T细胞调节性多聚体多肽及其使用方法技术

本公开提供了变体免疫调节多肽，以及包含所述变体免疫调节肽的融合多肽。本公开提供了T细胞调节性多聚体多肽，以及包含所述T细胞调节性多聚体多肽的组合物，其中所述T细胞调节性多聚体多肽包含本公开的变体免疫调节多肽。本公开提供了包含编码所述T细胞调节性多聚体多肽的核苷酸序列的核酸，以及包含所述核酸的宿主细胞。本公开提供了调节T细胞的活性的方法；所述方法包括使所述T细胞与本公开的T细胞调节性多聚体多肽接触。

T-cell regulatory polypeptide and its application

The present disclosure provides a mutant immunoregulatory polypeptide and a fusion polypeptide comprising the mutant immunoregulatory peptide. The present disclosure provides a T cell regulatory polymer polypeptide and a composition comprising the T cell regulatory polymer polypeptide, wherein the T cell regulatory polymer polypeptide comprises the variant immunoregulatory polypeptide of the present disclosure. The present disclosure provides a nucleic acid comprising a nucleotide sequence encoding the regulatory polypeptide of the T cell, and a host cell comprising the nucleic acid. The present disclosure provides a method for regulating the activity of T cells; the method includes contacting the T cells with the T cell regulatory polymer polypeptide of the present disclosure.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】T细胞调节性多聚体多肽及其使用方法交叉引用本申请要求2016年3月2日提交的美国临时专利申请号62/302,654的权益，所述临时专利申请以引用的方式整体并入本文。引言适应性免疫应答涉及存在于T细胞表面上的T细胞受体(TCR)与抗原呈递细胞(APC)表面上非共价呈递的小肽抗原通过主要组织相容性复合物(MHC；在人类中也称为人白细胞抗原(HLA)复合物)接合。这种接合代表了免疫系统靶向机制，并且是T细胞调节(活化或抑制)和效应子功能的必需分子相互作用。在表位特异性细胞靶向后，通过APC上发现的共刺激蛋白与T细胞的对应物共刺激蛋白的接合而活化靶向的T细胞。两种信号–表位/TCR结合和APC共刺激蛋白与T细胞共刺激蛋白的接合–均是驱动T细胞特异性和活化或抑制所必需的。TCR对给定表位具有特异性；然而，共刺激蛋白不是表位特异性的，而是通常在所有T细胞或大T细胞亚群上表达。
技术实现思路
本公开提供了变体免疫调节多肽，以及包含所述变体免疫调节肽的融合多肽。本公开提供了T细胞调节性多聚体多肽，以及包含所述T细胞调节性多聚体多肽的组合物，其中所述T细胞调节性多聚体多肽包含本公开的变体免疫调节多肽。本公开提供了包含编码所述T细胞调节性多聚体多肽的核苷酸序列的核酸，以及包含所述核酸的宿主细胞。本公开提供了调节T细胞的活性的方法；所述方法包括使所述T细胞与本公开的T细胞调节性多聚体多肽接触。本公开提供了一种变体CD80免疫调节多肽，所述变体CD80免疫调节多肽包含与图2A中描绘的CD80氨基酸序列或与SEQIDNO:1中列出的CD80氨基酸序列具有至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％氨基酸序列同一性的氨基酸序列，其中所述变体CD80免疫调节多肽相对于图2A中描绘的CD80氨基酸序列或SEQIDNO:1中列出的CD80氨基酸序列具有一个或多个氨基酸取代；并且其中所述变体CD80免疫调节多肽对具有图3A-3C之一中描绘的氨基酸序列的CD86多肽表现出的结合亲和力与图2A中描绘的CD80氨基酸序列对所述CD86多肽的结合亲和力相比或与SEQIDNO:1中列出的CD80氨基酸序列对所述CD86多肽的结合亲和力相比降低。在一些情况下，所述多肽包含氨基酸取代N19、N63、I67、K86、Q157、D158、L25、Y31、Q33、M38、V39、I49、Y53、D60、F108或S156。在一些情况下，所述多肽包含氨基酸取代N19。在一些情况下，所述多肽包含氨基酸取代I67。在一些情况下，所述多肽包含氨基酸取代K86。在一些情况下，所述多肽包含氨基酸取代Q157。在一些情况下，所述多肽包含氨基酸取代D158。在一些情况下，所述多肽包含氨基酸取代L25。在一些情况下，所述多肽包含氨基酸取代Y31。