一种利用基因编辑技术获得高油酸油菜的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用基因编辑技术培育高油酸油菜的方法，具体是利用CRISPR/Cas9系统对FAD2基因进行定点编辑从而得到转基因油菜植株，具体包括以下步骤：(1)选择FAD2基因的两个gRNA的靶位点分别为S1和S2，并合成构建载体相关引物；(2)双靶点CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建；(3)抽提质粒，转化农杆菌；(4)利用农杆菌介导转化，将表达载体转入油菜，筛选获得FAD2基因发生突变的转基因植株。所述转基因油菜植株相比于野生型油菜植株含油量显著增高。而且本发明专利技术提供的方法有比较高的编辑效率，具有良好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种利用基因编辑技术获得高油酸油菜的方法
本专利技术涉及植物基因工程领域，具体涉及利用CRISPR/Cas9系统对甘蓝型油菜FAD2基因进行编辑，进而获得高油酸含量的油菜品种。
技术介绍
甘蓝型油菜(BrassicanapusL.,2n＝38，AACC)为十字花科芸薹属植物，是我国种植面积最大的油料作物。经过长期自然选择和人工选择，甘蓝型油菜的农艺性状也在不断向更适应人类日常需求的方向进行定向的改良。良好的甘蓝型油菜农艺性状主要包括高含油量、高不饱和脂肪酸含量、低硫甙、低芥酸、抗逆以及良好的株型等。其中，具有低芥酸、低硫甙的“双低”性状油菜培育是近年来甘蓝型油菜育种的研究热点。另外，“双低”油菜的菜籽油中包括了油酸、亚油酸等优良不饱和脂肪酸的组分，优良品种中油酸含量甚至可以高达80％。品质优良的甘蓝型油菜对国民经济的增长以及国民生活质量的提升都具有至关重要的作用，而优良脂肪酸含量的菜籽油对人类心血管健康非常有利。在人体的健康功效方面，高油酸菜籽油能够良好的调节人体内脂质代谢，维持心脑血管功能的正常进行，促进人体内消化吸收，降低人体内胆固醇，甘油三酯等含量，从而进一步控制血糖含量，对青本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用基因编辑技术获得高油酸油菜的方法，其特征在于：利用CRISPR/Cas9系统对FAD2基因进行定点编辑从而得到编辑后的油菜植株，具体包括以下步骤：步骤S1、选择FAD2基因的两个gRNA的靶位点分别为S1和S2，并合成构建载体相关引物；步骤S2、双靶点CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建；步骤S3、抽提质粒，转化农杆菌；步骤S4、利用农杆菌介导转化油菜，筛选获得FAD2基因发生突变的转基因植株。

【技术特征摘要】
1.一种利用基因编辑技术获得高油酸油菜的方法，其特征在于：利用CRISPR/Cas9系统对FAD2基因进行定点编辑从而得到编辑后的油菜植株，具体包括以下步骤：步骤S1、选择FAD2基因的两个gRNA的靶位点分别为S1和S2，并合成构建载体相关引物；步骤S2、双靶点CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建；步骤S3、抽提质粒，转化农杆菌；步骤S4、利用农杆菌介导转化油菜，筛选获得FAD2基因发生突变的转基因植株。2.根据权利要求1所述的利用基因编辑技术获得高油酸油菜的方法，其特征在于：所述油菜为甘蓝型油菜。3.根据权利要求1所述的利用基因编辑技术获得高油酸油菜的方法，其特征在于：所述步骤S1中，靶位点S1序列为SEQIDNo.1，靶位点S2序列为SEQIDNo.2。4.根据权利要求1所述的利用基因编辑技术获得高油酸油菜的方法，其特征在于：所述步骤S1中引物序列分别为SEQIDNo.3、SEQIDNo.4、SEQIDNo.5、SEQIDNo.6。5.根据权利要求1所述的利用基因编辑...

【专利技术属性】
技术研发人员：万丽丽，王转茸，辛强，洪登峰，杨光圣，
申请(专利权)人：武汉市农业科学院，
类型：发明
国别省市：湖北,42