一种石杉碱甲的提取方法技术

本发明专利技术属于植物提取技术领域，涉及一种石杉碱甲的提取方法，包括以下步骤：（1）破壁提取：千层塔超微粉碎后，酸液浸润，通过气、液、固三相流超高压压力和超音速射流撞击后，再加入酸液继续加热搅拌，得酸液混合物，（2）分离：取酸液混合物离心，离心后得到上清液和沉淀物，分别取上清液和沉淀物加入碱性乙醇浸泡搅拌，合并得到混合液；（3）萃取：混合液通过浓缩，加入乙酸乙酯反复萃取收集萃取液；（4）纯化：萃取液浓缩，纯化后得到成品。本发明专利技术通过气、液、固三相流超高压压力和超音速射流撞击，大大提高了细胞破壁率，进一步提纯，能够提高石杉碱甲有效成分的提取，同时石杉碱甲的收率和纯度更高。

【技术实现步骤摘要】
一种石杉碱甲的提取方法
本专利技术属于植物提取
，更具体地，本专利技术涉及一种石杉碱甲的提取方法。
技术介绍
石杉碱甲是具有低毒、高效、可逆和高选择性等优点的乙酰胆碱酯酶抑制剂，对于治疗重症肌无力、中老年痴呆及提高记忆力具有良好的疗效，并对抑制有机磷酸中毒有一定的作用。由于其独特的药用价值，石杉碱甲正日益受到国内外市场的广泛重视。传统的石杉碱甲提取方法有稀酸反复萃取法、盐酸渗流、回流提取、硅胶柱层析等，这些方法缺点是收率不高，纯度不高。
技术实现思路
本专利技术针对于已有的石杉碱甲的制备方法收率不高，纯度不高等问题，提供了一种石杉碱甲的提取方法。本专利技术的技术方案是：一种石杉碱甲的提取方法，包括以下工艺步骤：（1）破壁提取：将千层塔清洗，烘干，超微粉碎后，加入相当于千层塔1-2倍质量的0.8-1%酸液润湿，浸润时长1~2小时，然后通过气、液、固三相流超高压压力和超音速射流撞击，压力条件为400-500Mpa，持压时间为10-20min，得混合物，混合物中加入5-6倍质量的0.8-1%酸液加热搅拌，加热温度为50-80℃，时间为1-3小时，得酸液混合物；（2）分离：将步骤（1）中所得酸液混合物离心，离心后得到上清液和沉淀物，上清液和沉淀物分别加入碱性乙醇浸泡，其中，上清液与碱性乙醇的体积比为1：（5~6），浸泡30-45min，得浸泡液；沉淀物与碱性乙醇的体积比为1：（1~3），搅拌浸泡30-45min，再离心，得到离心液，合并离心液与浸泡液，得混合液；（3）萃取：将步骤（2）中混合液浓缩，加入4-5倍的乙酸乙酯反复萃取4-5次，收集萃取液；（4）纯化：将步骤（3）所得萃取液浓缩，直至蒸干，得到干粉，加入有机溶剂使其溶解，结晶后干燥，得到石杉碱甲纯品。优选地，所述步骤（1）千层塔烘干温度为50-60℃。千层塔烘干温度为50-60℃，水分含量在小于等于5%，烘干后的千层塔有利于下一步粉碎工艺的操作，且水分小于等于5%，更好保护千层塔活性物质的活性。优选地，所述步骤（1）千层塔超微粉碎的目数大于等于400目烘干后的千层塔，经过普通粉碎使目数大于等于100目，再进行超微粉碎，目数大于等于400目，使细胞破壁，更有利于有效物质溶出。优选地，所述步骤（1）气、液、固三相流液态压力为500Mpa。酸液浸泡加热搅拌后的千层塔酸液混合物，在气、液、固三相500Mpa流液态压力下配合超音速射流撞击装置破壁，使石杉碱甲破壁率大大的提升。撞击流方法采用特殊的流动结构，即3股很靠近的等量气-液-固3相流沿同轴相向流动、并在中点处撞击，其基本原理是使混有固体物料在高压流体通过喷嘴加速，形成高速射流带动其中的固体颗粒作高速运动，然后与靶板(超硬材料,如金刚石或宝石)或相反方向的另一股射流形成高速强烈撞击，射流碰撞的结果导致产生一个狭窄的高压、高速湍流区，在此区域内相间或颗粒之间的碰撞、摩擦产生的挤压力和剪切力使流体中的固体物料被细化。