HBV-DNA检测单克隆质控参考株的制备制造技术

一种用于医学领域的HBV‑DNA检测单克隆质控参考株的制备，其特征在于，取经手术切除的小块HBVDNA阳性肝肿瘤组织，剪成粥样，以0.25％胰蛋白酶和II型胶原酶混合消化已剪成粥样的肝脏组织细胞30分钟，再进行融合前培养，并在融合前培养、肝细胞与sp2/0融合及融合细胞克隆筛选中均使用SV40LT培养基，从而提高了细胞融合率，制成能通过培养融合细胞而扩增HBV‑DNA的质控参考株。

【技术实现步骤摘要】
HBV-DNA检测单克隆质控参考株的制备
本专利技术涉及医学领域一种HBV-DNA检测单克隆质控参考株的制备，主要用于乙肝病毒DNA检测的室内质量控制、室间质量评价及检测系统校准。
技术介绍
目前乙型肝炎的诊断和疗效观察除了常规的肝脏功能评价和血清标志物检测外，主要依靠血清HBV-DNA的PCR定量检测。PCR检测HBV-DNA的影响因素多，为保证检测结果的准确性，每次检测必须同时以质控物进行验证，借助质控物检测结果与其原预定值限的比较，确定病例样本检测结果的可靠性。但现在使用的PCR检测质控物价格昂贵，使用周期短，加之有些PCR检测试剂盒并未提供定值质控品，为此，有必要研制理想的PCR检测质控物。理想质控物的制备条件是：质控物基质与被测样本一致，质控物浓度接近诊断的决定性水平；单批可大量制备获取且稳定性好、靶值或预期结果已定；无已知的生物传染危险性。所以要研制质控物首先要解决的是与被测物同源样本的获取及其批量制备的问题。对于研制PCR检测HBV-DNA的质控物而言，关键是要设计能通过无限扩增HBV-DNA阳性肝细胞而无限扩增HBV-DNA的方法。申请人发现Bodnar等曾报道用端粒本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种HBV‑DNA检测单克隆质控参考株的制备，其特征在于，以0.25％胰蛋白酶和II型胶原酶混合消化已剪成粥样的肝脏组织细胞30分钟再进行融合前培养，并在融合前培养、肝细胞与sp2/0融合及融合细胞克隆筛选中均使用SV40LT培养基，从而提高了细胞融合率，制成能通过培养融合细胞而扩增HBV‑DNA的质控参考株。

【技术特征摘要】
1.一种HBV-DNA检测单克隆质控参考株的制备，其特征在于，以0.25％胰蛋白酶和II型胶原酶混合消化已剪成粥样的肝脏组织细胞30分钟再进行融合前培养，并在融合前培养、肝细胞与sp2/0融合及融合细胞克隆筛选中均使用SV40LT培养基，从而提高了细胞融合率，制成能通过培养融合细胞而扩增HBV-DNA的质控参考株。2.根据权利要求1所述的HBV-DNA检测...

【专利技术属性】
技术研发人员：翁炳焕，李兰娟，苏岚，杨含金，杜雨轩，王薇，
申请(专利权)人：翁炳焕，
类型：发明
国别省市：浙江,33