The invention discloses a magnetosome coupled with streptavidin, a biological separation and an immunoassay method, in which streptavidin is crosslinked on the surface of the magnetosome through a chemical covalent bond, and the surface of the magnetosome is provided with amino, carboxyl, mercapto or hydroxyl functional groups. The preparation process of the magnetosome includes two steps: the extraction of the magnetosome and the coupling of streptavidin. The magnetosome coupled with streptavidin has the advantages of good crosslinking effect, high biocompatibility, strong magnetron control, superparamagnetism and low toxicity.
【技术实现步骤摘要】
偶联有链霉亲和素的磁小体及生物分离、免疫检测方法
本专利技术属于生物材料
，具体涉及偶联有链霉亲和素的磁小体及生物分离、免疫检测方法。
技术介绍
趋磁细菌是一种依靠体内生物矿化所产生的磁性纳米颗粒能够在外磁场的作用下定向运动的革兰氏阴性菌，一般为微好氧或厌氧型。其内部的磁性纳米颗粒为磁小体，在趋磁细菌体内组装成长链状，沿菌体长轴排列，在外磁场中引导菌体的运动。磁小体主要由外层脂质膜和内部磁铁矿晶体构成，磁小体的外膜由趋磁细菌细胞膜内陷生成，外膜整体带负电，目前已证实大约有30种特异性蛋白出现在磁小体表面膜上，因而磁小体表面膜结构具有多态性，富含氨基、羧基、巯基或羟基功能基团。磁铁矿晶体形态多样，大小均一，为单磁畴纳米颗粒，具有较好的生物相容性、磁控性、磁热性、超顺磁性和较低的毒性。链霉亲和素是链霉亲和素菌在培养过程中的分泌产物，其生物学特性与亲和素相似，与生物素的结合常数为1015/M，是抗原抗体反应的一万倍以上。同时，链霉亲和素不含任何糖基和等电点较低，因此在检测应用中非特异性结合很低，有利于提高检测方法的灵敏度。通过将具有强特异性结合能力的链霉亲和素偶联...
【技术保护点】
1.一种偶联有链霉亲和素的磁小体，其特征在于，链霉亲和素通过化学共价键交联在所述磁小体表面，且所述磁小体表面带有氨基、羧基、巯基或羟基功能基团，其通过包含以下工序的方法制造：1)磁小体的提取将趋磁细菌的发酵液以3000 r/min的转速离心25min后收集菌体，菌体以1:8的质量体积比悬浮于HEPES缓冲液中，高压均质后分离，收集磁小体；2)偶联链霉亲和素取1mg磁小体于离心管中，加入HEPES缓冲液，保证磁小体的终浓度为0.8mg/mL，以3000 r/min的转速离心后，加入13μL的NHS‑Biotin和10mmol/L的PBS缓冲液，使终体积为0.5mL，33℃下温...
【技术特征摘要】
1.一种偶联有链霉亲和素的磁小体，其特征在于，链霉亲和素通过化学共价键交联在所述磁小体表面，且所述磁小体表面带有氨基、羧基、巯基或羟基功能基团，其通过包含以下工序的方法制造：1)磁小体的提取将趋磁细菌的发酵液以3000r/min的转速离心25min后收集菌体，菌体以1:8的质量体积比悬浮于HEPES缓冲液中，高压均质后分离，收集磁小体；2)偶联链霉亲和素取1mg磁小体于离心管中，加入HEPES缓冲液，保证磁小体的终浓度为0.8mg/mL，以3000r/min的转速离心后，加入13μL的NHS-Biotin和10mmol/L的PBS缓冲液，使终体积为0.5mL，33℃下温育28min后离心收集Biotin-磁小体；向Biotin-磁小体中按1...
【专利技术属性】
技术研发人员：邓泽平，罗容，许慧，陈瑶，陈选，张安林，刘赛文，
申请(专利权)人：湖南华腾制药有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南,43
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