一种免疫共沉淀试剂盒制造技术

技术编号:20100887 阅读:138 留言:0更新日期:2019-01-16 05:24
本实用新型专利技术涉及一种免疫共沉淀试剂盒,包括盒盖、海绵垫和盒体,所述盒体设有容纳腔,所述海绵垫置于所述容纳腔内;所述海绵垫设有容器孔,所述容器孔内分别设有第一试剂瓶、第二试剂瓶和EP管;所述第一试剂瓶包括PBS试剂瓶、Wash Buffer I试剂瓶和Wash BufferⅡ试剂瓶;所述第二试剂瓶包括Cell lysis buffer试剂瓶;所述EP管包括Protease Inhibitor EP管、Protein A/G‑agarose beads EP管、IgG EP管、Cross‑linking agent(50mM)EP管和Elution buffer EP管;使用本实用新型专利技术,能够方便的进行免疫共沉淀试验,免除抗体信号干扰。

An immunoprecipitation Kit

The utility model relates to an immune coprecipitation kit, which comprises a box cover, a sponge pad and a box body. The box body is provided with a holding chamber, and the sponge pad is placed in the holding chamber. The sponge pad is provided with a container hole, in which a first reagent bottle, a second reagent bottle and an EP tube are respectively arranged. The first reagent bottle comprises a PBS reagent bottle, a Wash Buffer I reagent bottle and a Wash Buffe tube. RII reagent bottle; the second reagent bottle includes Cell lysis buffer reagent bottle; the EP tube includes Protease Inhibitor EP tube, Protein A/G agarose beads EP tube, IgG EP tube, Cross linking agent (50mM) EP tube and Elution buffer EP tube; using the utility model, the co-precipitation test can be carried out conveniently and the interference of antibody signal can be eliminated.

