一种甘蔗组织培养中外植体防褐化的方法技术

本发明专利技术公开了一种甘蔗组织培养中外植体防褐化的方法，将成熟甘蔗茎秆从上至下的9‑15位芽经消毒，用抗氧化剂浸泡后剥取茎尖分生组织得到外植体，将外植体以MS+6‑BA为基础培养基培养，即可有效抑制甘蔗外植体的褐化。本发明专利技术方法可有效防止甘蔗外植体褐化现象的产生，且不影响外植体的生长分化，是甘蔗健康种苗组织培养的一种有效方法。

【技术实现步骤摘要】
一种甘蔗组织培养中外植体防褐化的方法
本专利技术属于植物组织培养
，具体地说，涉及一种甘蔗组织培养中外植体防褐化的方法。
技术介绍
甘蔗原产于热带、亚热带地区，是重要的糖料及能源作物，每年世界上总产量80％的蔗糖和40％的乙醇原料均来自于甘蔗。甘蔗系无性繁殖宿根栽培作物，易受甘蔗花叶病，宿根矮化病及黄叶病等的病原物反复侵害，使得品种退化，产量及含糖量下降。为了使优良品种的种性得以恢复，构建了甘蔗综合脱毒技术体系，用此技术体系所示的方法所生产的甘蔗脱毒健康种苗可以完全脱除以上病原菌并使甘蔗增产20-40％，蔗糖含量提高0.5-1.0％。此项技术体系中，甘蔗的组织培养是甘蔗脱毒健康种苗生产成功与否的关键因素之一，但是在甘蔗组织培养的过程中，外植体褐化现象普遍存在，严重影响外植体分化，严重的甚至导致外植体死亡。目前，甘蔗外植体防褐化技术研究的比较少，且多见于在培养基中添加抗氧化物质，从而降低外植体的褐化率。秦昌鲜等2011年在“防止甘蔗组织培养褐化初探”一文中提出，在培养基中添加生物素和硅酸钠，可推迟甘蔗外植体褐化出现时间，减轻褐化程度。吴转娣等2013年在“甘蔗胚性愈伤组织的诱导和本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种甘蔗组织培养中外植体防褐化的方法，其特征在于，将成熟甘蔗茎秆从上至下的9‑15位芽经消毒，用抗氧化剂浸泡后剥取茎尖分生组织得到外植体，将外植体以MS+6‑BA为基础培养基培养，即可有效抑制甘蔗外植体的褐化。

【技术特征摘要】
1.一种甘蔗组织培养中外植体防褐化的方法，其特征在于，将成熟甘蔗茎秆从上至下的9-15位芽经消毒，用抗氧化剂浸泡后剥取茎尖分生组织得到外植体，将外植体以MS+6-BA为基础培养基培养，即可有效抑制甘蔗外植体的褐化。2.根据权利要求1所述的甘蔗组织培养中外植体防褐化的方法，其特征在于，所述外植体的采集步骤包括：选取生长健壮、无病虫害的成熟甘蔗茎秆，剥去外叶鞘，截取从上至下9-15位间的单芽，52℃水浴30min后，38-40℃恒温培养，待腋芽长至8-12cm，将其切下，经消毒及抗氧化处理后，在无菌水或1％的无菌柠檬酸溶液中剥取茎尖1-2mm分生组织，即得到所述甘蔗外植体。3.根据权利要求1或2所述的甘蔗组织培养中外植体防褐化的方法，其特征在于，所述消毒方法为：先用无菌水清洗1-2次，用滤纸吸干水分后放入体积浓度为70-75％酒精中浸泡0.5-1min，之后放入加有2-3d、0.1％吐温20的0.1％升汞溶液中处理10-15min，期间搅拌3-4次，最后用无菌水清洗3-4次。4.根据权利要求3所述的甘蔗组织培养中外植体防褐化的方法，其特征在于，采用抗氧化剂浸泡时间为15-30min。5.根据权利要求3所述的甘蔗组织培养中外植体防褐化的方法，其特征在于，所述抗氧化剂为聚乙烯吡咯烷酮、抗坏血酸、硫代硫酸钠、亚硫酸钠、柠檬酸或磷酸丁脂中的一种。6.根据权利要求1所述的甘...

【专利技术属性】
技术研发人员：武媛丽，杨本鹏，曹峥英，甘仪梅，张树珍，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院热带生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：海南,46