碳水化合物结合模块及其在固定化酶制备与融合蛋白纯化上的应用制造技术

本发明专利技术涉及碳水化合物结合模块及其在固定化酶制备与融合蛋白纯化上的应用，属于生物技术领域。碳水化合物结合模块是由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列组成的蛋白质，或者由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的且具有相同功能的蛋白质。所述碳水化合物结合模块作为用于蛋白质纯化/固定化的融合蛋白标签。与现有技术相比，本发明专利技术提供的蛋白纯化标签采用葡聚糖等作为吸附载体，成本低廉，操作简单，结合时间短。该方法在重组蛋白纯化，固定化酶制备领域具有较大应用潜力。

【技术实现步骤摘要】
碳水化合物结合模块及其在固定化酶制备与融合蛋白纯化上的应用
本专利技术涉及生物
，尤其是涉及一种碳水化合物结合模块及其在固定化酶制备与融合蛋白纯化上的应用。
技术介绍
随着分子生物学技术的进展，外源基因的克隆表达成为高价值蛋白的重要获取手段。蛋白亲和纯化标签是重组蛋白纯化的最主要途径，也是一种重要的固定化酶制备策略。一些亲和纯化标签已经得到商业化应用，如His-Tag,GST-Tag,HaloTagTM等。但由于亲和纯化标签需要特定的吸附载体，而目前常见的载体(如葡聚糖凝胶)制备过程繁琐，价格昂贵，导致重组蛋白纯化成本居高不下，相应的固定化酶策略也受此限制无法规模化应用。因此，开发低成本、特异性的重组蛋白纯化-固定化策略，发掘相应的新型蛋白纯化标签，在重组蛋白纯化及固定化领域具有重要意义。糖类是自然界中广泛分布的一类重要有机化合物。随着研究人员对碳水化合物代谢的深入研究，在纤维素、半纤维素降解酶中陆续发现了碳水化合物结合模块(carbohydratebindingmodule，CBM)。它们具有独立的折叠结构，没有催化活性，但能够与碳水化合物特异性结合。不同的CBM能特异识别纤本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种蛋白质，其特征在于，所述蛋白质是由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列组成的蛋白质，或者由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的且具有相同功能的蛋白质。

【技术特征摘要】
1.一种蛋白质，其特征在于，所述蛋白质是由SEQIDNO：1所示的氨基酸序列组成的蛋白质，或者由SEQIDNO：1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的且具有相同功能的蛋白质。2.一种碳水化合物结合模块，其特征在于，其为权利要求1所述蛋白质。3.编码如权利要求2所述碳水化合物结合模块的基因。4.根据权利要求3所述基因，其特征在于，所述基因是SEQIDNO：2所示的DNA分子，或者SEQIDNO：2所示的DNA序列中缺失一个或几个氨基酸残基的密码子，和/或进行一个或几个碱基对的错义突变。5.含有权利要求3或4所述基因的重组载体、表达盒、转基因细胞或重组菌。6.一种固定化酶的制备方法，其特征在于，将编码所述碳水化合物结合模块的基因与目的蛋白基因进行融合表达，形成融合蛋白，利用多糖固定化载体将所述融合蛋白一步纯化并固定化，得到固定化酶。7.根权利要求6所述一种固定化酶的制备方法，其特征在于，所述多糖固定化载体选自以下物质中的一种或两种及两种以上的混合物：酵母葡聚糖、昆布多糖、可得然多糖、...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵黎明，秦臻，林思，邱勇隽，陈启明，
申请(专利权)人：华东理工大学，
类型：发明
国别省市：上海,31