羊蹄甲属萃取物及其用途制造技术

在此揭示一种羊蹄甲属植物萃取物的新颖用途，所述羊蹄甲属植物萃取物能够向上调节脑啡肽酶、诱导细胞自噬作用、保护神经元免于类淀粉病变或Tau蛋白病变和/或促进轴突生长；因此，本揭示内容的羊蹄甲属植物萃取物能作为食品添加物，以预防或治疗与类淀粉蛋白相关的神经退化疾病，以期改善或缓减与类淀粉相关的神经退化疾病的症状。

Bauhinia extract and its uses

This paper reveals a novel use of extracts from the genus Ilex, which can up-regulate enkephalinase, induce autophagy, protect neurons from amyloid or Tau protein lesions and/or promote axonal growth. Therefore, the extracts of Ilex can be used as extracts. It is a food additive to prevent or treat amyloid-related neurodegenerative diseases with a view to improving or alleviating the symptoms of amyloid-related neurodegenerative diseases.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】羊蹄甲属萃取物及其用途
本揭示内容是是关于一种羊蹄甲属植物萃取物的新颖用途，特别是本揭示内容是关于羊蹄甲属植物萃取物作为用以治疗神经退化性疾病的食品添加物的用途。【现有技术】羊蹄甲(BauhiniavariegataLinn.(Fabaceae))是印度传统药方中常见的药物。不同的植物部位(如，花苞、花、茎、茎皮、叶、种子和根)可用来治疗气喘、黄胆(jaundice)、结核病(tuberculosis)、痲疯病(leprosy)和皮肤病。已知羊蹄甲的茎皮具有抗肿瘤、抗溃疡和抗菌活性。近期的动物研究更指出羊蹄甲乙醇萃取物(ethanolextractofB.variegate,BVEE)对于顺铂引发的肾脏疾病有显著的肾保护作用，且对于四氧嘧啶(alloxan)引发的高血糖活性有抗糖尿病效果。阿兹海默症(Alzheimer’sdisease,AD)是一渐进式的神经退化性疾病，也是最常见的老年失智症。各界普遍认为阿兹海默症患者体内类淀粉蛋白(Aβ)和Tau蛋白的堆积是引发神经退化和相关致病途径的主因，而这两种现象导致阿兹海默症的发生与进展。已证实在人类偶发型阿兹海默症患者中会有截短的Tau蛋白，其能够诱发AD患者体内的Tau蛋白聚集与神经纤维缠结(neurofibrillarytangles)。越来越多证据显示，脑啡肽酶(neprilysin；NEP)是负责清除Aβ的主要内切肽酶，在老化过程和阿兹海默症患者中可观察到脑啡肽酶的功能缺损。同样地，在脑啡肽酶剔除小鼠中可观察到脑啡肽酶表现量和脑内Aβ累积量呈负相关。正因如此，在开发促进Aβ降解的阿滋海默症药物时，脑啡肽酶是公认最有潜力的药物标的。再者，细胞自噬体为清除Tau蛋白最主要的胞内液泡。此种由细胞自噬作用介导的降解系统，对于控制Aβ平衡亦扮演重要的角色。正因其具有保护神经元的功能，细胞自噬作用缺损与多种神经退化性疾病(包含AD)的发病机制有关。越来越多的证据显示，自噬体可以吞入受损的胞器和异常的蛋白质聚集物，以便在溶酶体融合后，将该多个内化的胞器与蛋白(internalizedcargo)清除。因此，可合理推知可诱导细胞自噬作用的药剂，能借由促进细胞自噬作用来清除异常蛋白聚集物(包含Aβ和Tau)，而产生神经保护功效。本案专利技术人借由Tau蛋白病变斑马鱼模型、脑啡肽酶细胞分析以及自噬作用细胞分析，意外地发现羊蹄甲属植物萃取物，能够同时抑制Tau蛋白病变引起的神经毒性、增强脑啡肽酶活性和诱导自噬活性；因此，本专利技术证实羊蹄甲属植物萃取物能够作为健康食品食品添加物，以改善神经退化性疾病患者整体的记忆力和/或认知能力。
技术实现思路
