一种红曲霉株的培育方法技术

本发明专利技术公开一种红曲霉株的培育方法，首先进行红曲霉菌种培养，将红曲米和蒸馏水混合研磨并过滤制得菌悬液，将菌悬液接种到种子培养基中进行培养，得到红曲霉菌种；然后制备红曲霉菌种培养基，先将鱼粉、葛根粉、大豆粉、洛伐他汀、蒸馏水和氨水等制得发酵培养基，然后将发酵培养基的pH调节为3.5，再在其中加入诱导剂H‑Pen，制得培养基；再将红曲霉菌种接种培养基中培养，制得诱变红曲霉孢子菌孢子，对其进行冲洗，制得悬液，通过离心机离心，得到红曲霉孢子菌，最后将制得的红曲霉孢子菌进行提取、浓缩和干燥,提取莫纳克林；本发明专利技术通过红曲菌株自诱导的培育方法，可有效提高培养基中红曲菌株的产量，进而提高红曲菌株中莫纳克林K及抗癌成分产量。

A Method of Cultivating Monascus Strain

The invention discloses a cultivation method of Monascus strains, which first carries out the cultivation of Monascus strains, grinds and filters Monascus rice and distilled water to obtain the suspension of Monascus strains, inoculates the suspension of Monascus strains into the seed culture medium for cultivation, and then prepares the culture medium of Monascus strains, first, fish meal, pueraria root powder, and large amount of Monascus strains. Soybean flour, lovastatin, distilled water and ammonia water were used to prepare fermentation medium, then the pH of fermentation medium was adjusted to 3.5, and the inducer H_Pen was added to the medium to prepare the medium. Then the spores of mutagenic Monascus spores were obtained by inoculating Monascus species in the medium, and then the suspension was washed out to prepare the suspension. Monascus sporozoites were obtained by centrifuge, and finally Monascus sporozoites were extracted, concentrated and dried to extract Monacolin. The method of self-induction cultivation of Monascus strains can effectively improve the production of Monascus strains in culture medium, and then increase the production of Monacolin K and anti-cancer components in Monascus strains. \u3002

