一种桑叶提取物中脱氧野尻霉素含量的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种桑叶提取物中脱氧野尻霉素含量的检测方法，该检测方法包括以下步骤：对桑叶提取物中脱氧野尻霉素进行高效液相色谱法分析，用标准曲线法测定样品桑叶提取物中脱氧野尻霉素的含量。该方法检测桑叶提取物中脱氧野尻霉素含量具有检测前处理简单、检测成本较低、检测方法稳定、检测数据准确等特点。

【技术实现步骤摘要】
一种桑叶提取物中脱氧野尻霉素含量的检测方法
本专利技术涉及物质分离检测
，且特别涉及一种桑叶提取物中脱氧野尻霉素含量的检测方法。
技术介绍
桑叶为桑属植物桑(MorusalbaL.)的叶子，为药食两用品。我国南北各地广泛种植桑树，桑叶产量丰富。桑叶中含有丰富的黄酮类、生物碱类、植物甾醇、γ-氨基丁酸和多糖类物质。现有的研究表明：桑叶中的芸香苷、槲皮素、槲皮苷具有降血脂、降血压和降胆固醇的作用，桑叶中的多糖和DNJ具有降血糖的功效，桑叶正丁醇提取物具有辅助降血脂的功效。近年来，随着天然健康的价值回归，桑树活性物质展现出了可被应用于食品、医药、保健、美容等方面的巨大潜能。脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin，DNJ)为桑叶提取物中主要的功能活性物质之一。多羟基生物碱1-脱氧野尻霉素(1-deoxojirimycin，DNJ)，是桑叶有效成分之一，它的结构类似天然糖，对小肠中的α-葡糖苷酶活性具有强竞争性抑制作用和抗肿瘤、抗病毒等药理活性，并且具有显著的降血糖作用，因此，桑叶中DNJ的研究得到了国内外学者的广泛关注，DNJ叶成为桑蚕综合利用的一个研究热点。近年来，随着社会的发展和人们生活水平的提高，人们自我保健意识的不断增强，对疾病的关注已经由单纯的治疗转向预防，在新的医学模式影响下，具备功能性或活性的植物提取物产品备受青睐。目前，植物提取物产业发展越来越快，植物提取物产业发展的速度已经超过药品发展速度，成为独立的新兴行业，在世界范围内得到广泛认可。桑叶中DNJ的含量远远高于其他已被发现的植物与微生物，因此，富含DNJ的植物提取物具有广泛的应用前景。目前，桑叶中DNJ的检测方法主要包括分光光度法(使用Wagner试剂染色，DNJ与其反应生成络合物在紫外条件下检测DNJ含量)、柱前衍生化-高效液相色谱法(FMOC-Cl柱前衍生化、AQC柱前衍生HPLC测定)、离子色谱法、气相色谱法等。然而利用上述的检测方法检测时并不能快速且准确检测出桑叶提取物中DNJ含量。因此，需要开发一种能够快速且准确检测出桑叶提取物中DNJ含量的方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种桑叶提取物中脱氧野尻霉素含量的检测方法，该方法检测桑叶提取物中脱氧野尻霉素含量具有检测前处理简单、检测成本较低、检测方法稳定、检测数据准确等特点。本专利技术解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。本专利技术提出了一种桑叶提取物中脱氧野尻霉素含量的检测方法，包括以下步骤：对桑叶提取物中脱氧野尻霉素进行高效液相色谱法分析，用标准曲线法测定样品桑叶提取物中脱氧野尻霉素的含量。本专利技术的有益效果是：本专利技术还提供了一种桑叶提取物中脱氧野尻霉素含量的检测方法，本专利技术提供一种快捷、灵敏、准确、重现性好的桑叶提取物中脱氧野尻霉素含量的检测方法，该方法不仅样品前处理简单，而且重现性好，准确度高。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。图1是脱氧野尻霉素标准曲线图；图2是实施例1中样品编号为1-1的脱氧野尻霉素色谱图；图3是实施例1中样品编号为1-2的脱氧野尻霉素色谱图；图4是实施例1中样品编号为1-3的脱氧野尻霉素色谱图；图5是实施例1中样品编号为1-4的脱氧野尻霉素色谱图；图6是实施例1中样品编号为1-5的脱氧野尻霉素色谱图；图7是实施例1中样品编号为1-6的脱氧野尻霉素色谱图。具体实施方式为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。下面对本专利技术实施例提供的一种桑叶提取物中脱氧野尻霉素含量的检测方法进行具体说明。本专利技术实施例提出了一种桑叶提取物中脱氧野尻霉素含量的检测方法，包括以下步骤：对桑叶提取物中脱氧野尻霉素进行高效液相色谱法分析，用标准曲线法测定样品桑叶提取物中脱氧野尻霉素的含量。目前，桑叶中脱氧野尻霉素含量的检测方法包括分光光度法、柱前衍生化-高效液相色谱法、离子色谱法检测等检测方法，其中，分光光度法方法操作简单、仪器简单、重复性好且应用广泛，但是其准确度较低，而且桑叶的提取液和纯化液一般为有色溶液，少量颜色的存在在一定程度上会对吸光度有影响。