曲札茋苷或其衍生物的用途制造技术

本发明专利技术涉及生物制药技术领域，尤其涉及曲札茋苷或其衍生物的用途。本发明专利技术研究表明，曲札茋苷或其衍生物具有抑制兴奋性氨基酸毒性、抗神经细胞凋亡、提高神经细胞活性、降低神经细胞中MDA水平，促进神经细胞增殖等作用，且曲札茋苷或其衍生物对ALS细胞模型存在显著的保护作用。

The Use of Trizaphene Jasmine Glycoside or Its Derivatives

The invention relates to the field of biopharmaceutical technology, in particular to the use of trizaphene Jasmine glycoside or its derivatives. The study of the present invention shows that trazapine or its derivatives can inhibit the toxicity of excitatory amino acids, inhibit the apoptosis of nerve cells, improve the activity of nerve cells, reduce the level of MDA in nerve cells, and promote the proliferation of nerve cells, and that trazapine or its derivatives have significant protective effects on ALS cell model.

【技术实现步骤摘要】
曲札茋苷或其衍生物的用途
本专利技术涉及生物制药
，尤其涉及曲札茋苷或其衍生物的用途。
技术介绍
运动神经元病(MND)是一组病因未明的选择性侵犯脊髓前角细胞、脑干运动神经元、皮层锥体细胞及锥体束的慢性进行性神经变性疾病。根据临床表现的不同，运动神经元病一般可以分为以下四种类型：肌萎缩侧索硬化症(ALS)；进行性肌肉萎缩(PMA)；进行性延髓麻痹(PBP)；原发性侧索硬化(PLS)。其危害性在于选择性逆行损害运动神经元，表现为神经元所支配的肌肉活动障碍、萎缩，如累及咽喉部、呼吸肌将导致生命终止。再者累及运动神经元导致所支配的肌肉活动不能或不协调，导致容易摔跤甚至出现生命危险，给患者及其家庭生活质量、心身和经济水平都带来严重的伤害和影响。ALS是一种病因未明的选择性侵犯脊髓前角细胞、脑干运动神经核及锥体束的慢性进行性变性疾病，临床表现为上下运动神经元合并受损的体征，是慢性运动神经元疾病中最常见的类型。其症状有肌力减退、肌肉萎缩，并逐渐发展为饮食呛咳、吞咽困难、呼吸困难，直到死亡，90％的ALS为散发性(SALS)，10％的ALS为家族性(FALS)。ALS的发病机制尚不明确，可能涉及兴奋性氨基酸毒性作用、神经营养因子的缺失和异常、氧化应激、蛋白质错误折叠和异常聚集、线粒体功能障碍、凋亡、神经炎性反应、非运动神经元参与等方面。炎症和氧化应激在SOD1介导的运动神经元变性中的作用成为近来研究热点。该病目前缺乏有效的治疗方法，病人的存活期一般为3-5年。尽管多年来有许多药物被研究，利鲁唑(riluzoletablets，其化学名称为：2-氨基-6-三氟甲氧基苯并噻唑)仍是惟一被FDA批准应用于治疗ALS的药物，但其也只能有限的延长病人的生存期，而且该药极其昂贵，绝大多数患者家庭难以承受，该药还会导致肝肾功能损害，因此急需开发更为安全、经济和有效的药物。近年来，科学家们根据可能的发病机制如兴奋性氨基酸毒性作用、氧化应激和线粒体功能障碍、凋亡、免疫和神经炎症反应、神经营养因子的缺失和异常、基因突变、环境因素等假说进行了大量研究，试图寻找出有效的治疗方法。曲札茋苷((E)-1-(3，5-二羟苯基)-2-(3-羟基-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苯基)乙烯或3，5，3'，4'-四羟基茋-3'-O-β-葡萄糖苷)，其植物来源为拉萨大黄根茎，白皮杉醇为曲札茋苷的苷元。中国专利(申请号：201010116358.2)《曲札茋苷在制备防治心脑缺血基本制剂中的应用及其制备方法》；中国专利(申请号：2011110371198.0)《一种测定拉萨大黄中曲札茋苷含量的高效液相色谱方法》；中国专利(申请号：201110253242.8)《一种制备白皮杉醇的方法》公开了曲札茋苷的提取工艺、检测方法及制备曲札茋苷的苷元白皮杉醇的方法。现有技术表明曲札茋苷及其衍生物具有治疗缺血性心脑血管疾病方面的活性，但未见在治疗和预防ALS药物中的用途报道。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术要解决的技术问题在于提供本专利技术公开了曲札茋苷或其衍生物的医药用途，本专利技术通过实验发现曲札茋苷或其衍生物具有抑制兴奋性氨基酸毒性、提高神经细胞活性、降低神经细胞中MDA水平，促进神经细胞增殖等作用，且曲札茋苷或其衍生物对ALS细胞模型存在显著的保护作用。