一种检测鸭坦布苏病毒E蛋白抗体的胶体金检测卡制造技术

技术编号:19852495 阅读:44 留言:0更新日期:2018-12-22 10:14
本发明专利技术公开了一种检测鸭坦布苏病毒E蛋白抗体检测卡及其制备方法。采用双抗原夹心法的原理,基于胶体金免疫层析技术而制成,该胶体金检测卡包括加样孔、观测窗、样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸收垫、PVC底板,在所述金标垫上结合有金标E蛋白和金标羊抗鼠IgG,硝酸纤维素膜上有一条含有鸭坦布苏病毒E蛋白的检测线(T线)和另一条含有鼠IgG的质控线(C线)。本发明专利技术用于检测鸭坦布苏病毒感染情况及鸭坦布苏病毒流行情况的监测,相比现有的检测方法,价格低廉,简便快捷,结果判断直观,灵敏准确,可有效避免钩状效应,同时保证假阳性被剔除而弱阳性不漏检,更便于现场检测。

【技术实现步骤摘要】
一种检测鸭坦布苏病毒E蛋白抗体的胶体金检测卡
本专利技术涉及兽医生物
,具体涉及一种检测鸭坦布苏病毒E蛋白抗体的胶体金检测卡。
技术介绍
2010年以来,我国多数水禽养殖区的鸭群陆续感染了鸭坦布苏病毒(duckTembusuvirus,DTMUV)。DTMUV是我国首次发现对鸭致病的新型黄病毒,在此之前,尚未有黄病毒大规模感染鸭的报道。DTMUV的感染可引起雏鸭死亡、肉鸭生长迟缓、蛋鸭产蛋下降甚至停产,且多数病鸭伴有脑炎样神经症状;剖检感染鸭,可见卵巢出血、充血,卵泡破裂萎缩,脑组织病变、水肿等特征,因此,DTMUV感染引起的疾病又称“鸭黄病毒病”、“鸭出血性卵巢炎”或“鸭产蛋下降-死亡综合征”等。该病原传播迅速,呈现出全国流行趋势,目前我国华东、华中和华北等地区均已分离得到该病原;易感对象广,可感染北京鸭、樱桃谷鸭、绍兴鸭等我国的主要养殖品种,发病率高达100%,死亡率在5%~30%之间,淘汰率为10~80%,给我国养鸭业造成了重大经济损失。目前,对于DTMUV病原的检测方法主要有病毒分离鉴定和分子生物学检测。病毒分离鉴定是最传统的病原学诊断方法,DTMUV可从病死鸭的卵泡膜本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测鸭坦布苏病毒E蛋白抗体检测卡,包括外壳(1)和置于外壳内的试纸条(2),所述外壳(1)上开有观测窗(11)和加样孔(12);所述试纸条(2)由样品垫(21)、金标垫(22)、硝酸纤维素膜(23)、吸收垫(24)顺次搭接粘贴在PVC底板(25)上构成,确保接头处有叠压,使层析能顺利进行;其中所述金标垫(22)上结合有金标E蛋白和金标羊抗鼠IgG,所述硝酸纤维素膜上有一条含有鸭坦布苏病毒E蛋白的T线(26)和另一条含有鼠IgG的C线(27);包括以下步骤:(1)金标羊鼠IgG的制备:将羊抗鼠IgG加入胶体金溶液中,用0.1mol/L的K2CO3溶液调节pH值至6.7;(2)金标E蛋白的...

【技术特征摘要】
1.一种检测鸭坦布苏病毒E蛋白抗体检测卡,包括外壳(1)和置于外壳内的试纸条(2),所述外壳(1)上开有观测窗(11)和加样孔(12);所述试纸条(2)由样品垫(21)、金标垫(22)、硝酸纤维素膜(23)、吸收垫(24)顺次搭接粘贴在PVC底板(25)上构成,确保接头处有叠压,使层析能顺利进行;其中所述金标垫(22)上结合有金标E蛋白和金标羊抗鼠IgG,所述硝酸纤维素膜上有一条含有鸭坦布苏病毒E蛋白的T线(26)和另一条含有鼠IgG的C线(27);包括以下步骤:(1)金标羊鼠IgG的制备:将羊抗鼠IgG加入胶体金溶液中,用0.1mol/L的K2CO3溶液调节pH值至6.7;(2)金标E蛋白的制备:将E蛋白加入胶体金溶液中,用0.1mol/L的K2CO3溶液调节pH值至6.8;(3)硝酸纤维素膜的制备:用E蛋白和鼠IgG分别在层析膜上划线(0.9-1.1mm)作为T线和C线,T线和C线间距约为7mm,冻干并4℃保存;(4)胶体金溶液的制备:在超纯水中加入1%氯金酸,加热煮沸,迅速加入1%柠檬酸三钠,继续煮沸15分钟,所述超纯水、氯金酸、柠檬酸三钠的体积比为99:1:1,冷却后用超纯水恢复至原来的体积,4℃保存备用;(5)金标垫的制备:免疫胶体金...

【专利技术属性】
技术研发人员:贾仁勇邓杰刘艳红程安春汪铭书陈舜朱德康刘马锋孙昆峰
申请(专利权)人:四川农业大学
类型:发明
国别省市:四川,51

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