在一些情况下，所述多肽包含氨基酸取代Q33。在一些情况下，所述多肽包含氨基酸取代M38。在一些情况下，所述多肽包含氨基酸取代V39。在一些情况下，所述多肽包含氨基酸取代I49。在一些情况下，所述多肽包含氨基酸取代Y53。在一些情况下，所述多肽包含氨基酸取代D60。在一些情况下，所述多肽包含氨基酸取代F108。在一些情况下，所述多肽包含氨基酸取代S156。在一些情况下，所述变体免疫调节多肽表现出由图2A中描绘或如SEQIDNO:1中列出的CD80氨基酸序列对所述CD86多肽表现出的结合亲和力的小于10％至小于50％。本公开提供了一种多聚体多肽，所述多聚体多肽包含：a)第一多肽，所述第一多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)表位；ii)第一主要组织相容性复合物(MHC)多肽；以及b)第二多肽，所述第二多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)第二MHC多肽；和ii)任选的免疫球蛋白(Ig)Fc多肽或非Ig支架，其中所述多聚体多肽包含一个或多个免疫调节结构域，其中所述一个或多个免疫调节结构域：A)在所述第一多肽的C-末端；B)在所述第二多肽的N-末端；C)在所述第二多肽的C-末端；或D)在所述第一多肽的C-末端且在所述第二多肽的N-末端，其中所述免疫调节结构域是如上文或本文其他地方所描述的变体免疫调节多肽；并且其中所述多聚体多肽对具有图3A-3C之一中描绘的氨基酸序列的CD28多肽表现出的结合亲和力与包含含有图2A中描绘的CD80氨基酸序列的免疫调节结构域的对照多聚体多肽对所述CD28多肽的结合亲和力相比或与包含含有SEQIDNO:1中列出的CD80氨基酸序列的免疫调节结构域的对照多聚体多肽对所述CD28多肽的结合亲和力相比降低。在一些情况下，所述多聚体多肽包含：a)第一多肽，所述第一多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)表位；ii)第一MHC多肽；和iii)免疫调节结构域；以及b)第二多肽，所述第二多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)第二MHC多肽；和ii)IgFc多肽。在一些情况下，所述多聚体多肽包含：a)第一多肽，所述第一多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)表位；和ii)第一MHC多肽；以及b)第二多肽，所述第二多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)免疫调节结构域；iii)第二MHC多肽；和iv)免疫球蛋白(Ig)Fc多肽。在一些情况下，所述多聚体多肽包含：a)第一多肽，所述第一多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)表位；和ii)第一MHC多肽；以及b)第二多肽，所述第二多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)第二MHC多肽；和ii)IgFc多肽；以及iii)免疫调节结构域。在一些情况下，所述多聚体多肽包含：a)第一多肽，所述第一多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)表位；和ii)第一MHC多肽；以及b)第二多肽，所述第二多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)第二MHC多肽；和ii)免疫调节结构域。在一些情况下，所述多聚体多肽包含：a)第一多肽，所述第一多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)表位；和ii)第一MHC多肽；以及b)第二多肽，所述第二多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)免疫调节结构域；和ii)第二MHC多肽。在一些情况下，所述多聚体多肽包含：a)第一多肽，所述第一多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)表位；ii)第一MHC多肽；和iii)免疫调节结构域；以及b)第二多肽，所述第二多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)第二MHC多肽。在一些情况下，所述非Ig支架是XTEN多肽、转铁蛋白多肽、弹性蛋白样多肽、丝状多肽或丝-弹性蛋白样多肽。在一些情况下，所述第一MHC多肽是β2-微球蛋白多肽；并且其中所述第二MHC多肽是MHCI类重链多肽。在一些情况下，所述β2-微球蛋白多肽包含与图6中列出的氨基酸序列之一具有至少85％氨基酸序列同一性的氨基酸序列。在一些情况下，所述MHCI类重链多肽是HLA-A、HLA-B或HLA-C重链。在一些情况下，所述MHCI类重链多肽包含与图5A-5C之一中列出的氨基酸序列具有至少85％氨基酸序列同一性的氨基酸序列。在一些情况下，所述第一MHC多肽是MHCII类α链多肽；并且其中所述第二MHC多肽是MHCII类β链多肽。在一些情况下，所述表位是T细胞表位。