毛蕊花糖苷在制备治疗新生儿缺氧缺血性脑病药物中的用途制造技术

本发明专利技术公开了毛蕊花糖苷(Verbascoside)在制备治疗新生儿缺氧缺血性脑损伤药物中的用途。本发明专利技术的实验结果表明在安全剂量范围内使用时，剂量为240mg/kg的毛蕊花糖苷可以显著改善新生大鼠缺氧缺血模型早期神经功能障碍，减少缺血区域脑梗死体积以及神经元坏死，证明毛蕊花糖苷具有促进神经功能恢复和预防新生儿缺氧缺血性脑病后致残致死的作用。

Application of Mulberry Glycoside in the Preparation of Drugs for the Treatment of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy

The invention discloses the use of verbascoside in preparing medicines for treating neonatal hypoxic-ischemic brain injury. The experimental results of the present invention show that when used in a safe dose range, the dosage of 240 mg/kg of pilosin can significantly improve the early neurological dysfunction of neonatal rat hypoxic-ischemic model, reduce the volume of cerebral infarction in ischemic area and neuronal necrosis, and prove that piloside has the effect of promoting the recovery of neurological function and preventing disability and death after neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy.

【技术实现步骤摘要】
毛蕊花糖苷在制备治疗新生儿缺氧缺血性脑病药物中的用途
本专利技术涉及毛蕊花糖苷的应用，特别涉及毛蕊花糖苷在制备治疗新生儿缺氧缺血性脑损伤药物中的用途。
技术介绍
新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemicbraindamage,HIBD)是由于围产期窒息、羊水污染等各种因素导致的缺氧与脑血流量减少或暂停,引起胎儿及新生儿脑功能障碍的疾病。HIBD是导致新生儿神经系统疾病的主要原因，也是全球儿童死亡率和发病率的主要因素，其发病率为1-6‰，约40％的幸存儿也深受其害，会产生运动、情感和认知功能障碍，重者引起新生儿死亡或神经系统后遗症，如脑瘫、癫痫、智力低下、记忆力及视听障碍，严重影响了新生儿的生活质量，也产生了很大的家庭和社会负担。新生儿HIBD的发病机制复杂，对新生儿围产期窒息中度至重度患者来说，迄今为止最有效的神经保护干预措施是亚低温治疗，目前已被许多发达国家纳入新生儿重症监护病房。然而，患有HIBD的婴儿中只有六分之一会受益于低温疗法，许多婴儿仍有严重的不良后果。因此及早恢复脑组织血氧的供应、促进损伤后的修复、减少其损伤后遗症、寻找安全有效的神经保护剂一直是围产医学和神经医学领域研究的重点，具有重要的理论意义及积极的临床应用前景。毛蕊花糖苷(Verbascoside)是从肉苁蓉中分离纯化的一种苯乙醇苷类化合物,也是药典记载的肉苁蓉主要活性成分之一，经纯化提取后为白色无定型粉末，目前主要被用于人类的医疗保健。毛蕊花糖苷能够通过血脑屏障，无毒性且代谢迅速，其具有抗氧化、抗炎杀菌、免疫调节、舒张血管等多种药理作用。已有学者研究证明肉苁蓉总苷对脑缺血具有保护作用，但关于毛蕊花糖苷对新生儿缺氧缺血性脑损伤的保护作用目
技术实现思路
本专利技术的目的是通过对毛蕊花糖苷的药理作用研究，提供毛蕊花糖苷在制备治疗新生儿缺氧缺血性脑损伤药物中的用途。本专利技术提供毛蕊花糖苷在制备治疗新生儿缺氧缺血性脑损伤药物中的用途，所述毛蕊花糖苷的结构式如式(1)所示：本专利技术所用的毛蕊花糖苷均可经商购获得。具体地，所述新生儿缺氧缺血性脑损伤为急性期或修复期的新生儿缺氧缺血性脑损伤。具体地，所述毛蕊花糖苷单次应用剂量仅限于不引起中枢抑制的剂量。具体地，所述毛蕊花糖苷单次应用剂量为60-240mg/kg。优选地，所述毛蕊花糖苷单次应用剂量为120-240mg/kg。优选地，所述毛蕊花糖苷单次应用剂量为240mg/kg。具体地，所述药物被配制为通过胃肠道或肠胃外给予的剂型。优选地，所述药物的剂型为药剂学上允许的口服剂型、注射液剂型或粉针剂。具体地，所述的毛蕊花糖苷作为唯一活性成分在制备治疗新生儿缺氧缺血性脑损伤药物中的用途。本专利技术提供的毛蕊花糖苷在制备治疗新生儿缺氧缺血性脑损伤药物中的用途具有以下有益效果：(1)毛蕊花糖苷在不降低血糖的剂量下能显著减少脑梗死体积和细胞坏死率；(2)毛蕊花糖苷能减弱过度自噬引起的损伤作用，显著抑制缺氧缺血后脑组织Beclin-1，LC3-Ⅱ蛋白的表达以及促进P62蛋白的表达。