【技术实现步骤摘要】
一种红曲霉株的培育方法
本专利技术涉及一种红曲霉株的培育方法。
技术介绍
红曲，也称为丹曲，由红曲霉接种于大米发酵得到的，是我国古代的伟大专利技术，至今已有1000多年的历史，很早就应用于食品着色、食品发酵以及中医中药。明代《本草纲目》中记载：“红曲，性温、味甘，消食活血，健脾燥胃。酿酒，破血行药势”。1979年，日本学者远藤章从红曲发酵液中发现并分离得到能显著抑制体内胆固醇合成的活性物质MonacolinK后，人们开始对天然红曲及Monacolin类化合物给予了新的广泛关注。药理及临床实验显示，红曲不但有降血脂、降血压、降血糖功效，而且还有明显抑菌、增强免疫力、抗疲劳的作用。目前，世界各国均投入很大的人力及物力开展红曲的基础与应用研究。1979年，日本学者远藤章从红曲发酵液中发现并分离得到能显著抑制体内胆固醇合成的活性物质MonacolinK，MonacolinK是HMG-CoA还原酶的竞争性抑制剂，而HMG-CoA还原酶是控制胆固醇合成速度的关键酶，因此抑制这个酶的活性，就能减少或阻断体内胆固醇的合成。从此，人们开始对天然红曲给予了新的广泛关注，世界各国均投入很大的人力物力开展红曲的基础与应用研究。药理及临床实验显示，红曲不但有降血脂、降血压、降血糖、抗衰老功效，而且还有明显的预防和治疗恶性肿瘤作用。目前红曲霉的发酵工艺主要有两种，即固态发酵和液态发酵，大多采用固态发酵的方式，固态发酵具有生产过程简单，投资少，产量高，后处理简单等优点，固态发酵也有缺点，如存在周期较液态发酵长，条件不易控制，容易染菌的问题；而现有的液态发酵工艺的效果也不是很理想。因此，寻求一种能够大大提高红曲菌株的产量，进而提高红曲菌株中莫纳克林K及抗癌成分产量的培育方法很有必要。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术目的是提供一种通过红曲菌株自诱导的培育方法，可有效提高培养基中红曲菌株的产量，进而提高红曲菌株中莫纳克林K及抗癌成分产量。为了解决上述技术问题，本专利技术的技术方案是：S1：红曲霉菌种培养1)先将红曲米与蒸馏水按4-5:1-2的比例混合，并经过研磨机制得米浆，然后通过过滤器过滤得到菌悬液，备用；2)将步骤1)制得的菌悬液通过吸管接种到在灭菌后的种子培养基中，并在36-38℃的摇床内培养8-10天，得到红曲霉菌种，备用；S2：红曲霉菌种培养基的制备1)鱼粉10-15份、麸皮3-5份、复合氨基酸4-6份、EM菌种7-9份、磷酸氢二钾1-3份、葛根粉5-7份、大豆粉5-7份和洛伐他汀1-3份放入容器内，然后加入蒸馏水20-30份、氨水20-30份，在30-40℃的条件下,使用搅拌棒以20-30r/min的速度搅拌10-15min，使各物料混合均匀，再通过高压蒸汽对其进行灭菌，制得发酵培养基，备用；2)在步骤1)得到发酵培养基中加入pH调节剂，调节发酵培养基的pH为3.5，备用；3)在pH为3.5的发酵培养基中加入诱导剂H-Pen1-1.5份，通过搅拌棒以30-40r/min的速度搅拌40-50min，制得培养基，备用；S3：诱变红曲霉孢子菌1)将S1中得到的红曲霉菌种接种到S2制得的培养基中，培养温度为30℃，培养时间为12-15天，红曲霉菌通过发酵培养基及诱导剂H-Pen的培养，制得诱变红曲霉孢子菌孢子，备用；2)取20m-30L0.8％氯化钠无菌水对步骤1)制得诱变红曲霉孢子菌孢子进行冲洗，使得红曲霉孢子脱离培养基，制得红曲霉孢子菌悬液，备用；3)将步骤2)制得的红曲霉孢子菌悬液通过离心机，在2800-3000r/min的转速下，离心15-20min，得到红曲霉孢子菌，备用；S4：莫纳克林的提取1)将S3中制得的红曲霉孢子菌放入超声波提取机内，并加入乙醇10-12份，提取2-3次，然后进行过滤分离，得到滤液，再将滤液真空浓缩至原体积的1/2，并除去红曲色素，得到浓缩液，备用；2)将步骤1)制得的浓缩液在45-50℃下真空浓缩至粉末状，得到粉末，然后将粉末放入干燥箱内，在30-40℃的条件下干燥1-2小时,即得莫纳克林。进一步的，所述S1中的种子培养基为紫甘薯淀粉。进一步的，所述S1中的高压蒸汽灭菌的条件压力100-110KPa，温度110-120℃，灭菌时间为10-12min。进一步的，所述S4中的超声频率为26KHz，每次超声提取的时间为20-30min。本专利技术的有益效果：首先进行红曲霉菌种培养，将红曲米和蒸馏水混合研磨并过滤制得菌悬液，将菌悬液接种到种子培养基中进行培养，得到红曲霉菌种；然后制备红曲霉菌种培养基，先将鱼粉、葛根粉、大豆粉、洛伐他汀、蒸馏水和氨水等制得发酵培养基，然后将发酵培养基的pH调节为3.5，再在其中加入诱导剂H-Pen，制得培养基；再将红曲霉菌种接种培养基中培养，制得诱变红曲霉孢子菌孢子，对其进行冲洗，制得悬液，通过离心机离心，得到红曲霉孢子菌，最后将制得的红曲霉孢子菌进行提取、浓缩和干燥,提取莫纳克林；通过红曲菌株自诱导的培育方法，可有效提高培养基中红曲菌株的产量，进而提高红曲菌株中莫纳克林K及抗癌成分产量。具体实施方式实施例1一种红曲霉株的培育方法，包括以下步骤：S1：红曲霉菌种培养1)先将红曲米与蒸馏水按5:2的比例混合，并经过研磨机制得米浆，然后通过过滤器过滤得到菌悬液，备用；2)将步骤1)制得的菌悬液通过吸管接种到在灭菌后的种子培养基中，并在38℃的摇床内培养10天，得到红曲霉菌种，备用；S2：红曲霉菌种培养基的制备1)鱼粉15份、麸皮5份、复合氨基酸6份、EM菌种9份、磷酸氢二钾3份、葛根粉7份、大豆粉7份和洛伐他汀3份放入容器内，然后加入蒸馏水30份、氨水30份，在40℃的条件下,使用搅拌棒以30r/min的速度搅拌15min，使各物料混合均匀，再通过高压蒸汽对其进行灭菌，制得发酵培养基，备用；2)在步骤1)得到发酵培养基中加入pH调节剂，调节发酵培养基的pH为3.5，备用；3)在pH为3.5的发酵培养基中加入诱导剂H-Pen1.5份，通过搅拌棒以40r/min的速度搅拌50min，制得培养基，备用；S3：诱变红曲霉孢子菌1)将S1中得到的红曲霉菌种接种到S2制得的培养基中，培养温度为30℃，培养时间为15天，红曲霉菌通过发酵培养基及诱导剂H-Pen的培养，制得诱变红曲霉孢子菌孢子，备用；2)取30mL0.8％氯化钠无菌水对步骤1)制得诱变红曲霉孢子菌孢子进行冲洗，使得红曲霉孢子脱离培养基，制得红曲霉孢子菌悬液，备用；3)将步骤2)制得的红曲霉孢子菌悬液通过离心机，在3000r/min的转速下，离心20min，得到红曲霉孢子菌，备用；S4：莫纳克林的提取1)将S3中制得的红曲霉孢子菌放入超声波提取机内，并加入乙醇12份，提取3次，然后进行过滤分离，得到滤液，再将滤液真空浓缩至原体积的1/2，并除去红曲色素，得到浓缩液，备用；2)将步骤1)制得的浓缩液在50℃下真空浓缩至粉末状，得到粉末，然后将粉末放入干燥箱内，在40℃的条件下干燥2小时,即得莫纳克林。在本实施例中，所述S1中的种子培养基为紫甘薯淀粉；所述S1中的高压蒸汽灭菌的条件压力110KPa，温度120℃，灭菌时间为12min；所述S4中的超声频率为26KHz，每次超声提取的时间为30min。实施例2一种红曲霉株的培育方法，包括以下本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种红曲霉株的培育方法，其特征在于：包括以下步骤：S1：红曲霉菌种培养1)先将红曲米与蒸馏水按4‑5:1‑2的比例混合，并经过研磨机制得米浆，然后通过过滤器过滤得到菌悬液，备用；2)将步骤1)制得的菌悬液通过吸管接种到在灭菌后的种子培养基中，并在36‑38℃的摇床内培养8‑10天，得到红曲霉菌种，备用；S2：红曲霉菌种培养基的制备1)鱼粉10‑15份、麸皮3‑5份、复合氨基酸4‑6份、EM菌种7‑9份、磷酸氢二钾1‑3份、葛根粉5‑7份、大豆粉5‑7份和洛伐他汀1‑3份放入容器内，然后加入蒸馏水20‑30份、氨水20‑30份，在30‑40℃的条件下,使用搅拌棒以20‑30r/min的速度搅拌10‑15min，使各物料混合均匀，再通过高压蒸汽对其进行灭菌，制得发酵培养基，备用；2)在步骤1)得到发酵培养基中加入pH调节剂，调节发酵培养基的pH为3.5，备用；3)在pH为3.5的发酵培养基中加入诱导剂H‑Pen1‑1.5份，通过搅拌棒以30‑40r/min的速度搅拌40‑50min，制得培养基，备用；S3：诱变红曲霉孢子菌1)将S1中得到的红曲霉菌种接种到S2制得的培养基中，培养温度为30℃，培养时间为12‑15天，红曲霉菌通过发酵培养基及诱导剂H‑Pen的培养，制得诱变红曲霉孢子菌孢子，备用；2)取20‑30mL0.8％氯化钠无菌水对步骤1)制得诱变红曲霉孢子菌孢子进行冲洗，使得红曲霉孢子脱离培养基，制得红曲霉孢子菌悬液，备用；3)将步骤2)制得的红曲霉孢子菌悬液通过离心机，在2800‑3000r/min的转速下，离心15‑20min，得到红曲霉孢子菌，备用；S4：莫纳克林的提取1)将S3中制得的红曲霉孢子菌放入超声波提取机内，并加入乙醇10‑12份，提取2‑3次，然后进行过滤分离，得到滤液，再将滤液真空浓缩至原体积的1/2，并除去红曲色素，得到浓缩液，备用；2)将步骤1)制得的浓缩液在45‑50℃下真空浓缩至粉末状，得到粉末，然后将粉末放入干燥箱内，在30‑40℃的条件下干燥1‑2小时,即得莫纳克林。...

