一种合成索玛鲁肽的方法技术

本发明专利技术采用固相化学的方法制备索玛鲁肽，能够很好的避免杂质肽的产生，提高粗肽纯度，降低生产成本。该方法首次采用Fmoc‑Lys(N‑ε‑ADO‑ADO‑(γ‑Glu(N‑α‑X)‑OtBu)‑OH参与固相合成索玛鲁肽(其中谷氨酸α氨基保护基X为Alloc、Mmt、Mtt、Dde或ivDde),然后脱掉保护基，在固相上脂肪酸化；同时针对索玛鲁肽工艺产生的缺1个Ala杂质肽；接18位和19位时采用Fmoc‑Ala‑Ala‑OH,避免这一纯化过程中难以除去杂质的生成；为避免产生±Gly的工艺杂质，引入Fmoc‑Glu(OtBu)‑Gly‑OH和Fmoc‑Arg(Pbf)‑Gly–OH两个二肽作为单体参与合成；通过引入这四个个片段肽参与索玛鲁肽的固相合成，提高了粗肽纯度，降低了纯化难度，降低了生产成本。

【技术实现步骤摘要】
一种合成索玛鲁肽的方法
本专利技术属多肽合成领域，特别涉及一种固相制备索玛鲁肽的方法。技术背景索玛鲁肽(Semeglutide)，商品名Ozempic，由丹麦诺和诺德公司研发，于2017年12月05日在美国上市，现正在中国进行临床试验，很快将进入中国市场。Ozempic被指定为饮食和运动的辅助手段，以改善2型糖尿病患者的血糖控制。索玛鲁肽也是一种GLP-1类似物，与人GLP-1具有94％的序列同源性，是诺和诺德开发的第二代脂肪链修饰GLP-1类似物，与第一代脂肪链修饰GLP-1类似物利拉鲁肽相比，其半衰期更长，剂量更低。索玛鲁肽保持了利拉鲁肽良好的安全性和降糖有效性，且减轻体重效果优于前两者。利拉鲁肽为脂肪酸链修饰技术的第一代GLP-1类似物，修饰位点为26位赖氨酸：采用了γ谷氨酸连接子，16碳脂肪酸链，序列34位突变为精氨酸(同源性97％)。索玛鲁肽在此基础上进行了系统优化，修饰位点仍为26位赖氨酸：采用谷氨酸-2PEG为连接子，18碳二羧酸脂肪酸链，序列上34位突变为赖氨酸，8位丙氨酸突变为非天然氨基酸Aib，避免被DPP-IV酶切失活。索玛鲁肽化学表述为Aib8,Arg34本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种固相化学制备索玛鲁肽的方法，其特征在于，包括如下步骤：(a)采用Wang树脂或CTC树脂为固相载体，用Fmoc‑Arg(Pbf)‑Gly‑OH与之偶联反应制备Fmoc‑Arg(Pbf)‑Gly‑Wang树脂或Fmoc‑Arg(Pbf)‑Gly‑CTC树脂，再按序列依次偶联连接保护氨基酸，得到侧链全保护的索玛鲁肽(未脂肪酸化)肽树脂：Boc‑His(Trt)‑Aib‑Glu(OtBu)‑Gly‑Thr(tBu)‑Phe‑Thr(tBu)‑Ser(tBu)‑Asp(OtBu)‑Val‑Ser(tBu)‑Ser(tBu)‑Tyr(tBu)‑Leu‑Glu(OtBu)‑Gly‑Gln(Trt)...

【技术特征摘要】
1.一种固相化学制备索玛鲁肽的方法，其特征在于，包括如下步骤：(a)采用Wang树脂或CTC树脂为固相载体，用Fmoc-Arg(Pbf)-Gly-OH与之偶联反应制备Fmoc-Arg(Pbf)-Gly-Wang树脂或Fmoc-Arg(Pbf)-Gly-CTC树脂，再按序列依次偶联连接保护氨基酸，得到侧链全保护的索玛鲁肽(未脂肪酸化)肽树脂：Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(N-ε-ADO-ADO-(γ-Glu(N-α-X)-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-树脂；(b)采用脱保护试剂脱掉20位Lys(N-ε-ADO-ADO-(γ-Glu(N-α-X)-OtBu侧链谷氨酸α氨基保护基X；(c)通过固相合成法，在谷氨酸α氨基偶联十八烷二酸(OctadecanedioicAcid),得到侧链保护的索玛鲁肽肽树脂：Boc-His(Boc)-Ala-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(N-ε-ADO-ADO-(γ-Glu(N-α-OctadecanedioicAcid)-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-树脂；(d)索玛鲁肽肽树脂经裂解、纯化、冻干得索玛鲁肽精肽。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(a)中所述固相载体Fmoc-Arg(Pbf)-Gly-Wang树脂或Fmoc-Arg(Pbf)-Gly...

【专利技术属性】
技术研发人员：李同金，赵传海，孟岩，周勇，翟涛，
申请(专利权)人：山东汉泰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37