一种微卫星不稳定性基因突变检测的复合扩增体系和试剂盒制造技术

本发明专利技术属于生物技术领域，尤其涉及一种微卫星不稳定性基因突变检测的复合扩增体系和试剂盒。本发明专利技术提供了一种微卫星不稳定性基因突变检测的复合扩增体系，复合扩增体系同时对单核苷酸微卫星基因位点和二核苷酸微卫星基因位点进行扩增；所述单核苷酸微卫星基因位点包括NR‑21、NR‑22、NR‑24、NR‑27、BAT‑25、BAT‑26和MONO‑27，所述二核苷酸微卫星基因位点包括D2S123、D17S250、D18S34和D5S346中的一个或多个。本发明专利技术中，将单核苷酸微卫星位点和二核苷酸微卫星位点相结合对MSI进行检测分析，能够有效提高检测准确性与灵敏度，可用于快速检测肿瘤的分型以指导治疗。

【技术实现步骤摘要】
一种微卫星不稳定性基因突变检测的复合扩增体系和试剂盒
本专利技术属于生物
，尤其涉及一种微卫星不稳定性基因突变检测的复合扩增体系和试剂盒。本申请要求2018年07月06日提交的中国专利(专利申请号为201810737101.5)的权益，在此将上述申请的全部内容引用并入本文。
技术介绍
近年来大量研究表明，肿瘤发生与错配修复系统密切相差，尤其是在结直肠癌、胃癌、子宫内膜癌等。由于错配修复(mismatchrepair,MMR)基因的突变及功能异常，使基因组的复制错误不能及时修复，复制错误频率发生不断积累，从而使细胞基因组DNA序列发生改变，或造成某些抑癌基因失活或癌基因激活而导致细胞的异常转化和恶性增生。检测错配修复系统成为诊断这类肿瘤的方法之一。在临床上用于肿瘤错配修复系统的检测方法主要有以下两种：第一种是错配修复基因的突变检测，该方法主要检测与错配修复高度相关的基因如hMSH2、hMLH1、hMLH6、PMS2等，先提取DNA进行PCR扩增，再对PCR产物进行测试，该方法需要检测多种基因，操作繁琐，检测周期长，且检测费用高。第二种是免疫组织化学(Immunohistochem本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种微卫星不稳定性基因突变检测的复合扩增体系，其特征在于，复合扩增体系同时对单核苷酸微卫星基因位点和二核苷酸微卫星基因位点进行扩增；所述单核苷酸微卫星基因位点包括NR‑21、NR‑22、NR‑24、NR‑27、BAT‑25、BAT‑26和MONO‑27，所述二核苷酸微卫星基因位点包括D2S123、D17S250、D18S34和D5S346中的一个或多个。

【技术特征摘要】
2018.07.06 CN 20181073710151.一种微卫星不稳定性基因突变检测的复合扩增体系，其特征在于，复合扩增体系同时对单核苷酸微卫星基因位点和二核苷酸微卫星基因位点进行扩增；所述单核苷酸微卫星基因位点包括NR-21、NR-22、NR-24、NR-27、BAT-25、BAT-26和MONO-27，所述二核苷酸微卫星基因位点包括D2S123、D17S250、D18S34和D5S346中的一个或多个。2.根据权利要求1所述的复合扩增体系，其特征在于，所述复合扩增体系还同时对四核苷酸微卫星基因位点和性别决定基因位点进行扩增。3.根据权利要求2所述的复合扩增体系，其特征在于，所述四核苷酸微卫星基因位点包括D13S317和D7S820；所述性别决定基因位点包括AMEL。4.根据权利要求1所述的复合扩增体系，其特征在于，所述复合扩增体系包括：用于扩增以下7个单核苷酸微卫星基因位点的特定区域的引物对：NR-21的序列为SEQIDNO:1的特定区域、NR-22的序列为SEQIDNO:2的特定区域、NR-24的序列为SEQIDNO:3的特定区域、NR-27的序列为SEQIDNO:4的特定区域、BAT-25的序列为SEQIDNO:5的特定区域、BAT-26的序列为SEQIDNO:6的特定区域和MONO-27的序列为SEQIDNO:7的特定区域；用于扩增选自以下二核苷酸微卫星基因位点的一个或以上的特定区域的引物对：D2S123的序列为SEQIDNO:8的特定区域、D17S250的序列为SEQIDNO:9的特定区域、D18S34的序列为SEQIDNO:10的特定区域或D5S346的序列为SEQIDNO:11的特定区域。5.根据权利要求4所述的复合扩增体系，其特征在于，所述复合扩增体系还包括：用于扩增以下2个四核苷酸微卫星基因位点的特定区域的引物对：D13S317的序列为SEQIDNO:12的特定区域和D7S820的序列为SEQIDNO:13的特定区域，以及用于扩增性别决定基因位点AMEL的序列为SEQIDNO:14的特定区域的引物对。6.根据权利要求5所述的复合扩增体系，其特征在于，扩增NR-21的引物对选自序列SEQIDNO:1的1-123位的18-26个连续碱基构成的引物，以及选自序列SEQIDNO:1的140-200位的互补序列的18-26个连续碱基构成的引物的组合；扩增NR-22的引物对选自序列SEQIDNO:2的1-130位的18-26个连续碱基构成的引物，以及选自序列SEQIDNO:2的150-250位的互补序列的18-26个连续碱基构成的引物的组合；扩增NR-24的引物对选自序列SEQIDNO:3的1-120位的18-26个连续碱基构成的引物，以及选自序列SEQIDNO:3的140-250位的互补序列的18-26个连续碱基构成的引物的组合；扩增NR-27的引物对选自序列SEQIDNO:4的1-138位的18-26个连续碱基构成的引物，以及选自序列SEQIDNO:4的158-260位的互补序列的18-25个连续碱基构成的引物的组合；扩增BAT-25的引物对选自序列SEQIDNO:5的1-132位的18-26个连续碱基构成的引物，以及选自序列SEQIDNO:5的152-300位的互补序列的18-26个连续碱基构成的引物的组合；扩增BAT-26的引物对选自序列SEQIDNO:6的1-117位的18-26个连续碱基构成的引物，以及选自序列SEQIDNO:6的145-270位的互补序列的18-26个连续碱基构成的引物的组合；扩增MONO-27的引物对选自序列SEQIDNO:7的1-116位的18-26个连续碱基构成的引物，以及选自序列SEQIDNO:7的143-290位的互补序列的18-26个连续碱基构成的引物的组合；扩增D2S123的引物对选自序列SEQIDNO:8的1-132位的18-26个连续碱基构成的引物，以及选自序列SEQIDNO:8的174-310位的互补序列的18-26个连续碱基构成的引物的组合；扩增D17S250的引物对选自序列SEQIDNO:9的1-104位的18-26个连续碱基构成的引物，以及选自序列...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐学明，粟龙稳，黄连成，常宏赏，
申请(专利权)人：广州复能基因有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44