一种基于纳米荧光染料对水生生物肠道pH测定的方法技术

本发明专利技术涉及一种基于纳米荧光染料对水生生物肠道pH测定的方法，其步骤如下：（1）将磷脂酰胆碱（DOPC）溶解于三氯甲烷的溶液中，制备成储备液并加入到玻璃瓶中；将大型溞培养液加入到玻璃瓶中；将10µM的荧光纳米染料加入到大型溞培养液中；利用荧光仪对不同pH条件下TPE‑Cy的荧光特性进行测定；利用激光扫描共聚焦显微镜对大型溞肠道进行扫描，对大型溞肠道整体荧光进行分析；本发明专利技术利用荧光纳米染料实现对大型溞肠道pH整体分布的测定方法，且操作简单便捷、灵敏度高，大幅提高了测定准确度。

【技术实现步骤摘要】
一种基于纳米荧光染料对水生生物肠道pH测定的方法
本专利技术属于环境分析化学领域，涉及一种基于纳米荧光染料对水生生物肠道pH测定的方法，用于对大型溞肠道内pH的测定。
技术介绍
大型溞作为一种常见的水生生物，广泛分布于湖泊、河流中。由于其容易养殖，生命周期较短以及半透明的特殊身体结构，大型溞已经成为一种广泛应用于毒理学，基因组学等研究中的模式生物。近年来，大型溞的肠道被广受关注。肠道作为大型溞主要的排泄器官，大量的食物经过摄取后，会长时间停留在肠道中，经过酶解以及代谢过程，将蛋白质以及糖类物质转化为生命活动所需要的营养物质，因此肠道对大型溞的生命活动起着重要作用。而肠道内的pH对消化酶的活性有着直接影响，最终影响食物慢慢的被迁移转化，吸收利用过程，因此，有必要对大型溞肠道内pH进行检测以更好的理解和调节肠道代谢过程。微电极技（Brune,A.,Emerson,D.andBreznak,J.A.AppliedandEnvironmentalMicrobiology，1995，61，2681-2687）、荧光成像技术（Pond,D.W.,Harris,R.P.andBrownlee,C.本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于纳米荧光染料对水生生物肠道pH测定的方法，其步骤如下：（1）将磷脂酰胆碱（DOPC）溶解于三氯甲烷的溶液中，制备成储备液；（2）将储备液加入到玻璃瓶中，利用氮气吹扫仪，去除三氯甲烷的溶液，使玻璃瓶瓶底形成一层DOPC薄膜；将大型溞培养液加入到玻璃瓶中；在超声震荡条件下，使得磷脂酰胆碱（DOPC）均匀分散在溶液中；（3）将10µM的荧光纳米染料（tetraphenylethene‑cyanine, TPE‑Cy）加入到大型溞培养液中；利用荧光仪对不同pH条件下TPE‑Cy的荧光特性进行测定；（4）加入体积为10µL，浓度为10mM的TPE‑Cy，然后加入大型溞；3小时后将大型溞取出，...

【技术特征摘要】
1.一种基于纳米荧光染料对水生生物肠道pH测定的方法，其步骤如下：（1）将磷脂酰胆碱（DOPC）溶解于三氯甲烷的溶液中，制备成储备液；（2）将储备液加入到玻璃瓶中，利用氮气吹扫仪，去除三氯甲烷的溶液，使玻璃瓶瓶底形成一层DOPC薄膜；将大型溞培养液加入到玻璃瓶中；在超声震荡条件下，使得磷脂酰胆碱（DOPC）均匀分散在溶液中；（3）将10µM的荧光纳米染料（tetraphenylethene-cyanine,TPE-Cy）加入到大型溞培养液中；利用荧光仪对不同pH条件下TPE-Cy的荧光特性进行测定；（4）加入体积为10µL，浓度为10mM的TPE-Cy，然后加入大型溞；3小时后将大型溞取出，置于干净的培养液中清洗约2分钟；（5）利用激光扫描共聚焦显微镜对大型溞肠道进行扫描，选择两个荧光通道，对大型溞肠道整体荧光进行分析；（6）利用matlab对每个像素中两个荧光通道中I489/I615进行分析，将大型溞肠道...

【专利技术属性】
技术研发人员：王文雄，颜能，
申请(专利权)人：香港科技大学深圳研究院，
类型：发明
国别省市：广东,44