste sample was concentrated by combining the extract solution. The paste sample was prepared with DMSO and stored at low temperature. The fermentation product of Stevia rebaudiana has wide application in sausage preservation, can prolong the shelf life of sausage, and has wide market application prospect.

【技术实现步骤摘要】
一种甜叶菊发酵产物及其极性组分和在制备香肠防腐剂中的应用
本专利技术属于食品
，具体涉及一种甜叶菊发酵产物及其极性组分和在制备香肠防腐剂中的应用。
技术介绍
目前为了防止食品腐败，延长食品的货架期，控制食品微生物的主要措施仍是添加化学防腐剂，主要是因为化学防腐剂的合成简单，产量大，成本低，抑菌效果高效等优势。天然防腐剂具有安全高效等独特优势，促使其在食品工业中的应用前景十分宽广，在果蔬保鲜等方面的得到应用。目前天然防腐剂按其来源主要分为植物源防腐剂、动物源防腐剂、微生物源防腐剂等几大类。植物源防腐剂是指直接从植物中提取具有抗菌等生理活性物质，这些活性成分大部分是可以被人体代谢的植物次生代谢产物，具有无毒高效等优势。同时我国的植物资源丰富且极大部分未被充分利用，为植物源防腐剂的研发提功力宝贵资源，因此成为国内学者在天然防腐剂方面重要的研究对象。目前在延长香肠货架期的技术中，化学防腐剂，如硝酸盐类由于能达到呈色、保水、防腐和产生独特风味而在香肠中的应用逐渐变广变深。但是由于亚硝酸盐存在潜在的健康风险(致癌等)，特别是在富含蛋白质的食品中，亚硝酸盐的致癌性更加显著。所以目前的研究方向是寻找可替代化学防腐剂的天然防腐剂，在植物源防腐剂中寻找逐渐成为主流。由于高效安全、无副作用等特点，微生物发酵产物在抑制食源性细菌或真菌中的应用逐渐受到关注。甜叶菊作为一种我国高种植量、经济价值较高的作物，其提取物的抑菌活性被广泛研究和利用，无论是食品行业还是动物饲料等方面的应用都十分广阔。但是甜叶菊发酵产物的的抑菌活性及防腐应用的研究比较少。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供了一种甜叶菊发酵产物及其极性组分和在制备香肠防腐剂中的应用，本专利技术所述甜叶菊发酵产物可以有效延长香肠的保质期，从而弥补现有技术的不足，为甜叶菊发酵产物作为一种天然防腐剂提供了参考。为实现上述专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案予以实现：本专利技术提供了一种甜叶菊发酵产物，所述甜叶菊发酵产物的制备方法包括如下步骤：1)先将甜叶菊叶片去杂后进行干燥粉碎，过筛；2)取甜叶菊粉末，加水，然后接种植物乳杆菌、酵母菌、放线菌或黑曲霉的种子液，进行发酵培养；3)发酵结束后，过滤、离心并浓缩得到发酵液，再加入乙酸乙酯进行萃取，得到萃取液，浓缩得到膏状物样品即为甜叶菊发酵产物；4)将所述膏状物样品用DMSO配制成溶液，低温保存。进一步的：所述步骤(2)中甜叶菊粉末和水的料液比为1∶15-1∶25，以W∶V计。进一步的：所述步骤(2)中发酵培养条件分别为植物乳杆菌：37℃，130r/min，24h；酵母菌：28℃，180r/min，48h；放线菌：28℃，180r/min，24h；黑曲霉：28℃，130r/min，48h。进一步的：所述步骤(3)中发酵液和乙酸乙酯的体积比为1∶1-1∶5。本专利技术还提供了权利要求1所述的甜叶菊发酵物制得的极性组分，所述极性组分通过以下方法制得：将所述甜叶菊发酵物上样，洗脱剂分别为氯仿∶甲醇＝100∶0，100∶1，100∶4，100∶8，100∶16，得到极性由小到大5个组分，分别为SFC-1，SFC-2，SFC-3，SFC-4，SFC-5。本专利技术还提供了所述的甜叶菊发酵产物在制备香肠防腐剂中的应用。进一步的：经不同微生物发酵后的所述甜叶菊发酵物的抑菌效果由高到低依次为植物乳杆菌＞黑曲霉＞酵母菌＞放线菌。本专利技术还提供了所述的甜叶菊发酵产物极性组分SFC-4在制备香肠防腐剂中的应用。进一步的：所述极性组分SFC-4按1.0mg/kg～1.75mg/kg的比例添加到香肠中。与现有技术相比，本专利技术的优点和技术效果是：本专利技术经过试验证明添加甜叶菊发酵产物后的香肠，菌落总数、过氧化值以及酸价的值变化幅度都不大，且与空白组相比，各指标的值都明显减少。发酵产物对紫外光照时间、温度、盐浓度以及pH值均具有稳定性，添加甜叶菊发酵产物后的香肠的理化指标和微生物的指标均符合国家标准。本专利技术利用微生物转化技术及柱层层析分离技术对甜叶菊发酵液粗分离，为其在食品行业中的应用提供了基础条件。