一种蛋白琥珀酸铁的制备方法技术

本发明专利技术涉及制药技术领域，具体公开了一种高酰化度蛋白琥珀酸铁的制备方法。在目前蛋白琥珀酸铁制备方法的基础上，通过制备酰化度高（酰化度＞99.3%）的琥珀酰蛋白，最终制备酰化度高的蛋白琥珀酸铁，增加其亲水性基团，增大其水溶解性，降低其水溶液黏度，解决了蛋白琥珀酸铁口服溶液黏度大、沉降物多的问题。

A Method for Preparing Iron Protein Succinate

The invention relates to the field of pharmaceutical technology, in particular to a preparation method of high acylation degree protein ferric succinate. On the basis of the present preparation method of ferric protein succinate, by preparing succinic protein with high acylation degree (acylation degree > 99.3%) and finally preparing ferric protein succinate with high acylation degree, we can increase its hydrophilic group, increase its water solubility, reduce its water solution viscosity, and solve the problem of high viscosity of ferric protein succinate oral solution. The problem of more sediments.

【技术实现步骤摘要】
一种蛋白琥珀酸铁的制备方法
本专利技术涉及制药
，具体涉及一种高酰化度蛋白琥珀酸铁的制备方法。
技术介绍
蛋白琥珀酸铁中的铁与乳剂琥珀酸蛋白结合，形成铁-蛋白络合物，用以治疗各种缺铁性贫血。其结构如下：蛋白琥珀酸铁在pH值小于4时呈沉淀物形式，而在酸碱度pH较高时(pH7.5～8)又重新变为可溶性物质。此外，蛋白琥珀酸铁不能被胃蛋白酶消化，却在中性pH值时可被胰蛋白酶水解。由于蛋白琥珀酸铁的这些性质，其所含的铁受蛋白膜的保护而不同胃液中的盐酸和胃蛋白酶发生反应，因而不会造成胃黏膜损伤。蛋白琥珀酸铁中的铁在十二指肠内开始释放，因为正常pH值的升高使得这种化合物重新变得可溶，并且使蛋白膜被胰蛋白酶所消化，释放出的铁非常有利于机体的生理吸收，却又不会形成太高的吸收峰；事实上，它呈现一种恒定的吸收趋势，在机体的各个部位逐渐达到吸收与贮存的最佳平稳状态。1987年，意大利泛马克大药厂研制出一种名为蛋白琥珀酸铁(iron-proteinsuccinylate，简称ISP)的纳米多肽类蛋白补铁药物，在意大利成功上市并在全球20多个国家包括西班牙、葡萄牙、希腊、阿根廷、韩国、中国等陆续上市销售。蛋白琥珀酸铁口服溶液由西班牙ITALFARMACOS.A.公司在国内申请进口已经批准，商品名(中文)菲普利，商品名(英文)Ferplex。现有蛋白琥珀酸铁制备路线主要是以酪蛋白为原料，与琥珀酸酐发生酰化反应生成琥珀酰蛋白，三价铁离子再与琥珀酰蛋白发生载铁反应，生成蛋白琥珀酸铁。反应式如下：US4493829公开了一种蛋白琥珀酸铁的制备方法。以奶粉为原料，碱性条件下(pH7.5～8)与琥珀酸酐进行酰化反应，反应完毕后，反应液离心或过滤，滤液中加入盐酸酸化(pH2.5～3)使沉淀，离心或过滤取沉淀得琥珀酰蛋白。琥珀酰蛋白分散于水中，在碱性条件(pH7.5)下溶解，加入三氯化铁溶液进行载铁反应，反应完毕后过滤，得蛋白琥珀酸铁粗品。蛋白琥珀酸铁粗品分散于水中，在碱性条件(pH7.5)下溶解，过滤，得溶液。可经以下方法制备得蛋白琥珀酸铁：1)经酸化(pH2.5)、过滤、真空干燥。2)溶液经透析去除氯化钠后，冷冻干燥或喷雾干燥。此方法制备所得产物酰化度为95％。CN102838667公开了一种蛋白琥珀酸铁的制备方法。以酪蛋白为原料，碱性条件下(pH9.0～10.0)与琥珀酸酐进行酰化反应，反应完毕后，离心过滤，滤液中加入盐酸酸化(pH1～4)使沉淀，离心取沉淀得琥珀酰蛋白。琥珀酰蛋白分散于水中，在碱性条件(pH9.0～10.0)下溶解，离心，得琥珀酰蛋白溶液。加入三氯化铁溶液，同时加入氢氧化钠保持反应液pH9.0～10.0进行载铁反应，反应完毕后离心，得溶液。加入盐酸酸化(pH1～4)使沉淀，离心得滤饼。再分散于水中，在碱性条件(pH9.0～10.0)下溶解，酸化(pH1～4)，离心得滤饼。再分散于水中，在碱性条件(pH9.0～10.0)下溶解，离心，所得溶液经1.2μm陶瓷膜精滤后，酸化(pH1～4)，离心得滤饼，冷冻干燥后得蛋白琥珀酸铁。此方法制备所得产物酰化度为95.0％～96.8％。上述蛋白琥珀酸铁口服溶液配制过程中，一般存在蛋白琥珀酸铁溶解性差、溶解速度慢，且配制所得口服溶液黏度大、沉降物较多等问题。蛋白琥珀酸铁溶液黏度大，会导致在口服溶液配制过程中通过微孔过滤去除微生物的操作过程难以进行。酪蛋白在酰化反应中被酰化的氨基与酪蛋白初始游离氨基的百分比被称作酰化度。酰化度越高的琥珀酰蛋白，其水溶性越好、水溶液黏度越低、载铁能力越强，相应最终制备所得蛋白琥珀酸铁水溶性好、水溶液黏度低。在目前蛋白琥珀酸铁制备方法的基础上，可通过提高蛋白琥珀酸铁的酰化度、增加其亲水性基团、增大其水溶解性以及降低其水溶液黏度，来解决蛋白琥珀酸铁口服溶液配制过程中溶解速度慢、口服溶液黏度大以及沉降物多的问题。
