本发明专利技术公开了鳞翅目昆虫酪氨酸蛋白激酶在防治虫害中的应用，本发明专利技术将鳞翅目昆虫Abl被抑制表达后会增加虫体对病菌的易感性，家蚕更容易染上青头败血病和灵菌败血病，而存活下来的突变体相对于野生型提前进入五龄以及游走时期，并且蛹重和茧重都明显降低，同时孵化率也明显降低。如果抑制鳞翅目昆虫Abl的表达，可实现害虫防治的目的。从理论上来说，若过表达Abl基因也会引起丝蛋白产量、产率等性状的显著提升。
Application of Lepidoptera Tyrosine Protein Kinase in Pest Control
The invention discloses the application of Lepidoptera insect tyrosine protein kinase in pest control. The inhibition and expression of Lepidoptera insect Abl will increase the susceptibility of the body to pathogens, and the silkworm is more susceptible to blue-headed septicemia and fungus septicemia, while the surviving mutant enters the fifth instar earlier than the wild type. During the migration period, the pupa weight and cocoon weight were significantly reduced, and the hatching rate was also significantly reduced. If the expression of Lepidoptera Abl is inhibited, the aim of pest control can be achieved. In theory, overexpression of Abl gene can also cause significant improvement in silk protein yield and yield.
【技术实现步骤摘要】
鳞翅目昆虫酪氨酸蛋白激酶在防治虫害中的应用
本专利技术涉及鳞翅目昆虫酪氨酸蛋白激酶在防治虫害中的应用。
技术介绍
鳞翅目包括蛾、蝶两类昆虫，属有翅亚纲、全变态类。全世界已知约20万种，中国已知约8000余种。该目为昆虫纲中仅次于鞘翅目的第2个大目。分布范围极广，以热带种类最为丰富。绝大多数种类的幼虫为害各类栽培植物，体形较大者常食尽叶片或钻蛀枝干。体形较小者往往卷叶、缀叶、结鞘、吐丝结网或钻入植物组织取食为害。家蚕(Bombyxmori)是一种以桑叶为食料的鳞翅目泌丝昆虫，蚕一生经过卵、幼虫、蛹、成虫4个形态上和生理机能上完全不同的发育阶段。Abl是一种非受体型酪氨酸蛋白激酶，通过对多个代表性品系的家蚕和野蚕的重测序数据分析发现。通过调查文献发现在脊椎动物里，Abl的缺失会损害T细胞和B细胞的发育和反应能力。然而，人们对家蚕里Abl的功能却了解甚少。CRISPR-Cas9系统是继锌指核酸酶(ZFNs)和TALEN核酸酶之后，又一个可精确定点编辑基因组DNA的新技术，已被应用于小鼠、大鼠、家蚕等动物和拟南芥、水稻等植物基因组的精确修饰和定点突变。因此,本研究采用CRISPR-Cas9介导的基因组编辑技术，对家蚕的Abl基因进行精确定点编辑，研究家蚕中Abl的功能。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种鳞翅目昆虫酪氨酸蛋白激酶在防治虫害中的应用。本专利技术所采取的技术方案是：鳞翅目昆虫酪氨酸蛋白激酶基因Abl作为害虫防治靶点的应用。鳞翅目昆虫酪氨酸蛋白激酶基因Abl表达抑制剂和/或活性抑制剂在制备防治虫害药剂中的应用。鳞翅目昆虫酪氨酸蛋白激酶基因Abl表达抑制剂和/或活性抑制剂在抑制虫体产卵中的应用。进一步的，所述鳞翅目昆虫为蚕。进一步的，所述酪氨酸蛋白激酶基因Abl表达抑制剂为抑制基因Abl表达的sgRNA。进一步的，所述sgRNA作用的靶序列为GGGGATCGTCCTCTTCGTGATGG。本专利技术的有益效果是：本专利技术将鳞翅目昆虫Abl被抑制表达后会增加虫体对病菌的易感性，家蚕更容易染上青头败血病和灵菌败血病，而存活下来的突变体相对于野生型提前进入五龄以及游走时期，并且蛹重和茧重都明显降低，同时孵化率也明显降低。如果抑制鳞翅目昆虫Abl的表达，可实现害虫防治的目的。从理论上来说，若过表达Abl基因也会引起丝蛋白产量、产率等性状的显著提升。