胆甾-3,6-二酮用于神经元损伤的治疗制造技术

本发明专利技术公开了胆甾‑3,6‑二酮、其氘代物或其药学上可接受的盐在制备治疗患者的神经元损伤的药物中的应用。本发明专利技术证实了胆甾‑3,6‑二酮能够减轻由谷氨酸引起的海马神经细胞氧化应激损伤、能够减轻钾剥夺引起的小脑颗粒神经元凋亡损伤、能够减轻谷氨酸引起的皮层神经元神经兴奋性损伤，从而能够用于治疗神经元损伤。

【技术实现步骤摘要】
胆甾-3,6-二酮用于神经元损伤的治疗
本专利技术涉及胆甾-3,6-二酮的医药新用途，具体涉及胆甾-3,6-二酮在神经元损伤治疗中的应用。
技术介绍
胆甾-3,6-二酮是一种胆固醇衍生物，已知的合成方法以胆固醇为原料，可通过多种合成方法获得（ZhangWeietal,2014；RMartinez-Pascualetal,2017；JGSCBuchananetal,1969）。原料价格低廉，合成简单方便，成药性良好。目前该化合物的活性研究主要有：(1)AKR1B10酶抑制剂作用；(2)抗细菌活性；(3)降低心率活性；(4)抗肿瘤活性(ZhangWeietal,2014；Zakariaetal,2011；ZhangZhaohuietal,1999;ShiDayongetal,2011)。迄今为止尚未有关于该化合物在神经保护领域的报道。目前未见该化合物授权专利的报道。此外，该化合物在平滑肌细胞上进行实验，发现没有细胞毒性(PengShikaung,1979)。可以预测，一旦开发成药，毒副作用相对较少。神经元保护剂的研发一直是临床和基础研究的重点，制备神经保护细胞模型上通常依据不同的目的选用不同的原代培养神经元损伤模型。HT-22细胞株是小鼠海马原代神经元经过改造而得，能表达胆碱能神经元标记物，具有与正常海马神经元相似的形态和生理功能、培养过程简单、可以传代等优点。谷氨酸诱导的HT-22细胞损伤包括细胞坏死、凋亡和死亡等，分子机制上存在多种解释(FukuiMetal,2009)，目前该模型是一种公认的神经元氧化应激损伤模型(BreyerAetal,2007)。同时，氧化应激损伤贯穿着脑卒中的缺血和再灌注全过程，氧化应激是研发多靶点神经保护剂重要靶点，该模型已被广泛用于抗氧化损伤神经保护剂研究。正常情况下神经元胞内外离子维持一定浓度梯度，是维持神经元去极化和复极化所必须的。缺血时，大量梗死灶周围的神经元凋亡，造成了半影区不断变成梗死区。神经元凋亡是研究脑卒中神经保护剂的重要靶点(AlhadidiQetal,2016)。用含25mMKCl的BME培养基培养大鼠小脑颗粒神经元，经过5mMKCl的BME处理24小时，可以建立稳定的小脑颗粒神经元凋亡模型，该模型已被广泛用于抗凋亡神经保护剂研究（DragottoJetal,2015）。兴奋性毒性是脑卒中重要病理机制之一，在缺血性脑卒中，神经元释放过量谷氨酸，同时由于供能障碍，胶质细胞重吸收谷氨酸的功能受阻，导致谷氨酸浓度过高，造成神经兴奋性毒性（KritisAAetal,2015）。谷氨酸介导的神经兴奋性是脑卒中神经保护的重要靶点（ChamorroÁetal,2016）。神经元兴奋性毒性模型已被广泛用于神经保护剂研究，我们在大鼠大脑皮质神经元上进行药物神经保护活性研究。
技术实现思路
本专利技术的专利技术人意外发现，胆甾-3,6-二酮能够减轻由谷氨酸引起的海马神经细胞氧化应激损伤、能够减轻钾剥夺引起的小脑颗粒神经元凋亡损伤、能够减轻谷氨酸引起的皮层神经元神经兴奋性损伤，从而能够用于治疗神经元损伤，具有用于开发成多种作用机制的神经保护剂的潜能。本专利技术的一方面提供胆甾-3,6-二酮、其氘代物或其药学上可接受的盐在制备治疗患者的神经元损伤的药物中的应用。在一些实施方式中，所述神经元损伤是由氧化应激损伤、神经元凋亡或神经元兴奋性毒性介导的损伤。在一些实施方式中，所述神经元损伤药物为退行性疾病。优选地，所述退行性疾病包括帕金森病、阿尔兹海默症、tau蛋白病或肌萎缩侧索硬化症。在一些实施方式中，所述神经元损伤为脑中风或脑损伤。在一些实施方式中，所述药物还包含另一治疗剂。在一些实施方式中，所述患者是人。本专利技术的另一方面提供一种治疗患者的神经元损伤的方法，该方法包括向该患者施用有效量的胆甾-3,6-二酮、其氘代物或其药学上可接受的盐、或包含胆甾-3,6-二酮、其氘代物或其药学上可接受的盐的药物组合物。