技术实现思路
针对现有技术中存在的不足，本专利技术的目的在于提供了一种高酰化度(酰化度>99％)、水溶解性好、水溶液黏度低、滤膜通过性好、杂质含量低且质量稳定的蛋白琥珀酸铁的制备方法，所述方法包括如下步骤：(1)、于反应容器中加入酪蛋白和10～15倍酪蛋白重量的水，搅拌下加入1mol/L～4mol/L的氢氧化钠溶液调节反应液的pH至7.0～10.0使酪蛋白溶解。再缓慢分多批加入总重量与酪蛋白重量比例为1:0.2～1:0.4的琥珀酸酐，加琥珀酸酐的同时加入1mol/L～4mol/L浓度的氢氧化钠溶液保持反应液pH＝7.0～10.0，琥珀酸酐加入完毕后，继续搅拌反应30～45min，再向反应液中加入1mol/L～5mol/L的盐酸调节pH＝2～3，继续搅拌30～45min，过滤、将所得固体水洗至洗出液的pH＝7，得琥珀酰蛋白湿固体。(2)、步骤(1)所得琥珀酰蛋白湿固体用酪蛋白投料量5～7倍重量的水分散，搅拌下加入1mol/L～4mol/L的氢氧化钠溶液调节反应液pH＝4.1～4.8使琥珀酰蛋白溶解。离心或过滤(滤材孔径为120～3μm)后，得琥珀酰蛋白溶液。(3)、将1wt％～10wt％的三氯化铁水溶液缓慢加入至步骤(2)所得琥珀酰蛋白溶液中，琥珀酰蛋白与铁元素的重量比为1:0.45～1:0.55，加入完毕后，继续搅拌30～45min，过滤、将所得滤饼水洗至洗出液的pH＝7，得蛋白琥珀酸铁粗品湿固体。(4)、步骤(3)所得蛋白琥珀酸铁粗品湿固体用酪蛋白投料量10～15倍重量的水分散，搅拌下加入1mol/L～4mol/L的氢氧化钠溶液调节反应液pH＝7.0～10.0使蛋白琥珀酸铁粗品溶解。经5μm滤膜初滤后，再经1μm滤膜精滤，所得溶液中加入1mol/L～5mol/L的盐酸调节pH＝2～3，过滤，所得固体水洗至洗出液的pH＝7，得蛋白琥珀酸铁湿品。(5)、将步骤(4)所得蛋白琥珀酸铁湿品用摇摆制粒机10～50目制粒，再置沸腾干燥机干燥得蛋白琥珀酸铁。进一步，步骤2)中所述的加入1mol/L～4mol/L氢氧化钠溶液调节反应液pH＝4.1。进一步，步骤2)中所述的滤饼用酪蛋白投料量5倍重量水分散。进一步，琥珀酸酐总重量与酪蛋白重量比例为3:1。进一步，步骤(1)中将琥珀酸酐分15-25次加入酪蛋白溶液中。进一步，步骤(5)中干燥的具体条件是：先在20～30℃下干燥0.5～1h，再升温至50～70℃后干燥2～3h。更进一步，步骤(5)中干燥的具体条件是：先在30℃下干燥0.5h，再升温至70℃后干燥2h。本专利技术提供一种蛋白琥珀酸铁的制备方法，以酪蛋白为原料，经琥珀酸酐酰化后制备得琥珀酰蛋白，再与三价铁络合发生载铁反应制备得蛋白琥珀酸铁粗品，最后经精制制备得蛋白琥珀酸铁。本专利技术制备所得琥珀酰蛋白酰化度高于99％，水溶性好，水溶液黏度低，滤膜通过性好、杂质含量低、收率高。本专利技术制备所得蛋白琥珀酸铁产品的特性，极大地弥补了现有方法制备蛋白琥珀酸铁在后续蛋白琥珀酸铁口服溶液配置过程中溶解速度慢、溶液黏度高、溶液沉降物较多的不足。具体实施方式下面对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。以下实施例中原料为食品级酪蛋白，购买于甘肃华羚酪蛋白股份有限公司。实施例1一种蛋白琥珀酸铁的制备方法，包括以下步骤：于5L的反应瓶中加入1.2Kg纯化水，搅拌本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种蛋白琥珀酸铁的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1）于反应容器中加入酪蛋白和10~15倍重量水，搅拌下加入1mol/L~4mol/L氢氧化钠溶液调节反应液pH=7.0~10.0使酪蛋白溶解，再分批次加入总重量与酪蛋白重量比例为1:0.2~1:0.4的琥珀酸酐，同时加入1mol/L~4mol/L氢氧化钠溶液保持反应液pH=7.0~10.0，琥珀酸酐加入完毕后，继续搅拌反应30~45min，再向反应液中加入1mol/L~5mol/L盐酸调节pH=2~3，继续搅拌30~45min，过滤、水洗，得琥珀酰蛋白湿固体；2）步骤（1）的琥珀酰蛋白湿固体用酪蛋白投料量5~7倍重量水分散，搅拌下加入1mol/L~4mol/L氢氧化钠溶液调节反应液pH=4.1~4.8使琥珀酰蛋白溶解，离心或过滤后，得琥珀酰蛋白溶液；3）将1wt%~10wt %的三氯化铁溶液加入至步骤（2）的琥珀酰蛋白溶液中，琥珀酰蛋白与铁元素的重量比为1:0.45~1:0.55，加入完毕后，继续搅拌30~45min，过滤、水洗沉淀，得蛋白琥珀酸铁粗品湿固体；4）步骤（3）的蛋白琥珀酸铁粗品湿固体用酪蛋白投料量10~15倍重量水分散，搅拌下加入1mol/L~4mol/L氢氧化钠溶液调节反应液pH=7.0~10.0使蛋白琥珀酸铁粗品溶解，将上述反应液经5μm滤膜初滤，再经1μm滤膜精滤后，加入1mol/L~5mol/L盐酸调节pH=2~3，过滤，所得固体水洗，得蛋白琥珀酸铁湿品；5）将步骤（4）所得蛋白琥珀酸铁湿品，用摇摆制粒机10~50目制粒，再置沸腾干燥机中干燥，得蛋白琥珀酸铁。...

