抗-CD100抗体和其使用方法技术

本发明专利技术提供治疗CD100相关疾病，包括某些自身免疫病、炎性疾病和癌症的组合物和方法。具体说，已经开发了抗‑CD100单克隆抗体来中和CD100。

【技术实现步骤摘要】
抗-CD100抗体和其使用方法专利技术背景CD100，也称为脑信号蛋白4D(SEMA4D)，是属于脑信号蛋白基因家族的跨膜蛋白(如SEQIDNO：1(人)；SEQIDNO：2(鼠))。CD100在细胞表面上以同源二聚体的形式表达，但细胞活化后，CD100可通过蛋白水解切割从细胞表面上释放，产生活性该蛋白的可溶形式sCD100。参见Suzuki等，NatureRev.Immunol.3:159-167(2003)；Kukutani等，NatureImmunol.9:17-23(2008)。最初，通过产生对抗活化人T细胞克隆的两种小鼠单克隆抗体BD16和BB18鉴定CD100(Herold等，Int.Immunol.7:1-8(1994))。CD100是免疫系统所表达脑信号蛋白中的首例。CD100在静息T细胞表面上表达丰富，在静息B细胞、单核细胞和专性抗原提呈细胞如树突细胞(DC)上表达较弱。细胞活化可刺激上调CD100在B细胞和树突细胞表面上的表达，以及sCD100的产生。认为CD100既可用作受体通过其胞质结构域传递信号、又可用作配体(Hall等，PNAS93:11780-11785(1996))。已鉴定的CD100的受体之一是丛蛋白-B1。丛蛋白-B1在非淋巴样组织中表达，是CD100的高亲和(1nM)受体(Tamagnone等，Cell99:71-80(1999))。CD100是T细胞和B细胞活化的重要介导物。CD100敲除(CD100-/-)小鼠对T依赖性抗原的抗体应答降低，并且T细胞初敏受损。这两项功能在给予sCD100后得到恢复(Shi等，Immunity13:633-642(2000))。除了已证明的CD100对免疫细胞的作用外，CD100也显示在神经炎性疾病中观察到的脱髓鞘和轴突变性中起到直接作用。炎性脱髓鞘疾病，如MS的发病机理包括涉及免疫细胞的炎性期和选择性脱髓鞘和神经变性的时期。CD100在中枢神经系统(CNS)少突胶质细胞中表达，是轴突变性的抑制剂。CD100表达在脊髓损伤外周的少突胶质细胞中上调(Moreau-Fauvarque等，J.Neuroscience23:9229-9239(2003))。将表达sCD100的长期活化T细胞与人多能神经前体或来自大鼠脑的原代少突胶质细胞一起培养能诱导凋亡和突起伸长破坏(processextensioncollapse)(Giraudon等，J.Immunol.172:1246-1255(2004)；Giraudon等，NeuroMolecularMed.7:207-216(2005))。BD16抗-CD100抗体可抑制CD100诱导的神经前体凋亡。CD100敲除小鼠能抵抗实验性变应性脑脊髓炎(EAE)，这是人多发性硬化(MS)的小鼠模型(Kumanogoh等，J.Immulol.169:1175-1181(2002))。其它多项研究已证明，CD100能诱导神经元的生长锥破坏，且据报道在HTLV-1相关脊髓病/热带痉挛性轻截瘫(HAM/TSP)患者的脑脊液(CSF)中sCD100水平急剧升高，进一步支持CD100在神经炎症中的功能相关性。因此，sCD100对少突胶质细胞和神经前体完整性具有直接有害作用，并且CD100可能在脱髓鞘中起致病作用。作为炎症反应和直接脱髓鞘的重要介导物，本领域需要用于治疗炎性疾病和脱髓鞘疾病的CD100中和分子，如抗-CD100抗体。CD100也是有效的促血管新生分子。通过CD100结合激活丛蛋白-B1可在体内和体外反式激活c-Met、促进肿瘤细胞的侵袭能力、还能促进血管新生。在较大肿瘤样本中的CD100免疫组化分析揭示出CD100过度表达是头颈癌、前列腺癌、结肠癌、乳腺癌和肺癌中非常常见的事件。CD100/丛蛋白B1信号转导也能诱导内皮细胞迁移，并促进肿瘤细胞迁移(Conrotto等，Blood105:4321-4329(2005)；Giordano等，NatureCellBiology4:720-724(2002))。通过CD100-阻断抗体和CD100敲减，可防止CD100诱导的内皮细胞迁移。植入裸小鼠之前，用CD100短发夹RNA(shRNA)敲减头颈鳞状细胞癌(HNSCC)细胞的CD100表达导致肿瘤血管化程度和肿瘤生长水平显著降低(Basile等，PNAS103:9017-9022(2006))。近期的报道指出肿瘤基质的炎性浸润和高血管化等级之间紧密相关。CD100由肿瘤微环境中存在的炎性细胞产生。在缺少CD100的环境中，小鼠乳腺癌细胞产生肿瘤体和转移灶的能力被严重削弱，CD100的来源是肿瘤相关巨噬细胞(Sierra等，JEM205:1673-1685(2008))。因此，本领域还需要用于治疗CD100癌症的CD100中和分子，如抗-CD100抗体。专利
