一种促进间充质干细胞分化为神经元的方法技术

本发明专利技术公开了一种促进间充质干细胞分化成神经元的方法，包括以下步骤：1)制备人间充质干细胞并传代培养；2)使传代培养后的所述人间充质干细胞在分化培养基中分化成人间充质干细胞‑神经球；3)使所述人间充质干细胞‑神经球在诱导培养基中分化成神经元。通过诱导培养基中添加神经营养因子来促进向神经元的分化，结果表明表达成熟神经标记物(MAP2ab)和不成熟神经标记物(β‑微管蛋白III)的细胞相对于空白对照有显著提高。本发明专利技术的方法为促进脊髓损伤修复的新治疗方法提供了一定的方向。

【技术实现步骤摘要】
一种促进间充质干细胞分化为神经元的方法
本专利技术涉及细胞培养
，尤其涉及一种促进间充质干细胞分化为神经元的方法。
技术介绍
脊髓损伤(spinalcordinjury，SCI)是一种严重的中枢系统疾患，其最严重的后果，是导致损伤节段以下肢体严重的功能障碍，其造成的截瘫会使患者失去自理能力，这不仅给患者带来了严重的身体和心理伤害，也给家庭造成沉重的负担。目前在脊髓损伤病人的治疗中，通常借助于一些药物的使用以及与物理治疗相结合来减缓瘫痪的程度。但是，经过这样的治疗，患者的生活质量还是无法得到很好的提升。如何使得脊髓损伤后中枢神经的修复和功能重建，现在仍然是一个难题。虽然神经生长因子的发现给中枢神经损伤的临床药物治疗带来了希望，也达到了一定的效果，但是，神经营养物质分子量太大，无法穿透血脑屏障进入中枢神经组织以发挥其活性。在脊髓损伤中，移植可能是进行中枢神经系统修复的一种可操作方法。但是，要实现细胞的移植治疗，首先需要对细胞分化成神经元的能力进行研究和评估，并开发促进细胞分化的方法。因此，本领域的技术人员致力于开发一种促进干细胞分化成神经元的方法。
技术实现思路
为实现上述目的，本专利本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种促进间充质干细胞分化成神经元的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)制备人间充质干细胞并传代培养；2)使传代培养后的所述人间充质干细胞在分化培养基中分化成人间充质干细胞‑神经球；3)使所述人间充质干细胞‑神经球在诱导培养基中分化成神经元。

【技术特征摘要】
1.一种促进间充质干细胞分化成神经元的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)制备人间充质干细胞并传代培养；2)使传代培养后的所述人间充质干细胞在分化培养基中分化成人间充质干细胞-神经球；3)使所述人间充质干细胞-神经球在诱导培养基中分化成神经元。2.如权利要求1所述的促进间充质干细胞分化成神经元的方法，其特征在于，步骤3)具体为将步骤2)中的人间充质干细胞-神经球打碎，接种到多聚-L-赖氨酸和层粘连蛋白双包被的含有所述诱导培养基的培养容器中，于37℃，5％CO2培养分化7-10天。3.如权利要求2所述的促进间充质干细胞分化成神经元的方法，其特征在于，所述诱导培养基为添加有0.5umol/L全反式维甲酸、1％FBS、5％马血清、1％N2补充物、1％青霉素/链霉素以及10ng/mL重组人BDNF的NB培养基。4.如权利要求1所述的促进间充质干细胞分化成神经元的方法，其特征在于，步骤3)具体为将步骤2)中的人间充质干细胞-神经球打碎，接种到多聚-L-赖氨酸和层粘连蛋白双包被的培养容器中，先使用含有BDNF的第一诱导培养基进行诱导分化5-6天，然后使用含有TGF-β1的第二诱导培养基进行诱导分化4-5天，细胞于37℃，5％CO2培养。5.如权利要求4所述的促进间充质干细胞分化成神经元的方法，其特征在于，在添加含有TGF-β1的第二诱导培养基后，先将细胞在40℃，5％CO2中培养3-4小时，然后再转移到37℃，5％CO2继续培养分化4-5天。6.如权利要求5所述的促进间充质干细胞分化成神经元的方法，其特征在于，所述第一诱导培养基...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈金虎，
申请(专利权)人：宁波金未生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33