柱前衍生化-高效液相色谱法具有准确、选择性强、重复性好，可用于脱氧野尻霉素检测的定量分析，缺点是衍生化操作繁琐，需要严格控制反应条件，且需要考虑产物的复杂性和稳定性等因素，检测成本较高。离子色谱法检测准确度高，但是电化学检测选择性低、灵敏度低。气相色谱法检测方法简单，但是前期将脱氧野尻霉素转化为低沸点的过程较为复杂。本专利技术实施例中的检测方法克服了目前检测方法中存在的缺陷，采用高效液相色谱法进行检测，该方法是一种快捷、灵敏、准确、重现性好的桑叶提取物中脱氧野尻霉素含量的检测方法，该方法不仅样品前处理简单，而且重现性好，准确度高。在一些实施方式中，高效液相色谱法分析的过程具体步骤如下：取脱氧野尻霉素对照品制备对照品溶液；取桑叶提取物制备供试品溶液；取不同浓度的对照品溶液经高效液相色谱法获得对照品峰面积，以对照品溶液的浓度和对照品峰面积制作标准曲线；取供试品溶液，经高效液相色谱法获得供试品峰面积，与标准曲线比较，获得供试品溶液中脱氧野尻霉素含量。在一些实施方式中，高效液相色谱法的色谱柱采用Shodex氨基色谱柱。在一些实施方式中，高效液相色谱法的流动相采用流动相A和流动相B，流动相A为乙腈，流动相B为6-7mmol/L的乙酸铵。在一些实施方式中，流动相A和流动相B的体积比为80:20-85:15，优选为82:18。在一些实施方式中，流动相的流速为0.8-1.2mL/min，优选为1.0mL/min。在一些实施方式中，高效液相色谱法的柱温为30-40℃，优选为40℃。在一些实施方式中，高效液相色谱法的进样体积为5-20μl，优选为10μl。在一些实施方式中，高效液相色谱法的检测器为蒸发光散射检测器。在一些实施方式中，蒸发光散射检测器的漂移管温度95-103℃，氮气流速2.0-2.8L/min，优选的，漂移管温度100℃，氮气流速2.5L/min。本专利技术中采用上述的色谱条件作为测定过程中的色谱条件，提供一种快捷、灵敏、准确、重现性好的桑叶提取物中脱氧野尻霉素含量的检测方法，该方法不仅样品前处理简单，而且重现性好，准确度高，并且当色谱条件发生变化时，不能满足有效分离的要求，进而无法准确检测出桑叶提取物中脱氧野尻霉素含量。以下结合实施例对本专利技术的特征和性能作进一步的详细描述。实施例1一种桑叶提取物中脱氧野尻霉素含量的检测方法：(1)、供试品溶液制备：称取30mg桑叶提取物，流动相溶解，超声30min，以0.22μm滤膜过滤，取滤液为供试品溶液备用；(2)、对照品溶液制备：精密称取12.05mg脱氧野尻霉素对照品于25mL容量瓶中，以流动相溶解定容，摇匀，即得浓度为457.9mg/L的脱氧野尻霉素对照品溶液原液，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种桑叶提取物中脱氧野尻霉素含量的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：对桑叶提取物中脱氧野尻霉素进行高效液相色谱法分析，用标准曲线法测定样品桑叶提取物中脱氧野尻霉素的含量。

【技术特征摘要】
1.一种桑叶提取物中脱氧野尻霉素含量的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：对桑叶提取物中脱氧野尻霉素进行高效液相色谱法分析，用标准曲线法测定样品桑叶提取物中脱氧野尻霉素的含量。2.根据权利要求1所述的桑叶提取物中脱氧野尻霉素含量的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱法分析的过程具体步骤如下：取脱氧野尻霉素对照品制备对照品溶液；取桑叶提取物制备供试品溶液；取不同浓度的对照品溶液经高效液相色谱法获得对照品峰面积，以所述对照品溶液的浓度和所述对照品峰面积制作标准曲线；取供试品溶液，经高效液相色谱法获得供试品峰面积，与所述标准曲线比较，获得供试品溶液中脱氧野尻霉素含量。3.根据权利要求2所述的桑叶提取物中脱氧野尻霉素含量的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的色谱柱采用Shodex氨基色谱柱。4.根据权利要求2所述的桑叶提取物中脱氧野尻霉素含量的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的流动相采用流动相A和流动相B，所述流动相A为乙腈，所述流动相B为6-7mmol/L的乙酸铵。5.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：王玉，张继斌，陈志元，江丹，
申请(专利权)人：劲牌生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北,42