本专利技术涉及CD100中和抗体，如人源化单克隆抗体，所述抗体的使用方法，和治疗CD100表达细胞相关病症和疾病的方法。专利技术概述提供治疗CD100相关疾病的组合物和方法，包括某些类型的自身免疫病、炎性疾病、癌症和侵袭性血管新生。具体说，已经开发了抗-CD100单克隆抗体来中和CD100。小鼠MAb67在体外显示出阻断CD100活性的能力，并在小鼠模型中减轻实验性变应性脑脊髓炎(EAE)、胶原诱导性关节炎(CIA)和癌症的临床征象的严重性。MAb2503是人源化的MAb67，已证明它与人和鼠CD100的亲和力提高，并且与MAb67具有相似的CD100阻断活性。在一个实施方式中，本专利技术提供分离的结合分子，其与选自2503、67或76的参比单克隆抗体相同的CD100表位特异性结合。在另一实施方式中，本专利技术提供特异性结合CD100的分离的结合分子，所述结合分子竞争性抑制选自2503、67或76的参比单克隆抗体特异性结合CD100。在另一实施方式中，本专利技术提供特异性结合CD100的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其片段是单克隆抗体2503、67或76。在某些实施方式中，本专利技术所述特异性结合CD100的分离的抗体或其抗原结合片段包含重链可变区(VH)，该重链可变区的氨基酸序列与SEQIDNO：9、SEQIDNO：10或SEQIDNO：25至少90％相同。在本专利技术的另一方面，所述抗体或其片段的VH包含除20个或更少保守性氨基酸取代外，与SEQIDNO:9、SEQIDNO:10或SEQIDNO:25相同的氨基酸序列。在本专利技术的另一方面，所述抗体或其片段的VH包含氨基酸序列SEQIDNO:9、SEQIDNO:10或SEQIDNO:25，或由其组成。在某些实施方式中，本专利技术所述特异性结合CD100的分离的抗体或其抗原结合片段包含轻链可变区(VL)，该轻链可变区的氨基酸序列与SEQIDNO：17、SEQIDNO：18或SEQIDNO：29至少90％相同。在本专利技术的另一方面，所述抗体或其片段的VL包含除20个或更少保守性氨基酸取代外，与SEQIDNO:17、SEQIDNO:18或SEQIDNO:29相同的氨基酸序列。在本专利技术的另一方面，所述抗体或其片段的VL包含氨基酸序列SEQIDNO:17、SEQIDNO:18或SEQIDNO:29，或由其组成。在另一本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分离的结合分子，其特异性结合与选自2503或67的参比单克隆抗体相同的CD100表位。

【技术特征摘要】
2009.05.08 US 61/176,826;2010.04.16 US 61/325,2131.一种分离的结合分子，其特异性结合与选自2503或67的参比单克隆抗体相同的CD100表位。2.一种特异性结合CD100的分离的结合分子，所述结合分子竞争性抑制选自2503或67的参比单克隆抗体与CD100的特异性结合。3.如权利要求1或2所述的结合分子，其特征在于，包括抗体或其抗原结合片段。4.一种特异性结合CD100的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其片段是单克隆抗体2503或67。5.一种特异性结合CD100的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其片段的重链可变区(VH)包含与SEQIDNO：9或SEQIDNO：10至少90％相同的氨基酸序列。6.一种特异性结合CD...

【专利技术属性】
技术研发人员：E·S·史密斯，T·L·费希尔，
申请(专利权)人：瓦西尼斯公司，
类型：发明
国别省市：美国,US