优选地，所述步骤（1）酸液为硫酸、盐酸、磷酸、冰醋酸、酒石酸或柠檬酸中的一种或几种。优选地，所述步骤（2）离心的转速10000-30000r/min。优选地，所述步骤（2）碱性乙醇的pH值为8～10，调节pH值碱为氢氧化钠、氨水、氢氧化钾、碳酸氢钠或碳酸钠中的一种或几种。优选地，所述步骤（2）碱性乙醇的体积浓度为40-50%。优选地，所述步骤（4）有机溶剂为乙酸，丙酮，丁醇，氯仿，或甲醇的一种。相对于现有技术，本专利技术具有如下的优点及效果：千层塔经细胞破壁提取，进一步分离，纯化，获得的石杉碱甲收率、纯度都可提高，经HPLC检测，含量在99％以上，收率90％以上。具体实施方式以下结合具体实施例来进一步说明本专利技术，但实施例并不对本专利技术做任何形式的限定。除非特别说明，本专利技术采用的试剂、方法和设备为本
常规试剂、方法和设备。实施例1（1）破壁提取：称取10Kg千层塔清洗，温度为55℃烘干，使千层塔水分小于等于5%，经过普通粉碎使目数大于等于100目，再进行超微粉碎，超微粉碎后目数大于等于400目，加入相当于原料1.5倍质量的1%硫酸润湿，浸润时长1.5小时，通过气、液、固三相流超高压压力和超音速射流撞击，压力条件为450Mpa，持压时间为15min，得混合物，将上述混合物取出，加入6倍质量的1%硫酸加热搅拌，加热温度为65℃，时间为2小时，得酸液混合物，其中0.9%硫酸溶液为质量分数38%浓硫酸配置而成。（2）分离：将步骤（1）中所得酸液混合物离心，离心的转速为20000r/min，离心后得到上清液和沉淀物，上清液和沉淀物分别加入碱性乙醇浸泡，其中，上清液与碱性乙醇的体积比为1：6，浸泡40min，得浸泡液；沉淀物与碱性乙醇的体积比为1：2，搅拌浸泡40min，再离心，离心的转速为20000r/min，得到离心液，合并离心液与浸泡液，得混合液，其中，碱性乙醇的体积浓度为50%，碱性乙醇pH值为9，调节pH值碱为氢氧化钠。（3）萃取：将步骤（2）中混合液通过浓缩至膏状物，加入5倍的乙酸乙酯反复萃取5次，收集萃取液。（4）纯化：将步骤（3）所得萃取液浓缩，直至蒸干，得到干粉，加入1L乙酸使其溶解，进行结晶，再结晶后干燥，得到石杉碱甲纯品。经HPLC检测，含量在99.5％，收率91.2％。实施例2（1）破壁提取：称取10Kg千层塔清洗，温度为50℃烘干，使千层塔水分小于等于5%，经过普通粉碎使目数大于等于100目，再进行超微粉碎，超微粉碎后目数大于等于400目，加入相当于原料1.5倍质量的1%硫酸润湿，浸润时长1小时，通过气、液、固三相流超高压压力和超音速射流撞击，压力条件为400Mpa，持压时间为10mins，得混合物，将上述混合物取出，加入5倍质量的1%硫酸加热搅拌，加热温度为50℃，时间为1小时，得酸液混合物，其中0.8%硫酸溶液为质量分数38%浓硫酸配置而成。（2）分离：将步骤（1）中所得酸液混合物离心，离心的转速为10000r/min，离心后得到上清液和沉淀物，上清液和沉淀物分别加入碱性乙醇浸泡，其中，上清液与碱性乙醇的体积比为1：5，浸泡30min，得浸泡液；沉淀物与碱性乙醇的体积比为1：1，搅拌浸泡30min，再离心，离心的转速为10000r/min，得到离心液，合并离心液与浸泡液，得混合液，其中，碱性乙醇的体积浓度为40%，碱性乙醇pH值为8，调节pH值碱为氢氧化钠。（3）萃取：将步骤（2）中混合液通过浓缩至膏状物，加入4倍的乙酸乙酯反复萃取4次，收集萃取液。