本发明专利技术公开了促进三叶草生长和/或提高三叶草产量的方法及其所用菌剂。该促进三叶草生长和/或提高三叶草产量的方法，包括将三叶草的种子和菌剂混匀后再播入土壤的步骤；所述菌剂含有三叶草根瘤菌或/和所述三叶草根瘤菌的代谢物；所述三叶草根瘤菌的菌株号为92‑29，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.15533。本发明专利技术的三叶草根瘤菌92‑29在酸性土壤条件下显著促进三叶草生长并显著提高三叶草产量：提高三叶草的株高、结瘤率、根瘤数量和/或根瘤重量；增加三叶草的植株鲜重和干重，增加三叶草的鲜草产量和干草产量。本发明专利技术在三叶草种植业中具有广阔的应用前景。
【技术实现步骤摘要】
促进三叶草生长和/或提高三叶草产量的方法及其所用菌剂
本专利技术涉及农业微生物领域中促进三叶草生长和/或提高三叶草产量的方法及其所用菌剂。
技术介绍
三叶草属(Trifolium)为豆科中分布最广的一属，是短期多年生豆科草本植物。三叶草种类遍及全世界，约有360多个种,其中农业经济价值较高的约25种。我国是草地大国，三叶草在我国广泛种植，主要分布在温带至热带地区，南至云南，北至黑龙江均有野生种和栽培种的分布，我国栽培较多的为红三叶、白三叶和杂三叶。三叶草是具有固氮能力的优良牧草，含丰富的蛋白质和矿物质，耐寒性强，绿期很长，同时也很耐热，对土壤要求不严，在酸性和碱性土壤上均能适应，其耐修剪、耐践踏，再生能力强，抗有害气体污染和抗病虫害能力强，还可以提高土壤肥力，保持土壤温度控制杂草生长，增加地面覆盖和减少土壤侵蚀。三叶草可作为家畜优良饲料、农作物的良好前茬、绿肥、也是良好的水土保持植物与庭园绿化植物以及蜜源和药材。氮素是植物生长中最重要的营养元素之一，根瘤菌是一类能侵染豆科植物根部(少数是茎部)形成根瘤进行生物固氮的细菌，根瘤菌与豆科植物共生体系是生物固氮中作用最强的体系，土壤中的固氮微生物将空气中的氮气转化为植物可吸收的氨，所固定的氮约为生物固氮总量的65％。当前，在退化土壤中种植豆科植物越来越受到人们的关注，因为退化土壤中氮素营养比较贫乏，通过豆科植物与根瘤菌的共生固氮作用可以提高土壤肥力，接种根瘤菌能够提高豆科植物的产量和氮储藏量。如果种植的豆科植物没有相应的高效根瘤菌株与之共生结瘤并固定空气中的氮素，它们将完全依赖土壤中的结合态氮，不但不能补充反而会消耗土壤中的氮素，导致土壤肥力下降。因此，为了充分发挥根瘤菌与豆科植物的共生固氮作用，以维持土壤氮素平衡，需要筛选高效菌株进行人工接种。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是如何在酸性土壤中显著促进三叶草生长和/或提高三叶草产量。为了解决以上技术问题，本专利技术提供了促进三叶草生长和/或提高三叶草产量的菌剂。本专利技术所提供的促进三叶草生长和/或提高三叶草产量的菌剂含有三叶草根瘤菌(Rhizobiumtrifolii)或/和所述三叶草根瘤菌(Rhizobiumtrifolii)的代谢物；所述三叶草根瘤菌(Rhizobiumtrifolii)的菌株号为92-29，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCCNo.15533。三叶草根瘤菌92-29属革兰氏染色阴性，短小杆状，无芽孢，具端生单鞭毛，能运动。菌体大小为0.7×2.2μm。在酵母汁甘露醇琼脂培养基平板上生长，菌落呈圆形微凸起，边缘整齐，表面光滑较湿润，浅乳白色，菌苔粘稠。三叶草根瘤菌92-29具有序列表中序列1的16SrDNA序列。含有所述菌剂的三叶草根瘤菌种衣剂或含有所述菌剂的生物肥料也属于本专利技术的保护范围。含有所述菌剂的丸衣三叶草种子也属于本专利技术的保护范围。上文中，上述菌剂的活性成分可为三叶草根瘤菌92-29或/和三叶草根瘤菌92-29的代谢物，上述菌剂的活性成分还可含有其他生物成分或非生物成分，上述菌剂的其他活性成分本领域技术人员可根据菌剂对三叶草植株重量和/或植株高度促进效果确定。上文中，所述菌剂还可包括载体。所述载体可为固体载体或液体载体。所述固体载体为矿物材料、生物材料；所述矿物材料可为草炭、粘土、滑石、高岭土、蒙脱石、白碳、沸石、硅石和硅藻土中的至少一种；所述生物材料为各类作物的秸秆、松壳、稻草、花生壳、玉米粉、豆粉、淀粉、草炭和动物的粪便中的至少一种；所述液体载体可为水；所述菌剂中，三叶草根瘤菌92-29或/和三叶草根瘤菌92-29的代谢物可以为被培养的活细胞、活细胞的发酵液、细胞培养物的滤液或细胞与滤液的混合物的形式存在。所述菌剂的剂型可为多种剂型，如液剂、乳剂、悬浮剂、粉剂、颗粒剂、可湿性粉剂或水分散粒剂。上文中，根据需要，所述菌剂中还可添加表面活性剂(如吐温20、吐温80等)、粘合剂、稳定剂(如抗氧化剂)、pH调节剂等。为了解决以上技术问题，本专利技术提供了促进三叶草生长和/或提高三叶草产量的方法。本专利技术所提供的促进三叶草生长和/或提高三叶草产量的方法，包括将三叶草的种子和所述菌剂混匀后再播入土壤的步骤。