一种木耳栽培原种的培养方法技术

本发明专利技术属于真菌种植技术领域，尤其涉及一种木耳栽培原种的培养方法，在原种培养周期内，菌丝需要先利用已有碳水化合物分泌各种酶来酶解纤维素、木质素等，将营养物质分解成为碳水化合物加以吸收，而通过在培养基质中加入纤维素、木质素、过氧化物酶混合液后进行发酵的方法，在培养基中先分解出大量利于菌丝吸收的物质，加快了菌丝的成长速度，缩短了培养的时间，也使培养基分解更完全，提高了培养的效果，通过超声、高温灭菌处理和加入由孟加拉红和链霉素组成的抑菌液，超声、高温处理能够充分杀灭培养基质内部的细菌，孟加拉红和链霉素是细菌和放线菌的抑制剂，对木耳真菌并无抑制作用，从而降低了培养基被细菌感染的可能，提高了培养基的效率。

【技术实现步骤摘要】
一种木耳栽培原种的培养方法
本专利技术属于真菌种植
，尤其涉及一种木耳栽培原种的培养方法。
技术介绍
木耳，别名黑木耳、光木耳。黑木耳属于腐生性中温型真菌，菌丝在6～36℃之间均可生长，但以22～32℃最适宜；15～27℃都可分化出子实体，但以20～24℃最适宜，菌丝在含水量60％～70％的栽培料及段木中均可生长，并且可在黑暗中正常生长；子实体形成时要求耳木含水量达70％以上，空气相对湿度90％～95％。子实体生长期需250～1000Lx的光照强度，为好气性真菌，pH值5～5.6最适宜，子实生长温度在10～32℃之间，最佳温度是12～25℃，目前黑木耳人工栽培方法包括段木栽培和塑料袋代料栽培。黑木耳是一种腐生真菌，它没有叶绿素，自己不会制造食物，它要依靠其他生物体里的有机物质作为它的养料，黑木耳生长对养分的要求以碳水化合物和含氮物质为主，还需要少量的无机盐类。在纯培养时，黑木耳的菌丝利用各种碳源，如葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、淀粉和纤维素。木材中的营养成分只有处在溶解于水的状态下，才能被木耳菌丝吸收。通常营养菌丝先利用可给状态的碳水化合物，同时把大量的酶分泌到周围的基质中。营养菌丝中各种酶的含量(过氧化物酶除外)比子实体或结实性菌丝多得多。纤维素酶和半纤维素酶把复杂的纤维素和半纤维素分解为可溶性的糖。木质素是通过氧化物酶来分解的。这样木材中的碳水化合物就可以不断地分解，不断满足黑木耳营养菌丝的需要。当前的木耳原种培养方法，主要采用常规培养基高温高压杀菌之后进行培养，培养时间在30～40d，并且在培养过程中，菌丝有很多可能因为感染细菌而死亡。如何缩短菌丝原种的培养时间，提高菌丝培养的存活率是一个需要考虑的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种木耳栽培原种的培养方法，该方法通过在培养基中添加酶混合液进行发酵，超声、高温高压、添加抑菌剂进行灭菌的方法，缩短了菌丝培养的时间，提高了菌丝培养的质量。该一种木耳栽培原种的培养方法包括如下步骤：1)母种活化：取磷酸二氢钾、硫酸镁、蛋白胨、葡萄糖、琼脂、水混合均匀，加热融化后冷却至常温，加入抗生素，作为母种培养基，母种培养基在温度120～130℃，压力0.2MPa下灭菌2～4h，冷却至常温，无菌操作下将黑木耳菌种接种到培养基中，进行活化；2)原种培养基制备：取杨树木屑、玉米皮、米粉，加马铃薯汤、加水混合均匀，以手捏刚好不出水为止；3)酶解：混合料加纤维素酶、半纤维素酶、过氧化物酶混合制成的酶解液进行酶解；4)发酵：混合料酶解完成之后，加盖薄膜发酵，发酵完成之后进行超声处理；5)灭菌：将超声处理完成的混合料装入栽培袋内，在温度为120～150℃，压力0.8～1MPa条件下灭菌4～5h，灭菌后冷却至常温；6)接种：在无菌条件下将活化母种接种到栽培袋内，喷洒抑菌液；7)培养：接种好的栽培袋在25℃、恒温、弱光环境条件下培养20～25d，得到黑木耳原种。