在一些实施方式中，所述神经元损伤是由氧化应激损伤、神经元凋亡或神经元兴奋性毒性介导的损伤。在一些实施方式中，所述神经元损伤为退行性疾病。优选地，所述退行性疾病包括帕金森病、阿尔兹海默症、tau蛋白病或肌萎缩侧索硬化症。在一些实施方式中，所述神经元损伤为脑中风或脑损伤。在一些实施方式中，所述患者是人。本专利技术的再一方面提供胆甾-3,6-二酮、其氘代物或其药学上可接受的盐用于患者的神经元损伤的治疗。在一些实施方式中，所述神经元损伤是由氧化应激损伤、神经元凋亡或神经元兴奋性毒性介导的损伤。在一些实施方式中，所述神经元损伤为退行性疾病。优选地，所述退行性疾病包括帕金森病、阿尔兹海默症、tau蛋白病或肌萎缩侧索硬化症。在一些实施方式中，所述神经元损伤为脑中风或脑损伤。在一些实施方式中，所述患者是人。本专利技术的又一方面提供一种减轻或消除患者的神经元损伤的方法，所述方法包括向该患者施用有效量的胆甾-3,6-二酮、其氘代物或其药学上可接受的盐、或包含胆甾-3,6-二酮、其氘代物或其药学上可接受的盐的药物组合物。在一些实施方式中，所述神经元损伤是由氧化应激损伤、神经元凋亡或神经元兴奋性毒性介导引起的。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定。图1：胆甾-3,6-二酮对L-谷氨酸诱导HT-22细胞氧化应激损伤的神经保护作用。(A)细胞形态图，Scalebar=100μm；(B)MTT法测得的细胞存活率柱状图(Glu：0.171±0.014；MB：0.708±0.020；甾体：0.660±0.036；n=4；P<0.001VS.Glu)；(C)胆甾-3,6-二酮的EC50图。图2：胆甾-3,6-二酮对钾剥夺引起的小脑颗粒神经元凋亡损伤的神经保护作用。(A)细胞形态图，Scalebar100μm；(B)MTT法测得的细胞存活率柱状图（5K：0.326±0.010，steroid：0.449±0.017，***P<0.001VS.5K，n=3）；(C)Hoechst33342染色图，Scalebar50μm；(D)凋亡细胞百分数柱状图(5K：0.545±0.036，steroid：0.314±0.040，***P<0.001Vs.5K,n=5)。图3：胆甾-3,6-二酮对谷氨酸造成的皮质神经元兴奋性毒性的神经保护作用。(A)细胞形态图，Scalebar100μm；(B)MTT法测得的细胞存活率柱状图（Glu：0.338±0.022,MK801:0.930±0.068，steroid：0.862±0.047，***P<0.001VS.Glu，n=5）。具体实施方式如本文所用，术语“组合物”指适于给预期动物对象施用以达到治疗目的的制剂，其含有至少一种药物活性组分，例如化合物。任选地，所述组合物还含有至少一种药物学上可接受的载体或赋形剂。术语“药学上可接受的”表示所述物质不具有这样的特性，即考虑到将被治疗的疾病或病症以及各自的施用途径，该特性将会使理性谨慎的医学从业者避免给患者服用该物质。例如，对于可注射物来说，通常要求这样的物质是基本无菌的。在本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.胆甾‑3,6‑二酮、其氘代物或其药学上可接受的盐在制备治疗患者的神经元损伤的药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.胆甾-3,6-二酮、其氘代物或其药学上可接受的盐在制备治疗患者的神经元损伤的药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其中所述神经元损伤是由氧化应激损伤、神经元凋亡或神经元兴奋性毒性介导的损伤。3.根据权利要求1或2所述的应用，其中所述神经元损伤为退行性疾病。4.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈文礼，颜光美，银巍，张静夏，邱鹏新，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：广东,44