【技术特征摘要】
1.一种红曲霉株的培育方法，其特征在于：包括以下步骤：S1：红曲霉菌种培养1)先将红曲米与蒸馏水按4-5:1-2的比例混合，并经过研磨机制得米浆，然后通过过滤器过滤得到菌悬液，备用；2)将步骤1)制得的菌悬液通过吸管接种到在灭菌后的种子培养基中，并在36-38℃的摇床内培养8-10天，得到红曲霉菌种，备用；S2：红曲霉菌种培养基的制备1)鱼粉10-15份、麸皮3-5份、复合氨基酸4-6份、EM菌种7-9份、磷酸氢二钾1-3份、葛根粉5-7份、大豆粉5-7份和洛伐他汀1-3份放入容器内，然后加入蒸馏水20-30份、氨水20-30份，在30-40℃的条件下,使用搅拌棒以20-30r/min的速度搅拌10-15min，使各物料混合均匀，再通过高压蒸汽对其进行灭菌，制得发酵培养基，备用；2)在步骤1)得到发酵培养基中加入pH调节剂，调节发酵培养基的pH为3.5，备用；3)在pH为3.5的发酵培养基中加入诱导剂H-Pen1-1.5份，通过搅拌棒以30-40r/min的速度搅拌40-50min，制得培养基，备用；S3：诱变红曲霉孢子菌1)将S1中得到的红曲霉菌种接种到S2制得的培养基中，培养温度为30℃，培养时间为12-15天，红曲霉菌通过发酵培养基及诱导...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏放军，
申请(专利权)人：夏放军，
类型：发明
国别省市：广东,44