优选的，步骤1)中，磷酸二氢钾为1～2份、硝酸镁为0.5～1份、蛋白胨为5～8份、葡萄糖为10～15份、琼脂为20～25份、水为1000份、抗生素为0.5～2份，活化室温度23～25℃，活化时间8～10d。优选的，步骤2)中，杨树木屑为70～80份、玉米皮为10～15份、米粉为20～25份、马铃薯为8～10份、水为1000份，湿度在60～65％。优选的，步骤3)中，纤维素酶为3～5份、半纤维素酶为1～2份、过氧化物酶为4～6份，酶解时间为30～40min。优选的，步骤4)中，发酵温度为30～35℃，发酵时间为2～3h，超声功率为150～200W，频率为100～150kHz，超声时间在1～2h。优选的，步骤6)中，抑菌液为孟加拉红3～5份、链霉素0.5～0.8份、水1000份混合而成，喷洒量为每栽培袋10～15ml。有益效果1、本专利技术一种木耳栽培原种的制备方法，在原种培养周期内，菌丝需要先利用已有碳水化合物分泌各种酶来酶解纤维素、木质素等，将营养物质分解成为碳水化合物加以吸收，而通过在培养基质中加入纤维素、木质素、过氧化物酶混合液后进行发酵的方法，在培养基中先分解出大量利于菌丝吸收的物质，加快了菌丝的成长速度，缩短了培养的时间，也使培养基分解更完全，提高了培养的效果。2、本专利技术一种木耳栽培原种的制备方法，通过超声、高温灭菌处理和加入由孟加拉红和链霉素组成的抑菌液，超声和高温处理能够充分杀灭培养基质内部的细菌，孟加拉红和链霉素是细菌和放线菌的抑制剂，对木耳真菌并无抑制作用，从而降低了培养基被细菌感染的可能，提高了培养基的效率。具体实施方式下面结合具体实施方式对本专利技术进一步作详细的说明，但本专利技术提供的技术方案不仅包括实施例中展现的内容。实施例1本实施例提供了一种木耳栽培原种的制备方法，具体过程如下：1、母种活化：取磷酸二氢钾1份、硝酸镁0.5份、蛋白胨5份、葡萄糖10份、琼脂20份、水1000份混合均匀，加热融化后冷却至常温，加入0.5份抗生素，作为母种培养基，母种培养基在温度120℃，压力0.2MPa下灭菌2h，冷却至常温，无菌操作下将黑木耳菌种接种到培养基中，进行活化，抗生素为0.5份，活化室温度23℃，活化时间8d；2、原种培养基制备：取杨树木屑70份、玉米皮10份、米粉20份，加马铃薯8份熬制的马铃薯汤、加水混合均匀，以手捏刚好不出水为止，湿度在60％；3、酶解：混合料加纤维素酶3份、半纤维素酶1份、过氧化物酶4份制备的酶解液进行酶解，酶解时间为30min；4、发酵：混合料酶解完成之后，加盖薄膜发酵，发酵温度为30℃，时间2h，发酵完成之后进行超声处理，超声功率为150W，频率为100kHz，超声时间1h；5、灭菌：将超声处理完成的混合料装入栽培袋内，在温度为120℃，压力0.8MPa条件下灭菌4h，灭菌后冷却至常温；6、接种：在无菌条件下将活化母种接种到栽培袋内，喷洒孟加拉红3份、链霉素0.5份、水1000份混合而成的抑菌液，每栽培袋喷洒10ml；7、培养：接种好的栽培袋在25℃、恒温、弱光环境条件下培养20d，得到黑木耳原种。