本专利技术提供了曲札茋苷或其衍生物在制备保护神经细胞的制剂中的应用。本专利技术实施例中，所述保护为降低神经细胞中MDA水平。所述神经细胞为神经元细胞；一些实施例中，所述神经元细胞为正常神经元细胞，另一些实施例中，所述神经元细胞为转染hSODlG93A的神经元细胞。所述的正常神经元细胞为NSC34细胞或转染hSODlWT质粒的NSC34细胞。此实施例中，在NSC34细胞内转入hSODlG93A和hSODlWT质粒，以建立ALS细胞模型及对照细胞模型。此模型的构建为本领域认可的ALS疾病细胞模型构建方法。在转染的NSC34细胞内分别给予10、20、40μmol·L-1的曲札茋苷、白皮杉醇或白藜芦醇培养48h后，发现细胞形态均没有明显变化。与正常培养的NSC34细胞相比，hSODlG93ANSC34细胞中MDA含量明显升高(P<0.001)，而在给予20、40μmol·L-1曲札茋苷、白皮杉醇给药后，MDA含量明显降低(P<0.01)，并且呈现一定的剂量相关性；而白藜芦醇对MDA含量的降低无统计学差异，本专利技术实施例中，所述保护为提高神经细胞活力。所述神经细胞为神经元细胞；一些实施例中，所述神经元细胞为正常神经元细胞，另一些实施例中，所述神经元细胞为转染hSODlG93A的神经元细胞。所述的正常神经元细胞为NSC34细胞或转染hSODlWT质粒的NSC34细胞。此实施例中，在转染的NSC34细胞内分别给予10、20、40μmol·L-1的曲札茋苷、白皮杉醇或白藜芦醇培养48h后，在给予20、40μmol·L-1曲札茋苷、白皮杉醇干预后的细胞数目较未给药组的细胞数目有所增加(P<0.05)；白藜芦醇有增加趋势，但无统计学差异。本专利技术实施例中，所述保护为抑制神经兴奋毒性、抑制神经细胞的凋亡和/或促进神经细胞的增殖。一些实施例中，所述神经兴奋毒性为谷氨酸诱导的神经兴奋毒性。本专利技术试验表明，谷氨酸在100mM剂量下引起神经细胞(人神经母细胞瘤细胞)的兴奋毒性损伤，对于谷氨酸诱导的SH-SY5Y细胞神经兴奋毒性，曲札茋苷和白皮杉醇在300μM剂量下均能显著对抗神经毒性作用，白藜芦醇作用不明显。本专利技术中，与假手术组比较，模型组大鼠脑缺血-再灌后24h，脑内TUNEL法染色标记的凋亡细胞以及CleavedCaspase-3免疫阳性(CleavedCaspase-3-ir)细胞均出现增多(P<0.01)，曲札茋苷4mg/kg组均可以明显减少脑内TUNEL法染色标记的凋亡细胞以及CleavedCaspase-3免疫阳性(CleavedCaspase-3-ir)细胞另一些实施例中，与假手术组相比，模型组动物脑缺血-再灌24h后，脑内Ki67的水平显著增多(P<0.01)，曲札茋苷4mg/kg给药后Ki67有减少的趋势，但无显著性差异(与模型组比较，P>0.05)。在缺血-再灌的同时，腹腔注射BrdU，再灌后24h，在缺血侧脑区可以观测到BrdU的水平显著增多(P<0.01vs假手术组)，这种作用可以被静脉给予曲札茋苷4mg/kg所对抗(P<0.01vs模型组)。连续两周给予BrdU，模型组动物缺血侧脑区BrdU的水平则显著减少，而给予曲札茋苷组大鼠缺血侧脑区BrdU的水平则明显增多(P<0.05vs模型组)。这一结果说明，曲札茋苷具有促进细胞增殖的作用。研究表明，曲札茋苷或其衍生物具有体外抗氧化的作用。实验表明，白皮杉醇与依达拉奉对O2－·的清除能力相近，IC50分别为5.81、13.85μM；曲札茋苷、白藜芦醇有一定清除作用，而Vc未能测出IC50。白皮杉醇对OH·清除能力最强，IC50为9.29μM；Vc、曲札茋苷次之，白藜芦醇最弱，IC50分别为27.2μM、36.82μM、50.24μM。曲札茋苷对ABTS.+具有较强本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.曲札茋苷或其衍生物在制备保护神经细胞的制剂中的应用。

【技术特征摘要】
1.曲札茋苷或其衍生物在制备保护神经细胞的制剂中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述保护为降低神经细胞中MDA水平。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述保护为提高神经细胞活力。4.根据权利要求1～3任一项所述的应用，其特征在于，所述神经细胞为神经元细胞；所述神经元细胞为正常神经元细胞，或转染hSODlG93A的神经元细胞。5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述保护为抑制神经兴奋毒性、抑制...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨兆祥，刘一丹，陈云建，龚云麒，杨旭娟，施凯，刘国光，尚建华，
申请(专利权)人：昆药集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：云南,53