上述文中，所述促进三叶草生长可为提高三叶草的株高、结瘤率、根瘤数量和/或根瘤重量。上述文中，所述促进三叶草生长可为促进三叶草在中性介质或酸性介质中的生长。上述文中，所述提高三叶草产量可为提高三叶草的单株重量(鲜重和/或干重)或单位面积的产量。上述文中，所述提高三叶草产量可为提高三叶草在中性介质或酸性介质中的产量。上述文中，所述介质可为土壤。上述文中，所述酸性介质的pH值可为大于等于4.2小于7，如4.8-6.2。上述文中，所述三叶草可为白三叶。上述菌剂、上述三叶草根瘤菌种衣剂和/或上述丸衣三叶草种子在促进三叶草生长和/或提高三叶草产量中的应用也属于本专利技术的保护范围。实验证明，本专利技术的三叶草根瘤菌92-29在酸性(pH值为4.8-6.2)土壤条件下显著促进三叶草生长并显著提高三叶草产量：提高三叶草的株高、结瘤率、根瘤数量和/或根瘤重量；增加三叶草的植株鲜重和干重，增加三叶草的鲜草产量和干草产量。本专利技术在三叶草种植业中具有广阔的应用前景。保藏说明菌种名称：三叶草根瘤菌(Rhizobiumtrifolii)菌株编号：92-29保藏机构：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏机构简称：CGMCC地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号保藏日期：2018年3月30日保藏中心登记入册编号：CGMCCNo.15533具体实施方式下面结合具体实施方式对本专利技术进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本专利技术，而不是为了限制本专利技术的范围。以下提供的实施例可作为本
普通技术人员进行进一步改进的指南，并不以任何方式构成对本专利技术的限制。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。下述实施例中的固体培养基的配制方法如下：丙三醇5ml，甘露醇5g，酵母浸粉1g，K2HPO40.5g，无水MgSO40.2g，CaSO4·2H2O0.2g，NaCl0.1g，1％(NH4)6Mo7O24·4H2O1ml、1％H3BO31ml，琼脂20g，用水定容至1000ml，调pH值为6.8-7.0，121℃灭菌30min。下述实施例中的液体培养基的配制方法如下：丙三醇5ml，甘露醇5g，酵母浸粉1g，K2HPO40.5g，无水MgSO40.2g，CaSO4·2H2O0.2g，NaCl0.1g，1％(NH4)6Mo7O24·4H2O1ml、1％H3BO31ml，用水定容至1000ml，调pH值为6.8-7.0，121℃灭菌30min。下述实施例中的三叶草根瘤菌(Rhizobiumtrifolii)ACCC18019于1981年12月19日收藏于中国微生物菌种保藏管理委员会农业微生物中心(简称ACCC，地址：北京市海淀区中关村南大街12号，中国农业科学院农业资源与农业区划研究所，邮编100081)，自该收藏日起公众可从中国微生物菌种保藏管理委员会农业微生物中心获得该菌株。三叶草根瘤菌(Rhizobiumtrifoli本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.促进三叶草生长和/或提高三叶草产量的菌剂，其特征在于：所述菌剂含有三叶草根瘤菌(Rhizobium trifolii)或/和所述三叶草根瘤菌(Rhizobium trifolii)的代谢物；所述三叶草根瘤菌(Rhizobium trifolii)的菌株号为92‑29，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.15533。
【技术特征摘要】
1.促进三叶草生长和/或提高三叶草产量的菌剂，其特征在于：所述菌剂含有三叶草根瘤菌(Rhizobiumtrifolii)或/和所述三叶草根瘤菌(Rhizobiumtrifolii)的代谢物；所述三叶草根瘤菌(Rhizobiumtrifolii)的菌株号为92-29，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCCNo.15533。2.根据权利要求1所述的菌剂，其特征在于：所述促进三叶草生长为提高三叶草的株高、结瘤率、根瘤数量和/或根瘤重量，所述提高三叶草产量为提高三叶草的单株重量或单位面积的产量。3.根据权利要求1或2所述的菌剂，其特征在于：所述菌剂的活性成分为所述三叶草根瘤菌(Rhizobiumtrifolii)或/和所述三叶草根瘤菌(Rhizobiumtrifolii)的代谢物。4.含有权利要...
【专利技术属性】
技术研发人员：马晓彤，刘慧琴，顾金刚，李世贵，张瑞福，
申请(专利权)人：中国农业科学院农业资源与农业区划研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11
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