实施例2本实施例提供了一种木耳栽培原种的制备方法，具体过程如下：1、母种活化：取磷酸二氢钾1.5份、硝酸镁0.8份、蛋白胨6份、葡萄糖13份、琼脂23份、水1000份混合均匀，加热融化后冷却至常温，加入1.2份抗生素，作为母种培养基，母种培养基在温度125℃，压力0.2MPa下灭菌3h，冷却至常温，无菌操作下将黑木耳菌种接种到培养基中，进行活化，抗生素为1份，活化室温度24℃，活化时间9d；2、原种培养基制备：取杨树木屑75份、玉米皮13份、米粉23份，加马铃薯9份熬制的马铃薯汤、加水混合均匀，以手捏刚好不出水为止，湿度在63％；3、酶解：混合料加纤维素酶4份、半纤维素酶1.5份、过氧化物酶5份制备的酶解液进行酶解，酶解时间为35min；4、发酵：混合料酶解完成之后，加盖薄膜发酵，发酵温度为33℃，时间2.5h，发酵完成之后进行超声处理，超声功率为175W，频率为125kHz，超声时间1.5h；5、灭菌：将超声处理完成的混合料装入栽培袋内，在温度为135℃，压力0.9MPa条件下灭菌4.5h，灭菌后冷却至常温；6、接种：在无菌条件下将活化母种接种到栽培袋内，喷洒孟加拉红4份、链霉素0.7本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种木耳栽培原种的培养方法，其特征在于，培养方法包括如下步骤：1)母种活化：取磷酸二氢钾、硫酸镁、蛋白胨、葡萄糖、琼脂、水混合均匀，加热融化后冷却至常温，加入抗生素，作为母种培养基，母种培养基在温度120～130℃，压力0.2MPa下灭菌2～4h，冷却至常温，无菌操作下将黑木耳菌种接种到培养基中，进行活化；2)原种培养基制备：取杨树木屑、玉米皮、米粉，加马铃薯汤、加水混合均匀，以手捏刚好不出水为止；3)酶解：混合料加纤维素酶、半纤维素酶、过氧化物酶混合制成的酶解液进行酶解；4)发酵：混合料酶解完成之后，加盖薄膜发酵，发酵完成之后进行超声处理；5)灭菌：将超声处理完成的混合料装入栽培袋内，在温度为120～150℃，压力0.8～1MPa条件下灭菌4～5h，灭菌后冷却至常温；6)接种：在无菌条件下将活化母种接种到栽培袋内，喷洒抑菌液；7)培养：接种好的栽培袋在25℃、恒温、弱光环境条件下培养20～25d，得到黑木耳原种。

【技术特征摘要】
1.一种木耳栽培原种的培养方法，其特征在于，培养方法包括如下步骤：1)母种活化：取磷酸二氢钾、硫酸镁、蛋白胨、葡萄糖、琼脂、水混合均匀，加热融化后冷却至常温，加入抗生素，作为母种培养基，母种培养基在温度120～130℃，压力0.2MPa下灭菌2～4h，冷却至常温，无菌操作下将黑木耳菌种接种到培养基中，进行活化；2)原种培养基制备：取杨树木屑、玉米皮、米粉，加马铃薯汤、加水混合均匀，以手捏刚好不出水为止；3)酶解：混合料加纤维素酶、半纤维素酶、过氧化物酶混合制成的酶解液进行酶解；4)发酵：混合料酶解完成之后，加盖薄膜发酵，发酵完成之后进行超声处理；5)灭菌：将超声处理完成的混合料装入栽培袋内，在温度为120～150℃，压力0.8～1MPa条件下灭菌4～5h，灭菌后冷却至常温；6)接种：在无菌条件下将活化母种接种到栽培袋内，喷洒抑菌液；7)培养：接种好的栽培袋在25℃、恒温、弱光环境条件下培养20～25d，得到黑木耳原种。2.如权利要求1所述的一种木耳栽培原种的培养方法，其特征在于，步骤1)所述磷酸二氢...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴应凯，
申请(专利权)人：望谟县郊纳八步农业综合投资开发有限公司，
类型：发明
国别省市：贵州,52