【技术实现步骤摘要】
一种免疫共沉淀试剂盒
本技术涉及生物
,具体涉及一种不存在抗体信号干扰目的蛋白信号的免疫共沉淀试剂盒。
技术介绍
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是基于抗体和抗原之间结合的专一性用于研究蛋白质相互作用的经典方法,是确定蛋白质是否在生理条件下有相互作用的有效方法。然而,传统的由于免疫沉淀实验使用目的蛋白抗体加ProteinA/G-琼脂糖珠/磁珠与样品孵育,因此在最后离心获得抗体-琼脂糖珠/磁珠复合物后,离心管中主要含有抗体、目的蛋白、ProteinA/G-琼脂糖珠/磁珠以及一些其它非特异性作用蛋白。其中,抗体和目的蛋白以及ProteinA/G-琼脂糖珠/磁珠三者之间是以非共价健结合在一起,只有ProteinA/G与琼脂糖珠/磁珠是共价结合在一起的。因此,最后经过添加含巯基乙醇的加样缓冲液以及煮沸变性并离心出去ProteinA/G-琼脂糖珠/磁珠后,离心管含有抗体和目的蛋白以及少量非特异性吸附蛋白。这样SDS-PAGE中就至少含有目的蛋白和抗体二种蛋白,由于加样缓冲液中含有巯基乙醇和高温从而导致抗体的重链与轻链之间的二硫键被破坏从而使得抗体分子变成重链分子(55KD)和轻链分子(25KD)。因此,WB显色反应中除了能检测到目的蛋白外,如果所使用的二抗与用于免疫沉淀实验的抗体分子属于同一种属的话,还能检测到重链和轻链分子。通常用于免疫沉淀的抗体量非常大(1ug),所以当目的蛋白的大小接近重链或者轻链分子时,重链或者轻链分子的WB信号常常由于信号过强而导致影响对目的蛋白的WB结果的判断。由此可见,传统的Co-IP方法存在抗体信号干扰目的蛋白信号的缺点,虽然可以通过选择不同种属的抗体分别进行免疫沉淀实验和WB实验,然后再选择一个种属交叉反应比较弱或者无种属交叉反应的二抗进行WB实验,减弱重链和轻链分子的WB信号,但会大大增加实验成本和实验设计复杂性。
技术实现思路
为了解决现有技术存在的问题,本技术提供了一种免疫共沉淀试剂盒;包括盒盖、海绵垫和盒体,海绵垫设有试剂瓶和EP管,所述试剂瓶和EP管分别装有PBS、WashBufferI、WashBufferⅡ、Celllysisbuffer、ProteaseInhibitor、ProteinA/G-agarosebeads、IgG、Cross-linkingagent和Elutionbuffer,使用本技术,能够方便的进行免疫共沉淀试验,免除抗体信号干扰。本技术的目的是提供一种排除抗体信号干扰目的蛋白信号的免疫共沉淀试剂盒,包括盒盖、海绵垫和盒体,所述盒体设有容纳腔,所述海绵垫置于所述容纳腔内;所述海绵垫设有容器孔,所述容器孔内分别设有第一试剂瓶、第二试剂瓶和EP管;所述第一试剂瓶包括PBS试剂瓶、WashBufferI试剂瓶和WashBufferⅡ试剂瓶;所述第二试剂瓶包括Celllysisbuffer试剂瓶;所述EP管包括ProteaseInhibitorEP管、ProteinA/G-agarosebeadsEP管、IgGEP管、Cross-linkingagentEP管和ElutionbufferEP管。优选地,所述第一试剂瓶包括装有60mlPBS的试剂瓶、装有150mlWashBufferI的试剂瓶和装有150mlWashBufferⅡ的试剂瓶;所述第二试剂瓶包括装有25mlCelllysisbuffer的试剂瓶;所述EP管包括装有420μlProteaseInhibitor的EP管、装有1.05mlProteinA/G-agarosebeads的EP管、装有10μlIgG的EP管、装有108μlCross-linkingagent(50mM)的EP管和装有1.2mlElutionbuffer的EP管。为了使海绵垫安装更加平稳,优选的技术方案是,所述容纳腔的形状与所述海绵垫的外围形状相配合。优选地,所述海绵垫为黑色。为了使试剂瓶和EP管安装更加平稳,优选的技术方案是,所述容器孔包括第一容器孔、第二容器孔和第三容器孔,所述第一容器孔、所述第二容器孔和所述第三容器孔的形状分别与所述第一试剂瓶、所述第二试剂瓶和所述EP管的形状相配合。优选地,所述第一试剂瓶、所述第二试剂瓶和所述EP管均为白色。为了实验操作方便快捷,优选的技术方案是,所述第一容器孔、所述第二容器孔和所述第三容器孔旁均标有编号,所述第一试剂瓶、所述第二试剂瓶和所述EP管上均设有标写相同编号的编号牌。所述编号牌上标有相对应的名称及规格。为了合理的容纳溶液,优选的技术方案是,所述第一试剂瓶为200ml试剂瓶,所述第二试剂瓶为50ml试剂瓶,所述EP管为2mlEP管。为了盒盖能够关闭和开启,优选的技术方案是,所述盒盖盖合在所述盒体上;所述盒盖的底面上设有锁舌,所述盒体的底板上对应所述锁舌的位置设有安装孔,所述安装孔内设置有锁止装置,所述锁止装置能够与所述锁舌卡接相连,所述锁止装置的数量为两个以上。所述盒盖包覆在所述盒体上,以增加密封性。为了锁止装置能够实现锁止功能,优选的技术方案是,所述锁止装置包括锁扣和第一弹簧,所述第一弹簧置于所述安装孔内,且所述第一弹簧的两端始终与所述盒体和所述锁扣相抵;所述锁扣包括两个第一弹性卡爪和锁止键,两个所述第一弹性卡爪闭合能够形成空腔,所述锁舌能够置于所述空腔内,所述第一弹性卡爪在所述盒盖打开时置于所述安装孔外;所述盒体的底板侧面上设有锁止槽,所述锁止槽与所述安装孔垂直连通,所述锁止键能够卡接在所述锁止槽内。为了限制第一弹性卡爪的相对位置,完善锁止功能,优选的技术方案是,所述锁扣还包括限位块,所述第一弹性卡爪相对设置在所述限位块的两个侧面上,所述安装孔孔口的位置设有挡檐,所述限位块顶面能够与所述挡檐的底面相抵。为了使盒盖在关闭时更加紧固,优选的技术方案是,所述锁止装置还包括第二弹簧和锁止球,所述盒体设有开孔,所述开孔与所述安装孔相连通,所述第二弹簧置于所述开孔内;所述限位块相对的侧面设有定位孔,所述锁止球的一端与所述弹簧相连,且另一端能够置于所述定位孔内;所述第二弹簧始终处于压缩状态。优选地,所述锁止键与所述定位孔相对设置在所述限位块的侧面上。为了使锁止球的相对滑动更加平稳,优选的技术方案是,所述限位块的侧面上竖直设有导槽,所述导槽与所述定位孔垂直连通,所述导槽的深度小于所述定位孔的深度,所述锁止球能够在所述导槽内滑动。所述导槽的长度大于所述盒盖打开时所述锁止键至所述锁止槽的距离。本技术的有益效果为:1、本技术提供一种免疫共沉淀试剂盒;包括盒盖、海绵垫和盒体,海绵垫设有试剂瓶和EP管,所述试剂瓶和EP管分别装有PBS、WashBufferI、WashBufferⅡ、Celllysisbuffer、ProteaseInhibitor、ProteinA/G-agarosebeads、IgG、Cross-linkingagent和Elutionbuffer,使用本技术,能够方便的进行免疫共沉淀试验,免除抗体信号干扰。2、容器孔的形状与试剂瓶和EP管的形状相配合,使试剂瓶和EP管固定平稳;容纳腔的形状与海绵垫的外围形状相配合,使海绵垫固定平稳,从而进一步使试剂瓶和EP管固定更加平稳。3、容器孔和放置本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.一种免疫共沉淀试剂盒,其特征在于,包括盒盖(1)、海绵垫(2)和盒体(3),所述盒体(3)设有容纳腔,所述海绵垫(2)置于所述容纳腔内;所述海绵垫(2)设有容器孔,所述容器孔内分别设有第一试剂瓶(4)、第二试剂瓶(5)和EP管(6);所述第一试剂瓶(4)包括PBS试剂瓶、Wash Buffer I试剂瓶和Wash BufferⅡ试剂瓶;所述第二试剂瓶(5)包括Cell lysis buffer试剂瓶;所述EP管(6)包括Protease Inhibitor EP管、Protein A/G‑agarose beads EP管、IgG EP管、Cross‑linking agent EP管和Elution buffer EP管;所述盒盖(1)盖合在所述盒体(3)上;所述盒盖(1)的底面上设有锁舌(11),所述盒体(3)的底板上对应所述锁舌(11)的位置设有安装孔(33),所述安装孔(33)内设置有锁止装置(31),所述锁止装置(31)能够与所述锁舌(11)卡接相连,所述锁止装置(31)的数量为两个以上。

