一种蝉花的固体培养方法技术

本发明专利技术提供一种蝉花的固体培养方法，其特征在于，所述方法是将扩大培养的蝉花菌种接种到固体培养基上，先后经过暗培养和光培养，并适时采收子实体，即得；其中，光培养阶段采用16‑20小时/天的光照。

A Solid Culture Method of Cicada

The invention provides a solid culture method of cicada flower, which is characterized in that the expanded cicada flower strain is inoculated on a solid culture medium, then cultured in dark and light successively, and the fruiting body is harvested in time, and the light culture stage adopts 16 to 20 hours per day of light.

【技术实现步骤摘要】
一种蝉花的固体培养方法
本专利技术涉及一种蝉花的固体培养方法，具体涉及一种固定光培养过程中光照时间的人工培养蝉花的方法。
技术介绍
中药蝉花为蝉棒束孢IsariacicadaeMiquel(蝉拟青霉Paecilomycescicadae(Miquel)Samson)寄生在蝉若虫上形成的菌虫复合体，是我国传统著名的中药材之一，其药用比冬虫夏草早800年。蝉花属药食兼用真菌，具有较高的营养价值和特定的功效。蝉花可产生多种在医疗和保健上有重要作用的生理活性物质，包括核苷类、环肽类、多糖类、醇类、甾醇类及有机酸等，在调节免疫、改善肾功能、调节脂类代谢、抗肿瘤、抗疲劳、镇痛、催眠、降压降血糖等方面作用明显。天然蝉花资源十分有限，再加上野生蝉花因为产地不同、采收时间不一、易被杂菌污染霉变及含重金属等问题，其品质受到质疑。人工培育的蝉花不含重金属，无污染，以及营养成分稳定，因此，越来越受到人们的重视。目前，已经实现了蝉花的工厂化栽培。人工培育蝉花，是将蝉棒束孢经过斜面种子、摇瓶培养和液体深层发酵获得的液体种子接种到固体基质上先进行暗培养，之后见光培养，最终得到分叉多枝的子实体，经采收干燥即可作食药用原料。原料的产量及活性成分含量对于消费者的感官和品质认同至关重要，而不同的光照时间对于子实体产量和有效活性成分的含量有一定的影响。目前，人工培养蝉花在光培养阶段所使用的光照时间多为24h，造成了不必要的能源浪费。
技术实现思路
为解决现有技术存在的问题，本专利技术提供一种蝉花的固体培养方法，该方法是将蝉花菌种接种到固体培养基上，先后经过暗培养和光培养，并适时采收子实体，即得；其中，光培养阶段采用16-20小时/天的光照。优选的是，所述蝉花菌种选自扩大培养的蝉花菌种；所述扩大培养包括斜面培养、摇瓶培养、种子罐培养发酵罐培养等方法中的任意一种或几种。优选的，所述光培养阶段采用18小时/天的光照。在一些实施方式中，所述固体培养基为蝉花培养过程中常规的固体培养基，如谷物培养基，可选自小麦、玉米、大米、小米、黄豆粉、荞麦、大麦、燕麦、糙米、粳米中的任意一种或几种；农作物秸杆培养基，如麦秆、玉米杆、棉杆、豆杆、芝麻杆中的任意一种或几种；农作物皮壳培养基，如麸皮、大豆皮、棉籽壳等。优选小麦培养基。所述接种量为5％～15％；优选为接种量为7％～12％；进一步优选接种量为10％。所述培养条件为：暗培养阶段培养温度22-24℃，相对湿度为70-85％；光培养阶段培养温度为20-22℃，相对湿度为70-85％。所述光培养阶段采用复合白光，光照强度为150-250Lx。本专利技术的有益效果：本专利技术在蝉花光培养阶段采用LED白光并进行18h/天的照射，相对于现有技术采用24h全天光照照射而言，取得了如下显著效果：①显著减轻了能源的消耗，延长了灯具及其控制设备的使用寿命；②缩短光照时间不影响子实体外观性状和有效成分含量，其产量还略有增加；③大大减少了产孢量，能明显减少培养过程中粉尘扩散带来的麻烦。具体实施方式以下实施例1中所用蝉花菌种保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号CGMCCNo3453(该菌种已在申请号为201110120603.1的专利技术专利中公开，为已知菌种)。本专利技术研究表明蝉花菌种类型并不构成影响本专利技术效果的因素，本专利技术干燥方法对不同蝉花菌种均能够实现效果。