一种骨桥蛋白特征肽及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种骨桥蛋白特征肽及其应用，该特征肽的氨基酸序列为GDSVAYGLK。本发明专利技术通过筛选骨桥蛋白的特征肽，获取该特征肽相应的内标肽，并利用高效液相色谱与质谱联用的分析技术，实现了骨桥蛋白的定量检测，该方法具有较好的线性、灵敏度、回收率和精密度。

【技术实现步骤摘要】
一种骨桥蛋白特征肽及其应用
本专利技术涉及食品检测
，尤其涉及一种骨桥蛋白特征肽及其应用。
技术介绍
骨桥蛋白(OPN)是一种高度磷酸化，并且带负电的非胶原性骨基质糖蛋白，约含300个氨基酸残基，其中天冬氨酸、丝氨酸和谷氨酸残基占有很高的比例，约占总氨基酸量的一半。骨桥蛋白(OPN)中含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)序列，该序列在不同物种的骨桥蛋白(OPN)中都普遍存在，对于骨桥蛋白(OPN)发挥粘附功能起着重要的作用。骨桥蛋白广泛分布于多种组织和细胞中，发挥着重要的作用：(1)骨桥蛋白(OPN)在对抗感染的非特异性免疫及自身免疫中起一定作用，有助于控制炎症反应的强度，调节组织修复的进程；(2)通过破坏晶体网阵而抑制草酸钙晶体的增长；(3)磷酸化的骨桥蛋白(OPN)能抑制钙矿化，促进骨细胞对钙离子的吸收；(4)骨桥蛋白(OPN)在血管重塑过程中起调节作用，能抑制动脉钙化的发生等等。申请公布号为CN104165913A的中国专利申请文献公开了一种检测骨桥蛋白的电化学传感器及其构建方法，该电化学传感器为三电极体系，其中，铂丝电极作为对电极、饱和甘汞电极作为参比电极、修饰后金电本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种骨桥蛋白特征肽，其特征在于，氨基酸序列为GDSVAYGLK。

【技术特征摘要】
1.一种骨桥蛋白特征肽，其特征在于，氨基酸序列为GDSVAYGLK。2.一种用于检测乳品中骨桥蛋白含量的内标肽，其特征在于，氨基酸序列为GDSV*AYGL*K。3.一种液质联用检测乳品中骨桥蛋白含量的试剂盒，其特征在于，包括骨桥蛋白特征肽和所述骨桥蛋白特征肽相对应的内标肽，所述骨桥蛋白特征肽的氨基酸序列为GDSVAYGLK；所述内标肽的氨基酸序列为GDSV*AYGL*K。4.如权利要求1所述的骨桥蛋白特征肽在检测乳品内骨桥蛋白含量中的应用。5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述乳品为奶牛、水牛、耗牛、山羊或绵羊的乳制品。6.一种液质联用检测乳品中骨桥蛋白含量的方法，其特征在于，采用方案A或方案B；方案A：(1)取待检测的样品，用水稀释，经变性处理、胰蛋白酶酶解处理后，再加入甲醛溶液进行二甲基化处理，得到预处理后的样品溶液；(2)取如权利要求1所述的骨桥蛋白特征肽的标准品，用水稀释，经变性处理和胰蛋白酶酶解处理后，再加入同位素标记的甲醛溶液进行二甲基化处理，得到骨桥蛋白的内标肽溶液；(3)将所述内标肽溶液加入至所述样品溶液中混合，得到待测样品；(4)对所述待测样品进行固相萃取，再采用高效液相色谱-质谱联用技术进行检测；(5)根据检测结果，计算待测样品中所述骨桥蛋白特征肽与其相对应的内标肽的峰面积比；(6)将所述峰面积比代入标准曲线中，计算得到待测样品中骨桥蛋白特征肽的浓度，最后计算得到样品中骨桥蛋白的含量。方案B：(a)取待检测的样品，用水稀释，加入如权利要求2所述的内标肽，经变性处理、胰蛋白酶酶解处理后，得到待测样品；(b)对所述待测样品进行固相萃取，再采用高效液相色谱-质谱联用技...

【专利技术属性】
技术研发人员：任一平，胡蓓，蒋易蓉，赖世云，
申请(专利权)人：杭州璞湃科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33