分离白蛋白非结合物、白蛋白结合物和小分子化合物的方法技术

本发明专利技术公开了一种分离白蛋白非结合物、白蛋白结合物和小分子化合物的方法，包括如下步骤：用洗脱液平衡色谱柱后，将含有白蛋白结合物和非结合的小分子化合物混合溶液上样至色谱柱；用洗脱液冲洗色谱柱，当色谱柱中流出液体的UV吸光度达到10mAU时开始收集含白蛋白结合物的冲洗液，当UV吸光度降至基线水平时停止收集；用纯化水冲洗色谱柱，当含游离的小分子化合溶液的UV吸光度达到10mAU时开始收集含游离小分子化合物的冲洗液，当UV吸光度降至基线水平时停止收集。从含有白蛋白结合物与非结合白蛋白的溶液中分离游离小分子化合物，具有分离效果好，处理批量大的优点。解决了不能去除游离小分子化合物的缺点，克服了采用凝胶过滤层析方法处理批量小的缺陷。

【技术实现步骤摘要】
分离白蛋白非结合物、白蛋白结合物和小分子化合物的方法
本专利技术涉及用于从含有白蛋白非结合物及白蛋白结合物溶液中分离白蛋白非结合物及白蛋白结合物和游离小分子化合物的方法。
技术介绍
白蛋白本身具有可生物降解、无毒、无抗原性、病人耐受和生物利用度高等特点，因此白蛋白受到生物医药领域的广泛关注。其中白蛋白载药技术应用比较广泛和成熟，白蛋白载药体系可改善药物的药代动力学特征，如延长药物半衰期，增强药物活性等。目前，已有多个药物采用相关技术上市，比如白蛋白纳米紫杉醇，索玛鲁肽等。Conjuchem公司的药物亲和构建技术平台技术也是一种采用白蛋白偶联药物的技术平台，该平台是对母体药物进行结构修饰后与白蛋白的34位半胱氨酸残基（巯基）反应，由于并不是所有的白蛋白分子都含有34位半胱氨酸残基（巯基），因此在白蛋白和修饰后的小分子化合物耦合后需要去除未反应的游离白蛋白。CN1956998A描述了纯化白蛋白结合物的方法，具体为一种用于通过疏水作用层析从含有白蛋白结合物与非结合白蛋白的溶液中分离白蛋白结合物的方法。CN1956998A具体是将含有白蛋白结合物与非结合白蛋白的溶液加样到用高含盐量的水性缓冲本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分离白蛋白非结合物、白蛋白结合物和小分子化合物的方法，其特征在于包括如下步骤：a. 用洗脱液平衡苯基琼脂糖凝胶色谱柱后，将含有白蛋白结合物和非结合的小分子化合物混合溶液上样至苯基琼脂糖凝胶色谱柱；b. 用洗脱液持续冲洗苯基琼脂糖凝胶色谱柱，当色谱柱中流出液体的UV吸光度达到10mAU时开始收集含白蛋白结合物的冲洗液，当色谱柱中流出液体的UV吸光度降至基线水平时停止收集；c. 停止收集白蛋白结合物后，再用纯化水持续冲洗苯基琼脂糖凝胶色谱柱，当含游离的小分子化合溶液的UV吸光度达到10mAU时开始收集含游离小分子化合物的冲洗液，当含游离小分子化合物溶液的UV吸光度降至基线水平时停止收集。

【技术特征摘要】
1.一种分离白蛋白非结合物、白蛋白结合物和小分子化合物的方法，其特征在于包括如下步骤：a.用洗脱液平衡苯基琼脂糖凝胶色谱柱后，将含有白蛋白结合物和非结合的小分子化合物混合溶液上样至苯基琼脂糖凝胶色谱柱；b.用洗脱液持续冲洗苯基琼脂糖凝胶色谱柱，当色谱柱中流出液体的UV吸光度达到10mAU时开始收集含白蛋白结合物的冲洗液，当色谱柱中流出液体的UV吸光度降至基线水平时停止收集；c.停止收集白蛋白结合物后，再用纯化水持续冲洗苯基琼脂糖凝胶色谱柱，当含游离的小分子化合溶液...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜旭召，庞田，白茜茜，李云峰，
申请(专利权)人：河北常山生化药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：河北,13