用于定量检测卵巢癌外泌体抗原的试剂盒及其配制方法技术

本发明专利技术涉及ELISA检测试剂盒技术领域，具体地说是一种高容量沥青/环氧树脂基改性硬炭负极材料及其制备方法，包括试剂盒体，其特征在于，所述的试剂盒体内放置有2块抗CD63的克隆抗体包被的酶标板、1块抗CA125的克隆抗体包被的酶标板、10ml的HPR标记的CA125抗体、10ml的HPR标记的CD63抗体、作为显色剂A液的20ml的H2O2、作为显色剂B液的20ml的TMB，2瓶5ml的终止液。本发明专利技术同现有技术相比，该试剂盒利用外泌体的酶联免疫吸附方法来快速检测卵巢癌抗原，对卵巢癌能进行早期诊断；检测的准确度高、特异性强，检测样品范围广泛，包括血清、腹水、血浆、组织液等，反应周期短，效果好。

A Kit for Quantitative Detection of Ovarian Cancer Exosome Antigen and Its Preparation

The invention relates to the technical field of ELISA detection kit, in particular to a high-capacity asphalt/epoxy resin-based modified hard carbon anode material and its preparation method, including a kit body. The kit body is characterized by two anti-CD63 clonal antibody-coated enzyme plates, one anti-CA125 clonal antibody-coated enzyme plate, 10 ml HPR-labeled CA125 antibody and 10 ml HPR-labeled CA125 antibody. MD63 antibody labeled with HPR of ml, 20ml of H2O2 as chromogenic agent A, 20ml of TMB as chromogenic agent B, and 2 bottles of 5 ml terminating solution. Compared with the prior art, the kit can rapidly detect ovarian cancer antigen by exosome enzyme-linked immunosorbent assay, and can diagnose early ovarian cancer. The kit has high accuracy and specificity, and has a wide range of detection samples, including serum, ascites, plasma, tissue fluid, etc., with short reaction period and good effect.

【技术实现步骤摘要】
用于定量检测卵巢癌外泌体抗原的试剂盒及其配制方法
本专利技术涉及ELISA检测试剂盒
，具体地说是一种高容量沥青/环氧树脂基改性硬炭负极材料及其制备方法。
技术介绍
卵巢癌是继子宫内膜癌及宫颈癌发生率居第三的妇科恶性肿瘤，其死亡率居妇科恶性肿瘤之首。卵巢癌发病隐匿，缺乏早期的典型症状和成熟的早期诊断方法，当出现临床症状引起患者重视就诊时，往往已属晚期，当出现广泛的腹腔转移，根治性手术已难以实施。外泌体存在于各种体液中，可以作为细胞间信息传递的载体，在细胞交流中发挥着重要作用，特别是在疾病标志物筛查领域具有重要作用。外泌体(exosome)是大小为50到150nm直径的分泌膜封闭囊泡(细胞外囊泡或者EV)，囊泡中包裹着核酸和蛋白质。各种细胞都能分泌外泌体，外泌体分泌后被释放到细胞外空间并进入循环。各种细胞类型，如免疫细胞，血小板或内皮细胞将外泌体释放到血液中。上皮肿瘤细胞分泌携带上皮细胞粘附分子(EpCAM)的外泌体；黑素瘤衍生的外泌体含有肿瘤相关抗原Mart-1和酪氨酸酶相关蛋白-2(TYRP2)；来自胃癌，乳腺癌和胰腺癌的外泌体携带人表皮生长因子受体(HER)家族的成员。然而本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于定量检测卵巢癌外泌体抗原的试剂盒，包括试剂盒体，其特征在于，所述的试剂盒体内放置有2块抗CD63的克隆抗体包被的酶标板、1块抗CA125的克隆抗体包被的酶标板、10ml的HPR标记的CA125抗体、10ml的HPR标记的CD63抗体、作为显色剂A液的20ml的H2O2、作为显色剂B液的20ml的TMB，2瓶5ml的终止液。

【技术特征摘要】
1.一种用于定量检测卵巢癌外泌体抗原的试剂盒，包括试剂盒体，其特征在于，所述的试剂盒体内放置有2块抗CD63的克隆抗体包被的酶标板、1块抗CA125的克隆抗体包被的酶标板、10ml的HPR标记的CA125抗体、10ml的HPR标记的CD63抗体、作为显色剂A液的20ml的H2O2、作为显色剂B液的20ml的TMB，2瓶5ml的终止液。2.如权利要求1所述试剂盒的配制方法，其特征在于，所述终止液采用浓度为1mol/L的H2SO4溶液。3.如权利要求1所述试剂盒的配制方法，其特征在于，包括配制抗CD63的克隆抗体包被的酶标板、配制抗CA125的克隆抗体包被的酶标板、配制HPR标记的CA125抗体；配制HPR标记的CD63抗体；——所述制抗CD63的克隆抗体包被的酶标板采用如下步骤：a1、取96T空白酶标板，按每孔100μl分别包被抗CD63的单克隆抗体，4℃孵育过夜后，移除上清液；a2、按每孔200μl加入封闭液，封闭液为10wt％大牛血清和90wt％10mMPBS，37℃恒温培养箱放置2小时，重复洗涤数次后拍干；a3、封闭结束，将封闭液甩出，板子在吸水纸上拍干，备用；——所述配制抗CA125的克隆抗体包被的酶标板采用如下步骤：b1、另取96T空白酶标板，按每孔100μl分别包被抗CA125的单克隆抗体，4℃孵育过夜后，移除上清液；b2、按每孔200μl加入封闭液，封闭液为10％大牛血清和90％10mMPBS，37℃恒温培养箱放置2小时，重复洗涤数次后拍干；b3、封闭结束，将封闭液甩出，板子在吸水纸上拍干，备用；——采用过碘酸钠法配制HPR标记的CA125抗体；——采用过碘酸钠法配制HPR标记的CD63抗体；将制备的2块抗CD63的克隆抗体包被的酶标板、1块抗CA125的克隆抗体包被的酶标板、10ml的HPR标记的CA125抗体、10ml的HPR标记的CD63抗体分别密封包装后装入试剂盒体，并将显色剂A液、显色剂B液，2瓶终止液，一起放入试剂盒体内冷...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗朝领，茅柳娟，王莹，曹雪姣，任调，
申请(专利权)人：上海领潮生物新材料有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31