【技术特征摘要】
1.一种蛋白琥珀酸铁的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1）于反应容器中加入酪蛋白和10~15倍重量水，搅拌下加入1mol/L~4mol/L氢氧化钠溶液调节反应液pH=7.0~10.0使酪蛋白溶解，再分批次加入总重量与酪蛋白重量比例为1:0.2~1:0.4的琥珀酸酐，同时加入1mol/L~4mol/L氢氧化钠溶液保持反应液pH=7.0~10.0，琥珀酸酐加入完毕后，继续搅拌反应30~45min，再向反应液中加入1mol/L~5mol/L盐酸调节pH=2~3，继续搅拌30~45min，过滤、水洗，得琥珀酰蛋白湿固体；2）步骤（1）的琥珀酰蛋白湿固体用酪蛋白投料量5~7倍重量水分散，搅拌下加入1mol/L~4mol/L氢氧化钠溶液调节反应液pH=4.1~4.8使琥珀酰蛋白溶解，离心或过滤后，得琥珀酰蛋白溶液；3）将1wt%~10wt%的三氯化铁溶液加入至步骤（2）的琥珀酰蛋白溶液中，琥珀酰蛋白与铁元素的重量比为1:0.45~1:0.55，加入完毕后，继续搅拌30~45min，过滤、水洗沉淀，得蛋白琥珀酸铁粗品湿固体；4）步骤（3）的蛋白琥珀酸铁粗品湿固体用酪蛋白投料量10~15倍重量水分散，搅...

【专利技术属性】
技术研发人员：王革，吴波，谢树伟，陈蔚江，
申请(专利权)人：武汉先路医药科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北,42