用于确定数字图像中至少一个对象的整体亮度的方法技术

本发明专利技术涉及用于确定数字图像中至少一个对象的整体亮度的方法和系统。特别地，本发明专利技术涉及一种用于确定数字图像中至少一个对象的整体亮度的方法，所述至少一个对象被配置为接收包括遗传信息的分子，所述方法包括以下步骤：产生包括k个样本点的区域A，所述k个点依照预定分布在区域A中分布；将区域A的中心位置对准到数字图像中至少一个对象的中心位置；提取在k个样本点的每个样本点处的强度值；并且计算在各自k个样本点处提取的强度值的中心趋势。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于确定数字图像中至少一个对象的整体亮度的方法本专利技术涉及用于确定数字图像中至少一个对象的整体亮度的方法和系统。特别地，本专利技术涉及用于确定数字图像中至少一个对象的整体亮度的方法和系统，其中所述至少一个对象被配置为接收包括遗传信息的分子。生物技术、医学和相关的
是基于分子分析的。电子器件可以以高精度和特异性分析分子。特别是在过去几年，自动化电子器件已经被开发出来用于通过常规方法分析大量样本。例如，现代DNA测序设备被用于大量DNA探针的常规分析。蛋白质样本可以借助高通量筛选及相关方法来分析。通常，这种电子器件检测从样本探针发射的荧光信号。当已经用荧光化合物如染料标记分子如核酸或蛋白质时，这是可行的。商业上可获得的测序设备能够对用荧光染料标记的大量样本进行并行测序。最近开发的被称为“下一代测序”NGS的方法使测序发生革命性变化。NGS允许对在流动池中或通过产生油水乳液在空间上分隔的克隆扩增的或单个DNA分子进行大规模并行测序。NGS允许同时执行数千乃至成百万到数十亿的测序反应。在NGS中，通过聚合酶介导的核苷酸延伸的重复循环或者在一种格式中通过寡核苷酸连接的迭代循环来执行测序。作为大规模并行处理，取决于平台，NGS在单次仪器运行中产生数百兆碱基到数千兆碱基的核苷酸测序输出。与常规方法相比，廉价地产生大量的序列数据是其主要优点。例如在Voelkerding等人，ClinicalChemistry55：4第641-658页，2009年以及Metzker，NatureReviews/Genetics第11卷，2010年1月，第31-46页中综述了用于NGS技术的NGS平台和常见应用/领域。在NGS中，各种感兴趣的寡核苷酸被共价附接于支持物上。随后，使用DNA聚合酶将用荧光染料标记的核苷酸附接于生长的寡核苷酸链。当用不同的荧光染料标记四个核苷酸时，可以检测从探针发射的荧光信号并且可以鉴定被附接于寡核苷酸的核苷酸的类型。在检测之后，将荧光染料切割掉并且执行下一合成循环，在下一合成循环中将新的标记的核苷酸附接于生长的链上。通过执行多个循环，可以依照逐步的方式确定生长的寡核苷酸链的序列。在自动化测序设备中执行工作步骤。US2010/0323350A1和WO2009/117119A1涉及使用例如通过合成方法从测序中获得的数据来确定核苷酸序列中的核酸的身份的方法和组合物。WO2008/097455A1涉及一种用于激发并测量包括荧光材料如荧光标签、染料或颜料的样本上或样本中的荧光的成像系统，尤其是用于检测核酸上的荧光标签。此外，公开了一种器件，所述器件被配置为使得同时检测多个不同的DNA模板中的荧光标签。WO2014/020137A1涉及一种用于从测序库中富集目标序列以便提供目标富集测序库的方法，其中测序库适合于大规模并行测序并且包括多个双链核酸分子。从具有标记分子的样本探针发射的荧光信号很弱，但是必须以高精度和特异性检测信号。因此，这种处理需要精确的光学设备，特别是照相机和扫描技术。另外，为了例如在FASTQ中获得精确且可靠的测序结果，大规模评估由测序设备的光学成像系统捕获的数字图像是必须的。在测序设备中，测序设备的流动池或所述测序设备的流动池的一部分的数字图像极度依赖于用于捕获数字图像的光学成像系统的特性。此外，当被配置为接收分子的至少一个对象是所谓的珠粒时，所述珠粒被配置为在其表面接收DNA或RNA，数字图像中的球形珠粒和正方形像素显示不同的形状并且珠粒的强度(intensity)必须根据一个或多个像素的亮度来公式化。此外，在光学成像系统中例如由光晕效应所引起的轻微失真效应进一步强化了确定共同表示特定珠粒的像素集的整体亮度的需要。此外，除必须考虑的球形珠粒和图像像素具有不同的形状的事实之外，各自像素的强度提取还必须补偿图像对准处理的轻微不准确性，所述图像对准处理是子像素精确珠粒位置和相应的荧光图像的对准。本专利技术的目的是提供用于确定数字图像中至少一个对象的整体亮度的方法和系统，特别是数字图像中至少一个对象的整体亮度，其中所述至少一个对象被配置为接收包括遗传信息的分子。本专利技术的方法是计算机实现的。然而，技术人员应当理解还存在其它方式来实现本专利技术的方法。