一种食用菌菌种退化检测试剂盒及检测方法技术

一种食用菌菌种退化检测试剂盒及检测方法，试剂盒包括：试剂一：Tris‑HCl缓冲液，MgCl2；试剂二：NADP；试剂三：DHAP；试剂四：GAPD；取食用菌菌丝破碎后，置离心管中，离心，取上清液为TPI酶液；用试剂盒加入100μL TPI酶液充分混匀，酶促反应，紫外分光光度测量T1时吸光值，继续反应测量T2时吸光值，计算TPI酶活力，以原始菌株为对照，对照和检测样本各设置5个平行，采用统计学进行差异显著性分析，当P＜0.05时，判定为退化菌种。优点是：检测试剂盒灵敏度高，重复性好，对检测仪器依赖性低。检测结果通过常规统计学方法即可做出菌种是否已经退化的判定，准确率高。

【技术实现步骤摘要】
一种食用菌菌种退化检测试剂盒及检测方法
本专利技术涉及一种食用菌菌种退化检测试剂盒及检测方法。
技术介绍
食用菌产业的发展需要大量的菌种支持，菌种做为重要的生产资料，对产业的发展起着至关重要的作用，甚至可以说决定了栽培的成败。但是由于菌种属于无性继代培养，培养代数、保藏条件、不良环境因素以及多年形成的分散生产方式，菌种生产缺乏规范，菌种生产和质量频繁出现问题，随着产业发展问题日益突出，渐已成为阻碍食用菌产业发展的瓶颈之一。菌种退化问题导致减产减收时有发生，且在出菇采收前没有理想的检测手段进行判断。产业的发展迫切需要对菌种进行科学有效的管理和评估，为食用菌产业的发展提供源头保障。生物体内各代谢途径间不是孤立的，而是通过共同的中间代谢产物或过渡步骤相联系，彼此能形成复杂的代谢网络，以此实现物质代谢的协调进行及各代谢物间的相互转化。磷酸丙糖则是此复杂代谢网络中的重要节点，可将糖酵解、磷酸戊糖途径、糖异生及甘油磷脂类代谢等相联系，参与机体稳态的维持。在某些情况下，磷酸丙糖代谢异常状态可以表征生物体处于异常状态。
技术实现思路
本专利技术目的在于提供一种食用菌菌种退化检测试剂盒及检测方法，通过使用本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种食用菌菌种退化检测试剂盒，其特征是：该试剂盒组分及使用浓度：试剂一：缓冲液，包括：Tris‑HCl缓冲液，pH7.4，浓度0.01mol/L；MgCl2，浓度0.5mmol/L；试剂二：烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)，浓度10mmol/L；试剂三：二羟基丙酮磷酸酯(DHAP)，浓度10mmol/L；试剂四：3‑磷酸甘油醛脱氢酶(GAPD)，浓度1μmol/L；所述试剂一、试剂二、试剂三和试剂四的体积比为6:1:1:1。

【技术特征摘要】
1.一种食用菌菌种退化检测试剂盒，其特征是：该试剂盒组分及使用浓度：试剂一：缓冲液，包括：Tris-HCl缓冲液，pH7.4，浓度0.01mol/L；MgCl2，浓度0.5mmol/L；试剂二：烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)，浓度10mmol/L；试剂三：二羟基丙酮磷酸酯(DHAP)，浓度10mmol/L；试剂四：3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPD)，浓度1μmol/L；所述试剂一、试剂二、试剂三和试剂四的体积比为6:1:1:1。2.一种利用权利要求1所述食用菌菌种退化检测试剂盒检测食用菌菌种退化的方法，其特征是：具体步骤如下：菌丝破碎、TPI提取：取食用菌菌丝0.2g，液氮研磨破碎后；精确称取破碎菌丝0.1g置离心管中，4℃，8000g离心力下离心10min，取上清液为TPI酶液，置冰上，待测；酶活测定：紫外分光光度计调整波长至340nm，25℃预热20min；1mL石英比色皿中加入试剂一600μL，试剂二、试剂三、试剂四各100μL，加入步骤1提取的100μLTP...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱巍巍，池景良，陈飞，徐冲，李杨，杨云桥，邓春海，孟庆国，陈德伟，王艳华，
申请(专利权)人：辽宁省微生物科学研究院，
类型：发明
国别省市：辽宁,21