一种用于检测痕量磷酸蛋白的石英晶体微天平传感器及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种快速检测痕量磷酸蛋白的石英晶体微天平传感器的制备方法及应用，本方法基于二氧化钛和磷酸蛋白的特异性结合的原理，ɑ‑酪蛋白的线性范围为1ug·mL

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测痕量磷酸蛋白的石英晶体微天平传感器及其应用
本专利技术属于分子检测
，具体涉及一种用于检测痕量磷酸蛋白的石英晶体微天平传感器。
技术介绍
蛋白质的磷酸化是一种可逆性的翻译后修饰，它在细胞的生命活动中起到十分重要的作用，包括信号转导，细胞的增殖、分化、发育、凋亡，神经活动，肌肉收缩和肿瘤生长等过程。一个异常的磷酸化可能是如癌症、糖尿病、慢性炎症或神经退行性疾病标志的潜在因素之一。特别是一些低丰度的磷酸化蛋白质和磷酸化肽表现出的高灵敏度和特异性是表征生物体特殊生理状态的一个重要的因素。石英晶体微天平传感器是一种简单的，便宜的，具有高质量感应分辨率的免标记技术，由于它对负载在其表面的质量变化(甚至纳克级别)具有极好的灵敏性，因而被分析应用技术所广泛采纳。它是以二氧化钛和磷酸蛋白的特异性反应为基础，可以用来进行特异性定量检测目标蛋白，二氧化钛作为磷酸蛋白分子的识别性原件和压电传感性元件直接接触，然后通过传感性元件把待测的物质的浓度信号转变成响应的频率电信号。其能特异性识别目标蛋白，增加了检测结果的准确性。
技术实现思路
本专利技术依托在石英金电极表面以自组装的方式构建的一种氨基本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测痕量磷酸蛋白的石英晶体微天平传感器，所述传感器为石英晶体金电极，其特征在于，石英晶体金电极表面修饰特异性吸附磷酸蛋白的薄膜，所述薄膜由巯基十一烷酸和氨基化纳米二氧化钛组成。

【技术特征摘要】
1.一种用于检测痕量磷酸蛋白的石英晶体微天平传感器，所述传感器为石英晶体金电极，其特征在于，石英晶体金电极表面修饰特异性吸附磷酸蛋白的薄膜，所述薄膜由巯基十一烷酸和氨基化纳米二氧化钛组成。2.根据权利要求1所述一种用于检测痕量磷酸蛋白的石英晶体微天平传感器，其特征在于，制备方法包括如下步骤：(1)将氨基化纳米二氧化钛粉末分散于去离子水中，超声分散形成1mg·mL-1的均一溶液；(2)将巯基十一烷酸粉末分散于无水乙醇中，超声分散形成2mg·mL-1的均一溶液；(3)自组装：在三角瓶中加入1-2.5mL的步骤(2)所制备的巯基十一烷酸溶液，将电极浸泡到该溶液中，避光，过夜自组装，将自组装完毕的石英晶体金电极分别用乙醇和超纯水清洗三次，以除去金电极表面未结合的巯基十一烷酸，储备于无水乙醇中，使用前用N2吹干；(4)活化：向自组装好的电极表面滴加10μLEDC/NHS混合溶液，避光，反应2h，反应完毕后，用超纯水清洗电极表面三次，氮气吹干，备用；(5)NH2-TiO2的连接：在步骤(4)得到的电极表面滴加2.5-15uL氨基化纳米二氧化钛的水溶液，在N2环境下反应干燥15-25min；然后依次用水、无水乙醇淋洗，N2吹干；(6)封闭：在步骤(3)得到的电极表面滴加10uL配置好的1％的BSA溶液封闭未结合上氨基化纳米二氧化钛的羧基位点，用时1h，之后依次用碳酸氢铵缓冲液、超纯水清洗，清洗两次，氮气吹干，放置于4℃备用。3.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：王俊平，郭建平，王艳丽，王硕，
申请(专利权)人：天津科技大学，
类型：发明
国别省市：天津,12