此目的由独立权利要求的方法和系统实现。从属专利权利要求涉及优选实施方式。本专利技术涉及一种用于确定数字图像中至少一个对象的整体亮度的方法。所述至少一个对象被配置为接收包括遗传信息的分子。所述方法包括产生包含k个样本点的区域A的步骤，所述k个点依照预定分布在区域A中分布。所述方法进一步包括将区域A的中心位置对准到数字图像中至少一个对象的中心位置的步骤。所述方法进一步包括提取在k个样本点的每个样本点处的强度值的步骤。所述方法进一步包括计算在各自k个样本点处提取的强度值的中心趋势的步骤。优选地，依照上面给出的次序来执行本专利技术方法的上述步骤。优选地，将区域A的中心位置对准到数字图像中至少一个对象的中心位置的步骤通过仿射变换执行，更优选地借助线性变换即平移来执行。优选地，所述至少一个对象是优选被配置为接收DNA和/或RNA的珠粒。优选地，产生的区域A具有数字图像中至少一个对象的形状。例如，如果至少一个对象例如具有现实生活中立方体的形状，即采用3D形状，那么它在数字图像中具有矩形形状，即用其2D表示。因此，产生的区域A优选还具有矩形形状。优选地，区域A具有数字图像中至少一个对象的尺寸乘以系数s1。优选地，至少一个对象的尺寸是数字图像中至少一个对象的区域的尺寸。优选地，所述至少一个对象具有数字图像中直径为d1的第一盘片的形状。优选地，d1是2.8像素。优选地，产生的区域A具有直径为d2的第二盘片的形状。优选地，d2是3像素。优选地，如果所述至少一个对象具有数字图像中直径为d1的第一盘片的形状，那么产生的区域A具有第二盘片的形状。优选地，d1＝d2。例如，如果所述至少一个对象具有现实生活中的球形，即3D形状，那么它具有数字图像中第一盘片的形状，即用其2D表示。因此，产生的区域A优选也具有所述盘片即第二盘片的形状。优选地，样本点k的数目小于或等于30，优选k≤30，优选k＝27。然而技术人员应当理解样本点k的数目不限于30或更少。优选地，预定的分布是蓝噪声。例如在参考文献[1]、[2]或[3]中给出了蓝噪声的实例。优选地，使用泊松盘片采样(Poissondisksampling)来产生k个样本点。在参考文献[1]中示出了泊松盘片采样的实例。优选地，使用在k个样本点的每个样本点的子像素位置处的强度值的双线性内插来提取在所述k个样本点的每个样本点处的数字图像的强度值。优选地，通过计算各自k个样本点的提取的强度值的中位值来计算各自k个样本点的提取的强度值的中心趋势。优选地，所述至少一个对象被配置为携带荧光化合物。优选地，在荧光化合物发射电磁辐射期间由光学成像系统获得数字图像。作为可替选方式，数字图像还可以由光学成像系统在反射照明期间，优选在反射白光照明期间获得。本专利技术还涉及一种包括一个或多个计算机可读介质的计算机程序产品，所述介质具有用于执行前述权利要求之一的方法的步骤的计算机可执行指令。本专利技术还涉及一种用于确定数字图像中对象的整体亮度的系统。优选地，所述至少一个对象被配置为接收包括本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于确定数字图像中至少一个对象的整体亮度的方法，所述至少一个对象被配置为接收包括遗传信息的分子，所述方法包括以下步骤：产生包括k个样本点的区域A，所述k个点依照预定分布在区域A中分布；将区域A的中心位置对准到数字图像中至少一个对象的中心位置；提取在k个样本点的每个样本点处的强度值；并且计算在各自k个样本点处提取的强度值的中心趋势。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.12.10 EP 15199404.31.一种用于确定数字图像中至少一个对象的整体亮度的方法，所述至少一个对象被配置为接收包括遗传信息的分子，所述方法包括以下步骤：产生包括k个样本点的区域A，所述k个点依照预定分布在区域A中分布；将区域A的中心位置对准到数字图像中至少一个对象的中心位置；提取在k个样本点的每个样本点处的强度值；并且计算在各自k个样本点处提取的强度值的中心趋势。2.权利要求1的方法，其中所述区域A具有数字图像中至少一个对象的形状。3.权利要求1或2的方法，其中所述区域A具有数字图像中至少一个对象的尺寸乘以系数s1。4.权利要求1到3任一项的方法，其中所述至少一个对象是优选被配置为接收DNA和/或RNA的珠粒。5.权利要求1到4任一项的方法，其中所述至少一个对象具有数字图像中直径为d1的第一盘片的形状，优选d1＝2.8像素。6.权利要求1到5的方法，其中所述区域A具有直径为d2的第二盘片的形状，优选d2＝3像素。7.权利要求1到6任一项的方法，其中k≤30，优选k＝27。8.权利要求1到7...

【专利技术属性】
技术研发人员：迈科·洛赫尔，比约恩·拉比茨克，托斯滕·泽尔法斯，
申请(专利权)人：凯杰有限公司，
类型：发明
国别省市：德国,DE