为以后甜叶菊产物的防腐应用提供了理论依据。可应用于食品内层包装抗氧化缓控释体系，能够促进人体健康，推进食品内包装产业的科技创新。附图说明图1是相同浓度下不同组分的抑菌效果实验结果图；图2是不同温度下SFC-4的抑菌活性实验结果图；图3是不同pH下SFC-4的抑菌活性实验结果图；图4是不同紫外光照时间下SFC-4的抑菌活性实验结果图；图5是不同盐浓度下SFC-4的抑菌活性实验结果图；图6是不同SFC-4添加量下香肠的感官评定实验结果图；图7是不同SFC-4添加量下香肠pH值实验结果图；图8是香肠中菌落总数的实验结果图；图9是香肠的过氧化值的实验结果图；图10是香肠中酸价的实验结果图。具体实施方式下面结合附图和实施例对本专利技术的技术方案进行详细的描述。实施例1：甜叶菊不同发酵产物的制备1、原材料的预处理甜叶菊叶片去杂后进行干燥粉碎，过15目标准筛，密封保存，备用。2、种子液的培养将保存于4℃冰箱中的酵母菌、放线菌、植物乳杆菌及黑曲霉(市售菌种即可)，分别接种到YPD、高氏1号、MRS及PDA培养基中，置于恒温摇床培养箱中恒温培养(酵母菌：28℃，180r/min，48h；放线菌：28℃，180r/min，24h；植物乳杆菌：37℃，130r/min，24h；黑曲霉：28℃，120r/min，48h)。3、甜叶菊不同发酵产物的制备称取一定量甜叶菊粉末，加水，按料液比1∶20(W∶V)，装液量40％，pH为6.8，灭菌冷却至室温后，分别接种植物乳杆菌、酵母菌、放线菌和黑曲霉种子液中的其中之一，接种量为7％，然后震荡培养(植物乳杆菌：37℃，130r/min，24h；酵母菌：28℃，180r/min，48h；放线菌：28℃，180r/min，24h；黑曲霉：28℃，130r/min，48h)，发酵结束后，六层纱布过滤并离心(5000r/min，15min)，浓缩3倍后，按体积比(V发酵液∶V乙酸乙酯＝1∶2)加入乙酸乙酯进行萃取，萃取三次后合并萃取液，浓缩得到膏状物样品，用DMSO配制成浓度为300mg/mL的样品溶液，低温保存，用于抑菌活性的测定。实施例2：抑菌活性的测定用接种环挑取一环于10mL液体培养基中，37℃下培养8～12h。然后用无菌生理盐水调整菌悬液的浓度为106～107cfu/mL，备用。吸取上述菌悬液100μL于平板底部，然后向平板内倒入温度已经下降到50℃～55℃的LB营养琼脂15～20mL左右，混匀并凝固后，用直径为5mm的打孔器进行打孔，每个平板打6个孔，分别加入20μL样品和对照品，以pH为酸性条件的山梨酸作阳性对照，DMSO作阴性对照。37℃倒置培养8～12h，然后用十字交叉法量取抑菌圈直径，实验重复三次。甜叶菊在不同微生物发酵后得到的发酵液，其乙酸乙酯提取物的抑菌活性如表1所示，其中样品1：放线菌甜叶菊发酵液提取物，样品2：酵母菌甜叶菊发酵液提取物，样品3：植物乳杆菌甜叶菊发酵液提取物，样品4：黑曲霉甜叶菊发酵液提取物，阴性对照：二甲基亚砜(DMSO)，阳性对照：酸性山梨酸钾溶液(20mg/mL)表1.不同微生物发酵产物的抑菌活性的测定注：同一列不同字母上标代表数值本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种甜叶菊发酵产物，其特征在于所述甜叶菊发酵产物的制备方法包括如下步骤：1）先将甜叶菊叶片去杂后进行干燥粉碎，过筛；2）取甜叶菊粉末，加水，然后接种植物乳杆菌、酵母菌、放线菌或黑曲霉的种子液，进行发酵培养；3）发酵结束后，过滤、离心并浓缩得到发酵液，再加入乙酸乙酯进行萃取，得到萃取液，浓缩得到膏状物样品即为甜叶菊发酵产物；4）将所述膏状物样品用DMSO配制成溶液，低温保存。

【技术特征摘要】
1.一种甜叶菊发酵产物，其特征在于所述甜叶菊发酵产物的制备方法包括如下步骤：1）先将甜叶菊叶片去杂后进行干燥粉碎，过筛；2）取甜叶菊粉末，加水，然后接种植物乳杆菌、酵母菌、放线菌或黑曲霉的种子液，进行发酵培养；3）发酵结束后，过滤、离心并浓缩得到发酵液，再加入乙酸乙酯进行萃取，得到萃取液，浓缩得到膏状物样品即为甜叶菊发酵产物；4）将所述膏状物样品用DMSO配制成溶液，低温保存。2.根据权利要求1所述的甜叶菊发酵产物，其特征在于：所述步骤（2）中甜叶菊粉末和水的料液比为1:15-1:25，以W:V计。3.根据权利要求1所述的甜叶菊发酵产物，其特征在于：所述步骤（2）中发酵培养条件分别为植物乳杆菌：37℃，130r/min，24h；酵母菌：28℃，180r/min，48h；放线菌：28℃，180r/min，24h；黑曲霉：28℃，130r/min，48h。4.根据权利要求1所述的甜叶菊发酵产物，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：朴美子，
申请(专利权)人：青岛海思达生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37