一种马来酰亚胺-PEG与DNA-SH的连接的改进方法技术

本发明专利技术涉及一种马来酰亚胺‑PEG与DNA‑SH的连接的改进方法，属于医药制备技术领域。本发明专利技术的方法首先用TCEP还原DNA‑SH；然后，去除DNA‑SH中的TCEP；最后，用新还原的DNA‑SH和马来酰亚胺‑PEG在CB缓冲体系中进行反应。该实验的创新点在乙醇沉降DNA去除TCEP，去除TCEP极大地提高了马来酰亚胺‑PEG和DNA‑SH的连接产物的收率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医药制备，具体涉及一种马来酰亚胺-peg与dna-sh的连接的改进方法。

技术介绍

1、wang等在顶级期刊nature chemistry上发表的论文中马来酰亚胺-peg与抗体的巯基发生反应(nature chemistry,2019,11,310)，实验步骤为抗体与约5equiv的tcep在37℃pbs缓冲液中反应2小时，然后抗体与20equiv的马来酰亚胺-peg在4℃搅拌12h。我们参照文献方法进行马来酰亚胺-peg与dna-sh的连接。通过凝胶电泳实验结果分析，马来酰亚胺-peg与dna-sh的连接效率低，产物收率低。

2、此外，参照gothelf在bioconjugate chemistry上发表的论文中马来酰亚胺-dna与peg-sh的反应条件(bioconjugate chemistry,2022,33,1254)：马来酰亚胺-dna与peg-sh在hepes缓冲液(ph 7.5,50mm,100mm nacl)室温下过夜反应。开展了马来酰亚胺-peg与dna-sh的反应。凝胶电泳结果显示马来酰亚胺-peg与dna本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种马来酰亚胺-PEG与DNA-SH的连接的改进方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1中所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述的DNA-SH从冰箱取出后需离心，加入TE缓冲液溶清，离心使用。

3.根据权利要求1中所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述的DNA-SH和TCEP投料摩尔比为1：100至1：150。

4.根据权利要求1中所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述的室温为10℃-40℃。

5.根据权利要求1中所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述的NaAc缓冲溶液的质量浓度为0.05g/mL-1g/mL。

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【技术特征摘要】

1.一种马来酰亚胺-peg与dna-sh的连接的改进方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1中所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述的dna-sh从冰箱取出后需离心，加入te缓冲液溶清，离心使用。

3.根据权利要求1中所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述的dna-sh和tcep投料摩尔比为1：100至1：150。

4.根据权利要求1中所述的方法，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵春晖，陈峰，邓泽平，李香君，
申请(专利权)人：湖南华腾制药有限公司，
类型：发明
国别省市：