基于酸性磷酸酶活性抑制原理的比率荧光法检测As(V)制造技术

本发明专利技术公开了一种基于酸性磷酸酶活性抑制原理的比率荧光法检测As(V)，属于环境分析技术领域。先制备量子点@铽离子‑单磷酸鸟嘌呤核苷酸(QDs@Tb‑GMP)复合物，酸性磷酸酶(ACP)催化GMP水解从而破坏QDs@Tb‑GMP的结构，导致Tb的绿色荧光淬灭，而QDs的红色荧光不变。As(V)可抑制ACP的活性，使得Tb的荧光不淬灭，随着As(V)浓度的增大，Tb与QDs的荧光比值(I547/I652)逐渐增加，构建了比率荧光法检测As(V)。此外，在紫外灯下，随着As(V)浓度的增加，QDs@Tb‑GMP溶液从红紫色变为橙色，可实现As(V)的可视化分析。QDs@Tb‑GMP的制备方法简便、水溶性好、环境友好，该比率荧光法不仅改善了测定As(V)的灵敏度，结合氧化处理还可用于检测实际样品中无机砷总量。

【技术实现步骤摘要】
基于酸性磷酸酶活性抑制原理的比率荧光法检测As(V)
本专利技术涉及一种基于酸性磷酸酶活性抑制原理的比率荧光法检测As(V)，属于环境分析

技术介绍
无机砷污染是当前环境重金属污染问题中最为严重的问题之一。环境中五价砷(As(V))的存在十分广泛，尤以在含氧高的环境中为主。且水中的As(V)可轻易进入到鱼类、稻谷等水生动植物中，动植物体内As(V)的累积通过食物链而进入人体，从而造成砷对人类健康的危害。因而，世界卫生组织(WHO)对饮用水中砷的最高允许值规定为10ppb。As(V)和磷酸具有极高的相似性，如相同的化学结构，几乎相同的尺寸和pKa值，完全相同的含氧原子，热化学半径仅相差4％以及相似的金属亲和性等(EliasM,WellnerA,Goldin-AzulayK,ChabriereE,VorholtJA,ErbTJ,TawfikDS.Themolecularbasisofphosphatediscriminationinarsenate-richenvironments.Nature,2012,491,134-137)。磷酸是生命体组成必须的成分，而砷酸具有毒性，磷本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.基于酸性磷酸酶活性抑制原理的比率荧光法检测As(V)，其特征在于，包括以下步骤：将20μL 800U/L的酸性磷酸酶溶液、不同浓度的As(V)溶液和50μL HEPES缓冲溶液混合，用超纯水稀释到总体积为100μL，在37℃水浴中反应90min，再加入150μL的QDs@Tb‑GMP溶液，漩涡混匀后，在37℃水浴中反应40min，采用荧光分光光度计测量溶液在激发波长为280nm时的荧光光谱，根据不同浓度的As(V)与对应的Tb与QDs的荧光信号强度之间的比值的线性关系来实现对As(V)的高灵敏和选择性检测，或还可结合氧化处理检测实际样品中无机砷总量，或在紫外灯照射下，观察溶液颜色的变化来实...

【技术特征摘要】
1.基于酸性磷酸酶活性抑制原理的比率荧光法检测As(V)，其特征在于，包括以下步骤：将20μL800U/L的酸性磷酸酶溶液、不同浓度的As(V)溶液和50μLHEPES缓冲溶液混合，用超纯水稀释到总体积为100μL，在37℃水浴中反应90min，再加入150μL的QDs@Tb-GMP溶液，漩涡混匀后，在37℃水浴中反应40min，采用荧光分光光度计测量溶液在激发波长为280nm时的荧光光谱，根据不同浓度的As(V)与对应的Tb与QDs的荧光信号强度之间的比值的线性关系来实现对As(V)的高灵敏和选择性检测，或还可结合氧化处理检测实际样品中无机砷总量，或在紫外灯照射下，观察溶液颜色的变化来实现对As(V)的快速可视化分析。2.根据权利要求1所述基于酸性磷酸酶活性抑制原理的比率荧光法检测As(V)，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：邱建丁，问少华，梁汝萍，
申请(专利权)人：南昌大学，
类型：发明
国别省市：江西,36