本专利技术首次证实，毛蕊花糖苷具有治疗新生儿缺氧缺血性脑损伤所致神经元损伤的作用，可用于制备新生儿缺氧缺血性脑损伤的治疗药物。附图说明图1为毛蕊花糖苷对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤早期神经功能作用统计图；(Rightingreflextimes：翻正反射时间；Negativegeotaxistimes：被动趋地时间；VB：毛蕊花糖苷组)。图2为毛蕊花糖苷对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤保护作用的TTC染色图。图3为毛蕊花糖苷对新生大鼠缺氧缺血后脑组织病理变化影响的大脑海马CA3区和皮层病理变化HE染色图。图4为毛蕊花糖苷对新生大鼠缺氧缺血后脑组织病理变化影响大脑海马CA3区和皮层病理变化尼氏染色图。图5为毛蕊花糖苷对新生大鼠大脑缺血侧海马CA3区和皮层Beclin-1免疫阳性细胞表达的免疫荧光图；(DAPI：4',6-二脒基-2-苯基吲哚；Merge：Beclin-1和DAPI的合成)。图6为毛蕊花糖苷对新生大鼠大脑缺血侧海马CA3区和皮层LC3免疫阳性细胞表达的免疫荧光图；(DAPI：4',6-二脒基-2-苯基吲哚；Merge：LC3和DAPI的合成)。图7为毛蕊花糖苷对新生大鼠大脑缺血侧海马CA3区和皮层p62免疫阳性细胞表达的免疫荧光图；(DAPI：4',6-二脒基-2-苯基吲哚；Merge：p62和DAPI的合成)。图8为毛蕊花糖苷对新生大鼠缺血侧脑组织Beclin-1蛋白表达水平的影响(sham：假手术组；HI：模型组；VB：毛蕊花糖苷组；ratioofBeclin-1：Beclin-1蛋白表达率；与假手术组比较：##P<0.01，与模型组比较：＊＊P<0.01(n＝6))。图9为毛蕊花糖苷对新生大鼠缺血侧脑组织LC3-Ⅱ蛋白表达水平的影响(sham：假手术组；HI：模型组；VB：毛蕊花糖苷组；ratioofLC3-Ⅱ：LC3-Ⅱ蛋白表达率；与假手术组比较：##P<0.01，与模型组比较：＊＊P<0.01(n＝6))。图10为毛蕊花糖苷对新生大鼠缺血侧脑组织P62蛋白表达水平的影响(sham：假手术组；HI：模型组；VB：毛蕊花糖苷组；ratioofP62：P62蛋白表达率；与假手术组比较：##P<0.01，与模型组比较：＊＊P<0.01(n＝6))。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步详细的说明。以下实施例中使用的毛蕊花糖苷均为式(1)所示的结构。毛蕊花糖苷(纯度＞98.84％，分子量624.59)实施例1毛蕊花糖苷在制备治疗新生儿缺氧缺血性脑损伤药物中的用途，其中，新生儿缺氧缺血为急性期缺血缺氧性脑损伤，毛蕊花糖苷单次应用剂量为新生大鼠60mg/Kg，药物的剂型为注射液剂型。实施例2毛蕊花糖苷在制备治疗新生儿缺氧缺血性脑损伤药物中的用途，其中，新生儿缺氧缺血为修复期缺血缺氧性脑损伤，毛蕊花糖苷单次应用剂量为新生大鼠120mg/Kg，药物的剂型为粉针剂型。实施例3毛蕊花糖苷在制备治疗新生儿缺氧缺血性脑损伤药物中的用途，其中，新生儿缺氧缺血为修复期缺血缺氧性脑损伤，毛蕊花糖苷单次应用剂量为新生大鼠240mg/Kg，药物的剂型为粉针剂型。下面的动物实验进一步说明了上述实施例1至3的效果：一、实验材料1.1动物处理7日龄，新生SD大鼠，12-18g，购自宁夏医科大学实验动物中心，动物生产许可证号：SCXK(宁)2015-0001。喂养条件包括标准饲料，自来水，室温保持在(24±2)℃，湿度50-60％，每日光照与黑暗时间各12h。实验前，将动物置于实验环境适应3天。1.2实验药品及仪器毛蕊花糖苷(北京中科质检生物技术有限公司)，以生理盐水配制，母液浓度240mg/Kg，-20℃贮存。2，3，5-氯化三苯基四氮唑(2，3，5-triphenyltetrazoliumchloride，TTC，购自sigma公司)，苏木精-尹红(美国Sigma公司)，Nissl染液(北京索莱宝科技有限公司)，荧光染料DAPI(ZSGB-BIO公司)，兔抗Beclin-1、LC3、P62(protein公司)，酶标仪(1510，ThermoFisher公司)，激光共聚本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.毛蕊花糖苷在制备治疗新生儿缺氧缺血性脑损伤药物中的用途，其特征在于：所述毛蕊花糖苷的结构式如式(1)所示：

【技术特征摘要】
1.毛蕊花糖苷在制备治疗新生儿缺氧缺血性脑损伤药物中的用途，其特征在于：所述毛蕊花糖苷的结构式如式(1)所示：2.根据权利要求1所述的毛蕊花糖苷在制备治疗新生儿缺氧缺血性脑损伤药物中的用途，其特征在于：所述缺氧缺血性脑损伤为急性期或修复期的新生儿缺氧缺血性脑损伤。3.根据权利要求1所述的毛蕊花糖苷在制备治疗新生儿缺氧缺血性脑损伤药物中的用途，其特征在于：所述毛蕊花糖苷单次应用剂量仅限于不引起中枢抑制的剂量。4.根据权利要求3所述的毛蕊花糖苷在制备治疗新生儿缺氧缺血性脑损伤药物中的用途，其特征在于：所述毛蕊花糖苷单次应用剂量为60-240mg/kg。5.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：余建强，魏炜，李玉香，刘宁，杜娟，
申请(专利权)人：宁夏医科大学，
类型：发明
国别省市：宁夏,64