The utility model relates to an immune coprecipitation kit, which comprises a box cover, a sponge pad and a box body. The box body is provided with a holding chamber, and the sponge pad is placed in the holding chamber. The sponge pad is provided with a container hole, in which a first reagent bottle, a second reagent bottle and an EP tube are respectively arranged. The first reagent bottle comprises a PBS reagent bottle, a Wash Buffer I reagent bottle and a Wash Buffe tube. RII reagent bottle; the second reagent bottle includes Cell lysis buffer reagent bottle; the EP tube includes Protease Inhibitor EP tube, Protein A/G agarose beads EP tube, IgG EP tube, Cross linking agent (50mM) EP tube and Elution buffer EP tube; using the utility model, the co-precipitation test can be carried out conveniently and the interference of antibody signal can be eliminated.
【技术实现步骤摘要】
一种免疫共沉淀试剂盒
本技术涉及生物
,具体涉及一种不存在抗体信号干扰目的蛋白信号的免疫共沉淀试剂盒。
技术介绍
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是基于抗体和抗原之间结合的专一性用于研究蛋白质相互作用的经典方法,是确定蛋白质是否在生理条件下有相互作用的有效方法。然而,传统的由于免疫沉淀实验使用目的蛋白抗体加ProteinA/G-琼脂糖珠/磁珠与样品孵育,因此在最后离心获得抗体-琼脂糖珠/磁珠复合物后,离心管中主要含有抗体、目的蛋白、ProteinA/G-琼脂糖珠/磁珠以及一些其它非特异性作用蛋白。其中,抗体和目的蛋白以及ProteinA/G-琼脂糖珠/磁珠三者之间是以非共价健结合在一起,只有ProteinA/G与琼脂糖珠/磁珠是共价结合在一起的。因此,最后经过添加含巯基乙醇的加样缓冲液以及煮沸变性并离心出去ProteinA/G-琼脂糖珠/磁珠后,离心管含有抗体和目的蛋白以及少量非特异性吸附蛋白。这样SDS-PAGE中就至少含有目的蛋白和抗体二种蛋白,由于加样缓冲液中含有巯基乙醇和高温从而导致抗体的重链与轻链之间的二硫键被破坏从而使得抗体分子变成重链分子(55KD)和轻链分子(25KD)。因此,WB显色反应中除了能检测到目的蛋白外,如果所使用的二抗与用于免疫沉淀实验的抗体分子属于同一种属的话,还能检测到重链和轻链分子。通常用于免疫沉淀的抗体量非常大(1ug),所以当目的蛋白的大小接近重链或者轻链分子时,重链或者轻链分子的WB信号常常由于信号过强而导致影响对目的蛋白的WB结果的判断。由此可见,传统的Co-IP方法存在 ...
【技术保护点】
1.一种免疫共沉淀试剂盒,其特征在于,包括盒盖(1)、海绵垫(2)和盒体(3),所述盒体(3)设有容纳腔,所述海绵垫(2)置于所述容纳腔内;所述海绵垫(2)设有容器孔,所述容器孔内分别设有第一试剂瓶(4)、第二试剂瓶(5)和EP管(6);所述第一试剂瓶(4)包括PBS试剂瓶、Wash Buffer I试剂瓶和Wash BufferⅡ试剂瓶;所述第二试剂瓶(5)包括Cell lysis buffer试剂瓶;所述EP管(6)包括Protease Inhibitor EP管、Protein A/G‑agarose beads EP管、IgG EP管、Cross‑linking agent EP管和Elution buffer EP管;所述盒盖(1)盖合在所述盒体(3)上;所述盒盖(1)的底面上设有锁舌(11),所述盒体(3)的底板上对应所述锁舌(11)的位置设有安装孔(33),所述安装孔(33)内设置有锁止装置(31),所述锁止装置(31)能够与所述锁舌(11)卡接相连,所述锁止装置(31)的数量为两个以上。
【技术特征摘要】
1.一种免疫共沉淀试剂盒,其特征在于,包括盒盖(1)、海绵垫(2)和盒体(3),所述盒体(3)设有容纳腔,所述海绵垫(2)置于所述容纳腔内;所述海绵垫(2)设有容器孔,所述容器孔内分别设有第一试剂瓶(4)、第二试剂瓶(5)和EP管(6);所述第一试剂瓶(4)包括PBS试剂瓶、WashBufferI试剂瓶和WashBufferⅡ试剂瓶;所述第二试剂瓶(5)包括Celllysisbuffer试剂瓶;所述EP管(6)包括ProteaseInhibitorEP管、ProteinA/G-agarosebeadsEP管、IgGEP管、Cross-linkingagentEP管和ElutionbufferEP管;所述盒盖(1)盖合在所述盒体(3)上;所述盒盖(1)的底面上设有锁舌(11),所述盒体(3)的底板上对应所述锁舌(11)的位置设有安装孔(33),所述安装孔(33)内设置有锁止装置(31),所述锁止装置(31)能够与所述锁舌(11)卡接相连,所述锁止装置(31)的数量为两个以上。2.根据权利要求1所述的免疫共沉淀试剂盒,其特征在于,所述容纳腔的形状与所述海绵垫(2)的外围形状相配合。3.根据权利要求2所述的免疫共沉淀试剂盒,其特征在于,所述容器孔包括第一容器孔(21)、第二容器孔(22)和第三容器孔(23),所述第一容器孔(21)、所述第二容器孔(22)和所述第三容器孔(23)的形状分别与所述第一试剂瓶(4)、所述第二试剂瓶(5)和所述EP管(6)的形状相配合。4.根据权利要求3所述的免疫共沉淀试剂盒,其特征在于,所述第一容器孔(21)、所述第二容器孔(22)和所述第三容器孔(23)旁均标有编号,且所述第一试剂瓶(4)、所述第二试剂瓶(5)和所述EP管(6)上均设有标写相同编号的编号牌。5.根据权利要求4所述的免疫共沉淀试剂盒,其特征在于,所述第一试剂瓶(4)为200ml试剂瓶,所述第二试剂瓶(5)为50m...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘静,董先辉,王晓香,钟健翔,
申请(专利权)人:广州伯信生物科技有限公司,
类型:新型
国别省市:广东,44
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