【技术特征摘要】
1.一种免疫共沉淀试剂盒,其特征在于,包括盒盖(1)、海绵垫(2)和盒体(3),所述盒体(3)设有容纳腔,所述海绵垫(2)置于所述容纳腔内;所述海绵垫(2)设有容器孔,所述容器孔内分别设有第一试剂瓶(4)、第二试剂瓶(5)和EP管(6);所述第一试剂瓶(4)包括PBS试剂瓶、WashBufferI试剂瓶和WashBufferⅡ试剂瓶;所述第二试剂瓶(5)包括Celllysisbuffer试剂瓶;所述EP管(6)包括ProteaseInhibitorEP管、ProteinA/G-agarosebeadsEP管、IgGEP管、Cross-linkingagentEP管和ElutionbufferEP管;所述盒盖(1)盖合在所述盒体(3)上;所述盒盖(1)的底面上设有锁舌(11),所述盒体(3)的底板上对应所述锁舌(11)的位置设有安装孔(33),所述安装孔(33)内设置有锁止装置(31),所述锁止装置(31)能够与所述锁舌(11)卡接相连,所述锁止装置(31)的数量为两个以上。2.根据权利要求1所述的免疫共沉淀试剂盒,其特征在于,所述容纳腔的形状与所述海绵垫(2)的外围形状相配合。3.根据权利要求2所述的免疫共沉淀试剂盒,其特征在于,所述容器孔包括第一容器孔(21)、第二容器孔(22)和第三容器孔(23),所述第一容器孔(21)、所述第二容器孔(22)和所述第三容器孔(23)的形状分别与所述第一试剂瓶(4)、所述第二试剂瓶(5)和所述EP管(6)的形状相配合。4.根据权利要求3所述的免疫共沉淀试剂盒,其特征在于,所述第一容器孔(21)、所述第二容器孔(22)和所述第三容器孔(23)旁均标有编号,且所述第一试剂瓶(4)、所述第二试剂瓶(5)和所述EP管(6)上均设有标写相同编号的编号牌。5.根据权利要求4所述的免疫共沉淀试剂盒,其特征在于,所述第一试剂瓶(4)为200ml试剂瓶,所述第二试剂瓶(5)为50m...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘静董先辉王晓香钟健翔
申请(专利权)人:广州伯信生物科技有限公司
类型:新型
国别省市:广东,44

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