在一些情况下，所述多聚体多肽包含Fc多肽，并且其中所述IgFc多肽是IgG1Fc多肽、IgG2Fc多肽、IgG3Fc多肽、I本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种变体CD80免疫调节多肽，其包含与图2A中描绘的CD80氨基酸序列或与SEQ ID NO:1中列出的CD80氨基酸序列具有至少85％氨基酸序列同一性的氨基酸序列，其中所述变体CD80免疫调节多肽相对于图2A中描绘的所述CD80氨基酸序列或SEQ ID NO:1中列出的所述CD80氨基酸序列具有一个或多个氨基酸取代；并且其中所述变体CD80免疫调节多肽对具有图3A‑3C之一中描绘的氨基酸序列的CD86多肽表现出的结合亲和力与图2A中描绘的所述CD80氨基酸序列对所述CD86多肽的结合亲和力相比或与如SEQ ID NO:1中列出的所述CD80氨基酸序列对所述CD86多肽的结合亲和力相比降低。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.03.02 US 62/302,6541.一种变体CD80免疫调节多肽，其包含与图2A中描绘的CD80氨基酸序列或与SEQIDNO:1中列出的CD80氨基酸序列具有至少85％氨基酸序列同一性的氨基酸序列，其中所述变体CD80免疫调节多肽相对于图2A中描绘的所述CD80氨基酸序列或SEQIDNO:1中列出的所述CD80氨基酸序列具有一个或多个氨基酸取代；并且其中所述变体CD80免疫调节多肽对具有图3A-3C之一中描绘的氨基酸序列的CD86多肽表现出的结合亲和力与图2A中描绘的所述CD80氨基酸序列对所述CD86多肽的结合亲和力相比或与如SEQIDNO:1中列出的所述CD80氨基酸序列对所述CD86多肽的结合亲和力相比降低。2.如权利要求1所述的变体免疫调节多肽，其中所述多肽包含氨基酸取代N19、N63、I67、K86、Q157、D158、L25、Y31、Q33、M38、V39、I49、Y53、D60、F108或S156。3.如权利要求1所述的变体免疫调节多肽，其中所述变体免疫调节多肽表现出由图2A中描绘或如SEQIDNO:1中列出的所述CD80氨基酸序列对所述CD86多肽表现出的结合亲和力的小于10％至小于50％。4.一种多聚体多肽，其包含：a)第一多肽，所述第一多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)表位；ii)第一主要组织相容性复合物(MHC)多肽；以及b)第二多肽，所述第二多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)第二MHC多肽；以及ii)任选的免疫球蛋白(Ig)Fc多肽或非Ig支架，其中所述多聚体多肽包含一个或多个免疫调节结构域，其中所述一个或多个免疫调节结构域：A)在所述第一多肽的所述C-末端；B)在所述第二多肽的所述N-末端；C)在所述第二多肽的所述C-末端；或D)在所述第一多肽的所述C-末端且在所述第二多肽的所述N-末端，其中所述免疫调节结构域是如权利要求1-3中任一项所述的变体免疫调节多肽；并且其中所述多聚体多肽对具有图3A-3C之一中描绘的氨基酸序列的CD28多肽表现出的结合亲和力与包含含有图2A中描绘的所述CD80氨基酸序列的免疫调节结构域的对照多聚体多肽对所述CD28多肽的结合亲和力相比或与包含含有如SEQIDNO:1中列出的所述CD80氨基酸序列的免疫调节结构域的对照多聚体多肽对所述CD28多肽的结合亲和力相比降低。5.如权利要求4所述的多聚体多肽，其中所述多聚体多肽包含：a)第一多肽，所述第一多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)表位；ii)第一MHC多肽；以及iii)免疫调节结构域；以及b)第二多肽，所述第二多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)第二MHC多肽；以及ii)IgFc多肽。6.如权利要求4所述的多聚体多肽，其中所述多聚体多肽包含：a)第一多肽，所述第一多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)表位；以及ii)第一MHC多肽；以及b)第二多肽，所述第二多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)免疫调节结构域；iii)第二MHC多肽；以及ii)免疫球蛋白(Ig)Fc多肽。7.如权利要求4所述的多聚体多肽，其中所述多聚体多肽包含：a)第一多肽，所述第一多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)表位；以及ii)第一MHC多肽；以及b)第二多肽，所述第二多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)第二MHC多肽；以及ii)IgFc多肽；以及iii)免疫调节结构域。8.如权利要求4所述的多聚体多肽，其中所述多聚体多肽包含：a)第一多肽，所述第一多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)表位；以及ii)第一MHC多肽；以及b)第二多肽，所述第二多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)第二MHC多肽；以及ii)免疫调节结构域。