实施例1蝉花的扩大培养斜面培养：将菌种接种于斜面试管中，再将接种菌种的斜面试管放入22℃培养箱，培养时间为7天，待菌丝长满试管；摇瓶培养：在500m1三角瓶中装入200m1液体培养基，在0.11Mpa压力下高压灭菌30分钟，待冷却至室温，将1支斜面试管的菌种接种到500m1三角瓶培养基上，并置于恒温振荡培养箱，温度22±1℃，150转/分钟条件下培养，培养时间为3天；种子罐培养：在50L气升式发酵罐中装入20L液体培养基，培养基温度大于95℃，加入食用消泡剂，加入量为培养基重量的0.03％，在0.11Mpa压力下，通入蒸汽加热到121℃，并保压30-45分钟；灭菌后，冷却至20℃时，将4瓶上述培养好的500m1摇瓶菌种接入培养基，培养温度为22±1℃，通气量为1：0.5V/Vmin，保压4.903-7.0845×104Pa，经3天通气培养，达到对数生长期后即可，终培养体积为20L。发酵罐培养：在500L气升式发酵罐中装入200L液体培养基，培养基温度大于95℃，加入食用消泡剂，加入量为培养基重量的0.03％，在0.11Mpa压力下，通入蒸汽加热到121℃，并保压30-45分钟；灭菌后，冷却至20℃时，将上述培养好的200L种子罐种子全部接入培养，培养温度为22±1℃，通气量为1：0.5V/Vmin，保压4.903-7.0845×104Pa，经3天通气培养，达到对数生长期后即可。终培养体积为200L。斜面试管培养基：200g土豆煮汁，20g蔗糖，20g琼脂，余补水至1000ml，pH值为6.5；摇瓶、种子罐及发酵罐中的液体培养基：30g酵母浸出粉，30g蔗糖，5g大豆水解蛋白，余量补水至1000毫升，pH值为6.5。实施例2蝉花的固体培养固体培养基的制备：将小麦清洗控水后，加入适量的水，其重量比为小麦：水为1：1.4，混合均匀；拌匀后装入培养容器中，培养基厚度控制在4cm。将装好培养基的培养容器放置灭菌锅内，121℃下灭菌30-50min；灭菌后，培养容器移置缓冲室内，自然冷却至24℃以下移置接种室内。接种：接种前培养容器先在超净工作台或百级层流罩内(下)用紫外光照射0.5h；每个培养容器按10％的接种量接种实施例1扩大培养得到的菌种，接种后的容器放入培养室培养。培养条件：暗培养阶段培养温度为22-24℃，空气相对湿度70-85％；待菌丝体长满培养基时转为光培养，光源采用LED白光，光照强度200Lx，光照时间18小时/天，培养室温度为20-22℃，相对空气湿度70％-85％。培养室要适时通风换气，保持发菌室空气新鲜；至子实体成熟，尚未大量产生孢子(约23～26天)。实施例3蝉花的固体培养培养过程与实施例2基本相同，区别在于光照时间为16h。实施例4蝉花的固体培养培养过程与实施例2基本相同，区别在于光照时间为20h。实施例5蝉花的固体培养培养过程与实施例2基本相同，区别在于光照时间为22h。实施例6蝉花的固体培养培养过程与实施例2基本相同，区别在于光照时间为24h。实施例7采收及干燥对实施例2～6任一培养的子实体进行采收；采收后的子实体直接进入烘干设备准备烘干。烘干温度60℃，干燥时间4-5h。光照时间对子实体产量和质量的影响取实施例2-6培养得到的子实体，按实施例7方法进行采收和干燥，对子实体的产量和质量进行如下评价。1、光照时间对蝉花子实体外观的影响10位评分人对每个实施例采收的子实体按照表1的评分标准对其外观颜色进行评分，记录平均值见表2。表1外观评分标准颜色分值浅黄色-深黄色15-11深黄色-暗灰色10-6暗灰色-黑色5-0表2光照时间对外观颜色的影响实施例光培养阶段每天光照时间平均得分实施例218h/天13.8实施例316h/天13.0实施例420h/天10.4实施例522h/天12.7实施例624h/天13.4结果表明，采用18h进行光培养，子实体颜色为黄色本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种蝉花的固体培养方法，其特征在于，所述方法是将蝉花菌种接种到固体培养基上，先后经过暗培养和光培养，并适时采收子实体，即得；其中，光培养阶段采用16‑20小时/天的光照。

【技术特征摘要】
1.一种蝉花的固体培养方法，其特征在于，所述方法是将蝉花菌种接种到固体培养基上，先后经过暗培养和光培养，并适时采收子实体，即得；其中，光培养阶段采用16-20小时/天的光照。2.如权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述蝉花菌种选自扩大培养的蝉花菌种。3.如权利要求1或2所述的培养方法，其特征在于，所述固体培养基包括谷物培养基、农作物秸秆培养基、农作物麸皮培养基。4.如权利要求3所述的培养方法，其特征在于，所述谷物培养基为小麦、玉米、大米、小米、黄豆粉、荞麦、大麦、燕麦、糙米、粳米中的任意一种或几种组成的培养基；所述农作物秸杆培养基为麦秆、玉米杆、棉杆、豆杆、芝麻杆中的任意一种或几种组成的培养基；所述农作物...

【专利技术属性】
技术研发人员：李春如，路文遥，钱泽勇，纪伟，陈桃宝，徐煜，王玉芹，孙长胜，
申请(专利权)人：浙江泛亚生物医药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33