附图说明图1为CRISPR/Cas9系统敲除Abl基因的靶位点选择；图2为蚕卵显微注射敲除Abl基因后的孵化情况；图3为Abl被抑制表达(Abl-)的虫体相比野生型更容易感染青头败血病、灵菌败血病；图4为Abl被抑制表达(Abl-)虫体的幼虫期比野生型短，图中Mutant1～3表示Abl被抑制表达体(Abl-)、Wild1～3表示野生型；图5为Abl被抑制表达(Abl-)的蚕蛹表型；图6为Abl被抑制表达(Abl-)的蚕蛹重量显著降低(N＝80，mean±SD)，并且更为集中；突变体表示Abl-；图7为Abl被抑制表达(Abl-)的蚕茧表型；图8Abl被抑制表达(Abl-)的蚕茧全重量显著降低(mean±SD)，并且更为集中；图9Abl被抑制表达(Abl-)的蚕茧层重量显著降低(mean±SD)，并且更为集中；图10Abl被抑制表达(Abl-)的蚕孵化率明显降低。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术作进一步的说明。实施例1蚕基因Abl被抑制表达的表型一、CRISPR/Cas9系统敲除家蚕酪氨酸蛋白激酶(Abl)基因(1)靶位点的选择Abl基因的CDS序列(SEQIDNO：1)共3747bp，具体序列为：ATGGGCGCGCAGCAGGCCAAAGAACGCGGCACCGCCAGCGGCGCGTCCATGCGTTCGGCGCGCAGCAAGCCACGGGTGCCGAAGGACCCCCGCATGCTCGGCTCCAACATATTCACTGAACATAGCGAGGCGCTGCTGCAGAGCCGACCGCTGCCGCACATCCCAGACCTGCCCGACGAGGCCGCCGCGCCACCCGCTCCGCTGCCGCTCGACTCCGCTAACAGATGGACCTCGAAGGAGAATCTTTTGGCCCATCACGAAGAGGACGATCCCCAGCTGTTCGTAGCCCTCTACGATTTCCAGGCGGGAGGGGAGAACCAGCTCACGCTCAAGAAAGGCGAGCAGGTGCGCATCATGAGCTACAACAAGAGCGGCGAGTGGTGCGAAGCCCACACGCTGACTGGGGCCGTGGGCTGGGTGCCCAGCAACTACGTCACTCCAGTCAACAGTCTCGAGAAGCATTCATGGTACCATGGGCCGATTTCCCGCAACGCGGCGGAGTACCTCCTCTCGTCTGGGATCAATGGCAGCTTCCTGGTCCGCGAATCGGAATCGAGTCCTGGGCAACGCAGCATATCCCTCCGCTACGAAGGGAGAGTTTACCACTACCGCATCAACGAAGACGCCGATGGGAAGGTTTATGTGACCTCCGAGTCGAAGTTCGGAACGTTAGCGGAGCTGGTCCACCATCACTCGGTGGCGGGGGACGGTCTAATTACGCAGCTGCTGTATCCAGCACCGAAGCGCTCGAAGCCTACAGTGTTCCCCCTGGCTCCCCCCGACCACTGGGAGATCGATCGCACGGACATAGTGATGAAGCACAAGCTGGGCGGCGGCCAGTATGGAGACGTTTACGAAGCCGCTTGGAAGCGCGGCAACATCACGGTGGCGGTCAAAACACTCAAGGACGATACGATGGCGCTCAAGGATTTCCTGGAGGAAGCCTCCATAATGAAAGAGATGCGACACCCGAACCTGGTGCAGCTGCTCGGCGTGTGCACACGCGAGCCCCCGTTCTATATTATTACGGAGTTTATGTCCCGCGGAAACCTGCTGGAGTACCTGCGGGCGGGGGCGAGGGAGTGCGTGCCGGGCGCGGTCGTGCTCATGTACATGGCGACGCAGATAGCGTCCGGCATGAGCTACCTCGAGAGCCGCTCCTTCATCCACCGCGACCTCGCCGCCAGGAACTGCCTCGTGGGGGAGAACCATCTGGTCAAGGTGGCCGACTTCGGACTGGCTCGCCTGATGCGCGACGACACATACACGGCCCACGCCGGCGCCAAGTTCCCGATCAAGTGGACGGCGCCGGAGGGTCTGGCCTACAACACTTTCAGCACCAAATCGGATGTCTGGGCTTTCGGGATCCTGCTGTGGGAGATCGCCACGTACGGGATGTCTCCTTACCCCGGAGTGGATCTCGCGGACGTTTACCACATGCTTGAGAAGGGGTACCGCATGGAGTGTCCCCCGGGCTGCCCGGCGCCCGTCTACGAGCTCATGCGCGGCT本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.鳞翅目昆虫酪氨酸蛋白激酶基因Abl作为害虫防治靶点的应用。
【技术特征摘要】
1.鳞翅目昆虫酪氨酸蛋白激酶基因Abl作为害虫防治靶点的应用。2.鳞翅目昆虫酪氨酸蛋白激酶基因Abl表达抑制剂和/或活性抑制剂在制备防治虫害药剂中的应用。3.鳞翅目昆虫酪氨酸蛋白激酶基因Abl表达抑制剂和/或活性抑制剂在抑制虫体产卵中的应用。4.根据权利要求1～3任一项所述的应用...
【专利技术属性】
技术研发人员：崔勇，相辉，冯启理，
申请(专利权)人：华南师范大学，
类型：发明
国别省市：广东,44
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。