（4）纯化：将步骤（3）所得萃取液浓缩，直至蒸干，得到干粉，加入1L乙酸使其溶解，进行结晶，再结晶后干燥，得到石杉碱甲纯品。经HPLC检测，含量在99.2％，收率91.8％。实施例3（1）破壁提取：称取10Kg千层塔清洗，温度为60℃烘干，使千层塔水分小于等于5%，经过普通粉碎使目数大于等于100目，再进行超微粉碎，超微粉碎后目数大于等于400目，加入相当于原料2倍质量的1%硫酸润湿，浸润时长2小时，通过气、液、固三相流超高压压力和超音速射流撞击，压力条件为500Mpa，持压时间为15min，得混合物，将上述混合物取出，加入5倍质量的1%硫酸加热搅拌，加热温度为80℃，时间为3小时，得酸液混合物，其中1%硫酸溶液为质量分数98%浓硫酸配置本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种石杉碱甲的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）破壁提取：将千层塔清洗，烘干，超微粉碎后，加入相当于千层塔1‑2倍质量的0.8‑1%酸液润湿，浸润时长1~2小时，然后通过气、液、固三相流超高压压力和超音速射流撞击，压力条件为400‑500Mpa，持压时间为10‑20min，得混合物，混合物中加入5‑6倍质量的0.8‑1%酸液加热搅拌，加热温度为50‑80℃，时间为1‑3小时，得酸液混合物；（2）分离：将步骤（1）中所得酸液混合物离心，离心后得到上清液和沉淀物，上清液和沉淀物分别加入碱性乙醇浸泡，其中，上清液与碱性乙醇的体积比为1：（5~6），浸泡30‑45min，得浸泡液；沉淀物与碱性乙醇的体积比为1：（1~3），搅拌浸泡30‑45min，再离心，得到离心液，合并离心液与浸泡液，得混合液；（3）萃取：将步骤（2）中混合液浓缩，加入4‑5倍的乙酸乙酯反复萃取4‑5次，收集萃取液；（4）纯化：将步骤（3）所得萃取液浓缩，直至蒸干，得到干粉，加入有机溶剂使其溶解，结晶后干燥，得到石杉碱甲纯品。

【技术特征摘要】
1.一种石杉碱甲的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）破壁提取：将千层塔清洗，烘干，超微粉碎后，加入相当于千层塔1-2倍质量的0.8-1%酸液润湿，浸润时长1~2小时，然后通过气、液、固三相流超高压压力和超音速射流撞击，压力条件为400-500Mpa，持压时间为10-20min，得混合物，混合物中加入5-6倍质量的0.8-1%酸液加热搅拌，加热温度为50-80℃，时间为1-3小时，得酸液混合物；（2）分离：将步骤（1）中所得酸液混合物离心，离心后得到上清液和沉淀物，上清液和沉淀物分别加入碱性乙醇浸泡，其中，上清液与碱性乙醇的体积比为1：（5~6），浸泡30-45min，得浸泡液；沉淀物与碱性乙醇的体积比为1：（1~3），搅拌浸泡30-45min，再离心，得到离心液，合并离心液与浸泡液，得混合液；（3）萃取：将步骤（2）中混合液浓缩，加入4-5倍的乙酸乙酯反复萃取4-5次，收集萃取液；（4）纯化：将步骤（3）所得萃取液浓缩，直至蒸干，得到干粉，加入有机溶剂使其溶解，结晶后干燥，得到石杉碱甲纯品。2.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵勇彪，李佳莲，危志刚，赵勇志，
申请(专利权)人：湖南中茂生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南,43