9.如权利要求4所述的多聚体多肽，其中所述多聚体多肽包含：a)第一多肽，所述第一多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)表位；以及ii)第一MHC多肽；以及b)第二多肽，所述第二多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)免疫调节结构域；以及ii)第二MHC多肽。10.如权利要求4所述的多聚体多肽，其中所述多聚体多肽包含：a)第一多肽，所述第一多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)表位；ii)第一MHC多肽；以及iii)免疫调节结构域；以及b)第二多肽，所述第二多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)第二MHC多肽。11.如权利要求4所述的多聚体多肽，其中所述非Ig支架是XTEN多肽、转铁蛋白多肽、弹性蛋白样多肽、丝状多肽或丝-弹性蛋白样多肽。12.如权利要求4-11中任一项所述的多聚体多肽，其中所述第一MHC多肽是β2-微球蛋白多肽；并且其中所述第二MHC多肽是MHCI类重链多肽。13.如权利要求12所述的多聚体多肽，其中所述β2-微球蛋白多肽包含与图6中列出的氨基酸序列之一具有至少85％氨基酸序列同一性的氨基酸序列。14.如权利要求11所述的多聚体多肽，其中所述MHCI类重链多肽是HLA-A、HLA-B或HLA-C重链。15.如权利要求12所述的多聚体多肽，其中所述MHCI类重链多肽包含与图5A-5C之一中列出的氨基酸序列具有至少85％氨基酸序列同一性的氨基酸序列。16.如权利要求4-11中任一项所述的多聚体多肽，其中所述第一MHC多肽是MHCII类α链多肽；并且其中所述第二MHC多肽是MHCII类β链多肽。17.如权利要求4-16中任一项所述的多聚体多肽，其中所述表位是T细胞表位。18.如权利要求4-10和12-17中任一项所述的多聚体多肽，其中所述多聚体多肽包含Fc多肽，并且其中所述IgFc多肽是IgG1Fc多肽、IgG2Fc多肽、IgG3Fc多肽、IgG4Fc多肽、IgAFc多肽或IgMFc多肽。19.如权利要求18所述的多聚体多肽，其中所述IgFc多肽包含与图4A-4C中描绘的氨基酸序列具有至少85％氨基酸序列同一性的氨基酸序列。20.如权利要求4-19中任一项所述的多聚体多肽，其中所述第一多肽和所述第二多肽是非共价缔合的。21.如权利要求4-19中任一项所述的多聚体多肽，其中所述第一多肽和所述第二多肽是共价连接的。22.如权利要求21所述的多聚体多肽，其中所述共价键联是经由二硫键。23.如权利要求22所述的多聚体多肽，其中所述第一MHC多肽或所述表位与所述第一MHC多肽之间的接头包含氨基酸取代以提供第一Cys残基，并且所述第二MHC多肽包含氨基酸取代以提供第二Cys残基，并且其中所述二硫键联位于所述第一Cys残基与所述第二Cys残基之间。24.如权利要求4-11中任一项所述的多聚体多肽，其包含插入在所述表位与所述第一MHC多肽之间的第一接头。25.如权利要求4-11中任一项所述的多聚体多肽，其中所述变体CD80免疫调节多肽包含氨基酸取代N19、N63、I67、K86、Q157、D158、L25、Y31、Q33、M38、V39、I49、Y53、D60、F108或S156。26.如权利要求4-25中任一项所述的多聚体多肽，其包含2种或更多种免疫调节多肽。27.如权利要求26所述的多聚体多肽，其中所述2种或更多种免疫调节多肽是呈串联形式。28.如权利要求26和27所述的多聚体多肽，其中所述多聚体多肽包含第三多肽，其中所述第三多肽包含免疫调节多肽，所述免疫调节多肽包含与所述第一多肽或所述第二多肽的所述免疫调节多肽具有至少90％氨基酸序列同一性的氨基酸序列。29.如权利要求28所述的多聚体多肽，其中所述第三多肽共价连接至所述第一多肽。30.如权利要求4-10和12-29中任一项所述的多聚体多肽，其中所述第二多肽从N-末端至C-末端依次包含：i)所述第二MHC多肽；ii)所述IgFc多肽；以及iii)亲和标签。31.一种核酸，其包含编码重组多肽的核苷酸序列，i)其中所述重组多肽从N-末端至C-末端依次包含：a)表位；b)第一主要组织相容性复合物(MHC)多肽；c)免疫调节多肽；d)蛋白水解可裂解的接头或核糖体跳过信号；e)第二MHC多肽；以及f)免疫球蛋白(Ig)Fc多肽；其中所述免疫调节多肽是如权利要求1-3中任一项所述的变体免疫调节多肽；或ii)其中所述重组多肽从N-末端至C-末端依次包含：a)表位；b)第一MHC多肽；c)蛋白水解可裂解的接头或核糖体跳过信号；d)免疫调节多肽e)第二MHC多肽；以及f)IgFc多肽，其中所述免疫调节多肽是如权利要求1-3中任一项所述的变体免疫调节多肽。32.如权利要求31所述的核酸，其中所述第一MHC多肽是β2-微球蛋白多肽；并且其中所述第二MHC多肽是MHCI类重链多肽。33.如权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：R·D·塞戴尔第三，R·查帕罗，
申请(专利权)人：CUE生物制药公司，
类型：发明
国别省市：美国,US