一种基于动物半乳凝集素-3糖识别结构域富集糖蛋白的方法技术

本发明专利技术公开了一种基于动物半乳凝集素‑3糖识别结构域富集糖蛋白的方法。本发明专利技术利用的半乳凝集素‑3糖识别结构域来源于动物为如下A1)、A2)或A3)：A1)氨基酸序列是序列1的第37‑176位的蛋白质；A2)将序列表中序列1的第37‑176位所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质；A3)在A1)或A2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。本发明专利技术利用半乳凝集素‑3糖识别结构域及其四聚制备的凝集素亲和柱可以成功富集糖蛋白。

A Method for Enriching Glycoproteins Based on the Recognition Domain of Galactagglutinin-3 Sugar from Animals

The invention discloses a method for enriching glycoproteins based on the recognition domain of galactagglutinin 3 sugars of animals. The galactagglutinin 3 sugar recognition domain utilized by the present invention originates from proteins at position 37 176 of sequence 1 in animals as follows: A1) amino acid sequence is a protein at position 37 176 of sequence 1; A2) protein with the same function is substituted and/or deleted by one or more amino acid residues and/or added by the amino acid sequence at position 37 176 of sequence 1; A3) N at A1) or A2). Fusion proteins obtained by end or/or C-end ligation tags. The agglutinin affinity column prepared by using galactagglutinin 3 sugar recognition domain and its tetramer can successfully enrich glycoprotein.

【技术实现步骤摘要】
一种基于动物半乳凝集素-3糖识别结构域富集糖蛋白的方法
本专利技术涉及生物
中，一种基于动物半乳凝集素-3糖识别结构域富集糖蛋白的方法。
技术介绍
半乳凝集素(Galectins)是凝集素中一类进化上十分保守的可溶性蛋白质，含有一个或两个长约130个氨基酸组成的糖识别结构域(carbohydraterecognitiondomain，CRD)，对β-半乳糖苷及其缀合物具有特异亲和力。迄今为止，已有15个哺乳动物半乳凝集素家族成员被发现，根据其CRD的组成数目可分为含有单一CRD的原型，含有两个CRD的串联重复型，含有一个CRD和一个胶原蛋白样重复结构域的嵌合型。其中，半乳凝集素-3是嵌合型中的唯一成员，普遍存在于动物界，通过非经典途径分泌，在无配体情况下也能保持活性，要求还原性环境。半乳凝集素-3在人类基因组中由单个基因编码，位于14号染色体q21-22位点，在人体主要由激活的巨噬细胞分泌，可与细胞内糖蛋白、细胞外基质和细胞表面分子相互作用，参与细胞黏附、增殖、活化、凋亡等生物学过程。目前商业途径获得的凝集素大多都是植物凝集素，例如对高甘露糖具有特异亲和力的伴刀豆凝集素(Con本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.凝集素或其聚合物在下述X1)‑X4)任一种中的应用：X1)在富集β‑半乳糖或其缀合物中的应用；X2)在制备富集β‑半乳糖或其缀合物产品中的应用；X3)在检测β‑半乳糖或其缀合物中的应用；X4)在制备检测β‑半乳糖或其缀合物产品中的应用；所述凝集素为m1)或m2)：m1)动物半乳凝集素；m2)所述动物半乳凝集素的糖识别结构域。

【技术特征摘要】
1.凝集素或其聚合物在下述X1)-X4)任一种中的应用：X1)在富集β-半乳糖或其缀合物中的应用；X2)在制备富集β-半乳糖或其缀合物产品中的应用；X3)在检测β-半乳糖或其缀合物中的应用；X4)在制备检测β-半乳糖或其缀合物产品中的应用；所述凝集素为m1)或m2)：m1)动物半乳凝集素；m2)所述动物半乳凝集素的糖识别结构域。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述动物为a1)或a2)：a1)哺乳动物；a2)人；和/或，所述凝集素为半乳凝集素-3；和/或，所述凝集素的聚合物为所述动物半乳凝集素的四聚体。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述动物半乳凝集素的糖识别结构域为如下A1)、A2)或A3)：A1)氨基酸序列是序列1的第37-176位的蛋白质；A2)将序列表中序列1的第37-176位所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质；A3)在A1)或A2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质；所述糖识别结构域的聚合物为如下B1)、B2)或B3)：B1)氨基酸序列是序列2的第37-614位的蛋白质；B2)将序列表中序列2的第37-614位所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质；B3)在B1)或B2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：A3)所述融合蛋白质为a1)或a2)或a3)或a4)或a5)：a1)序列表中序列1的第37-191位所示的蛋白质；a2)序列表中序列1的第37-199位所示的蛋白质；a3)序列表中序列1的第1-176位所示的蛋白质；a4)序列表中序列1的第1-191位所示的蛋白质；a5)序列表中序列1所示的蛋白质；B3)所述融合蛋白质为b1)或b2)或b3)或b4)或b5)：b1)序列表中序列2的第37-629位所示的蛋白质；b2)序列表中序列2的第37-637位所示的蛋白质；b3)序列表中序列2的第1-614位所示的蛋白质；b4)序列表中序列2的第1-629位所示的蛋白质；b5)序列表中序列2所示的蛋白质。5.权利要求1-4中任一所述凝集素的生物素标记物，或权利要求1-4中任一所述凝集素的聚合物的生物素标记物，或与权利要求1-4中任一所述凝集素相关的生物材料，或与权利要求1-4中任一所述凝集素的聚合物相关的生物材料在下述X1)-X4)任一种中的应用：X1)在富集β-半乳糖或其缀合物中的应用；X2)在制备富集β-半乳糖或其缀合物产品中的应用；X3)在检测β-半乳糖或其缀合物中的应用；X4)在制备检测β-半乳糖或其缀合物产品中的应用；所述与权利要求1-4中任一所述凝集素相关的生物材料为下述C1)至C5)中的任一种：C1)编码权利要求1-4中任一所述凝集素的核酸分子；C2)含有C1)所述核酸分子的表达盒；C3)含有C1)所述核酸分子的重组载体、或含有C2)所述表达盒的重组载体；C4)含有C1)所述核酸分子的重组微生物、或含有C2)所述表达盒的重组微生物、或含有C3)所述重组载体的重组微生物；C5)含有C1)所述核酸分子的转基因细胞系、或含有C2)所述表达盒的转基因细胞系；所述与权利要求1-4中任一所述凝集素的聚合物相关的生物材料为下述D1)至D5)中的任一种：D1)编码权利要求1-4中任一所述凝集素的聚合物的核酸分子；D2)含有D1)所述核酸分子的表达盒；D3)含有D1)所述核酸分子的重组载体、或含有D2)所述表达盒的重组载体；D4)含有D1)所述核酸分子的重组微生...

【专利技术属性】
技术研发人员：应万涛，钱小红，张勇，王明超，赵洋，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院，北京蛋白质组研究中心，
类型：发明
国别省市：北京,11