一种人类环状RNA过表达载体框架、过表达载体及其制备方法技术

本发明专利技术提供了一种人类环状RNA过表达载体框架、过表达载体及其制备方法。所述人类环状RNA过表达载体框架及载体，能够作为通用的环状RNA过表达载体，取得了环状RNA过表达领域的突破；同时，所述环状RNA过表达载体解决了circRNA体内前期RNA成环效率低的问题，将成环率提高到95％，弥补circRNA前体不成环主要以线状形式存在的缺陷，避免了线状circRNA前体对环状circRNA功能引发的假阳性问题；且大大提高了circRNA过表达效率，将过表达效率提到500‑2000倍。

【技术实现步骤摘要】
一种人类环状RNA过表达载体框架、过表达载体及其制备方法
本专利技术属于生物
，具体涉及一种人类环状RNA过表达载体框架、过表达载体及其制备方法。
技术介绍
环状RNA(CircularRNAs)是广泛且多样地存在于多种生物细胞中，具有调控基因表达作用的一类内源性ncRNA分子。最早于20世纪70年代在RNA病毒中被发现。之后几十年，人们在一些转录本中也发现了一些由外显子构成的circRNA，如结肠直肠癌缺失基因转录本、人类Ets-1基因转录本等，但当时它们被认为是转录的“噪音”，未引起人们太多的关注。而近年来，随着生物信息学技术的快速发展，Salzman等、Jeck等、Memczak等及Guo等分别在人类和小鼠的多种细胞中发现了成千上万种circRNA。近年来，随着高通量测序技术及基因芯片技术的高速发展，研究者们在真核生物体内发现了越来越多的circRNA。如Salzman等发现了数以百计的与人类基因表达相关的circRNA。Jeck等在人类成纤维细胞中检测到了高达25000多种circRNA。目前发现的circRNA，根据其在基因组中的来源及其构成序列的不同，可以分为3类：本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种人类环状RNA过表达载体框架，其特征在于，包含启动子‑Alu环化元件‑多克隆位点‑反向互补Alu环化元件‑终止子，所述Alu环化元件的序列如SEQ ID NO:1所示，所述反向互补Alu环化元件的序列如SEQ ID NO:2所示。

【技术特征摘要】
1.一种人类环状RNA过表达载体框架，其特征在于，包含启动子-Alu环化元件-多克隆位点-反向互补Alu环化元件-终止子，所述Alu环化元件的序列如SEQIDNO:1所示，所述反向互补Alu环化元件的序列如SEQIDNO:2所示。2.根据权利要求1所述的人类环状RNA过表达载体框架，其特征在于，所述Alu环化元件还包含内含子AG受体序列，所述内含子AG受体序列如SEQIDNO:3所示。3.根据权利要求1所述的人类环状RNA过表达载体框架，其特征在于，所述反向互补Alu环化元件还包含内含子GT供体序列，所述内含子GT供体序列如SEQIDNO:4所示。4.根据权利要求1所述的人类环状RNA过表达载体框架，其特征在于，所述启动子为pCMV启动子。5.根据权利要求1所述的人类环状RNA过表达载体框架，其特征在于，所述终止子为BGHpA终止子。6.根据权利要求1所述的人类环状RNA过表达载体框架，其特征在于，所述多克隆位点依此包含第一酶切位点、...

【专利技术属性】
技术研发人员：董先辉，王晓香，陈业兴，周剑，
申请(专利权)人：广州伯信生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44