本揭示内容是关于羊蹄甲属植物萃取物于向上调节脑啡肽酶、诱导自噬作用、保护神经元避免类淀粉病变或Tau蛋白病变发生和/或促进轴突生长的新颖用途，因此，本揭示内容羊蹄甲属植物萃取物可以作为食品添加物，用来预防或治疗类淀粉相关的神经退化性疾病，或用于减缓与类淀粉相关的神经退化性疾病的疾病进程及症状。再者，本揭示内容第一方式是提供一种用以治疗患有或疑似患有类淀粉相关神经退化性疾病个体的方法。所述方法包含以下步骤，经口施用一治疗有效量的羊蹄甲属植物萃取物至所述个体，以改善或缓减与类淀粉相关的神经退化疾病的症状。依据本揭示内容的实施方式，所述羊蹄甲属植物(Bauhiniaspp.)是羊蹄甲(Bauhiniavariegate)或艳紫荆(Bauhiniaxblakeana)。依据本揭示内容的实施方式，所述羊蹄甲属植物萃取物可以是水萃取物或乙醇萃取物。依据本揭示内容某些实施方式，所述羊蹄甲属植物水萃取物是以1:5(w/v)至1:20(w/v)的比例，混合羊蹄甲属植物茎粉末和水，并且在约30-100℃下处理0.5-5小时后所制得。在较佳的实施方式中，所述羊蹄甲属植物水萃取物是以1:10(w/v)至1:20(w/v)的比例，混合羊蹄甲属植物茎粉末和水，并且在约50℃下处理2小时后所制得。依据本揭示内容其他实施方式，所述羊蹄甲属植物的乙醇萃取物是以1:5(w/v)至1:20(w/v)的比例，混合羊蹄甲属植物茎粉末和95％乙醇(vol％)，并且在约15-35℃下处理1-10天后所制得。在较佳的实施方式中，所述羊蹄甲属植物的乙醇萃取物是以1:10(w/v)的比例，混合羊蹄甲属植物茎粉末和95％乙醇(vol％)，在约25℃下处理7天后所制得。依据本揭示内容的实施方式，所述羊蹄甲属植物萃取物的口服剂量约为5-50毫克/公斤。在较佳的实施方式中，所述羊蹄甲属植物萃取物的口服剂量约为20毫克/公斤。依据本揭示内容的实施方式，可利用本揭示内容羊蹄甲属植物萃取物治疗的神经退化性疾病是选自于以下成员所组成的群组：阿兹海默症、亨汀顿氏舞蹈症(Huntington’sdisease,HD)、血管型失智症(vasculardementia,VD)、颞叶型失智症(frontotemporaldementia,FTD)、语意性失智症(semanticdementia,SD)和路易氏体失智症(dementiawithLewybodies,DLB)、肌肉萎缩性脊髓侧索硬化症(amyotrophiclateralsclerosis,ALS)以及帕金森氏症(Parkinson’sdisease,PD)。在参阅下文实施方式后，本专利技术所属
中具有通常知识者当可轻易了解本专利技术的基本精神及其他专利技术目的，以及本专利技术所采用的技术手段与实施方式。【图式简单说明】为让本专利技术的上述与其他目的、特征、优点与实施例能更明显易懂，所附图式的说明如下：图1显示在斑马鱼胚胎中，经羊蹄甲植物萃取物处理能够减少由人类Tau-GFP过量表现引起的神经元死亡。图框(A)：在单细胞期(one-cellstage)内，将pHuC-hTau-GFP表现质体注射至斑马鱼胚胎中；接着，于受精后24、48和72小时(hourspost-fertilization；hpf)，观察绿荧光蛋白(GFP)标记的神经元细胞。在24hpf胚胎中，能够在神经元细胞内观察到部分绿荧光蛋白讯号，其后，在48hpf胚胎中，绿荧光蛋白讯号分解成小点并减少。然而，仍有其他绿荧光蛋白讯号完整保留在神经元细胞中。图框(B)：计算48hpf胚胎中，呈现绿荧光蛋白讯号的神经元数量，并将结果分为二组，分别是少于2神经元(0-2个)和较多神经元(3-5个)。羊蹄甲乙醇萃取物(BVEE)处理使胚胎使其具有更多神经元(图1图框(A))；有46％的胚胎具有3-5个神经元(图1图框(B))；图2显示羊蹄甲乙醇萃取物处理能够诱导促进斑马鱼胚胎中的轴突生长。图框(A)：在单细胞期内，先将pHuC-GFP表现质体注入至斑马鱼胚胎中；注射后8小时，再以羊蹄甲乙醇萃取物或二甲基亚砜(DMSO)(对照组)处理经注射的胚胎。图框(B)：于处理后40小时计算出现显著轴突生长的斑马鱼数量；图3显示羊蹄甲乙醇萃取物处理能够诱导自噬作用。图框(A)：GFP-LC3-HEK细胞在37℃下，以羊蹄甲乙醇萃取物(50微克/毫升)处理24小时；利用自噬作用诱导剂(即，雷帕霉素)和自噬作用抑制剂(即，3-MA)作为对照组。利用SDS-PAGE解析含等量蛋白的细胞裂解物，再以抗p62(上本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用羊蹄甲属植物萃取物制备医药品的用途，其特征在于，该医药品是用来治疗患有或疑似患有与类淀粉相关的神经退化性疾病的个体，且该羊蹄甲属萃取物的口服剂量为10‑50毫克/公斤。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.11.05 US 62/251,6381.一种利用羊蹄甲属植物萃取物制备医药品的用途，其特征在于，该医药品是用来治疗患有或疑似患有与类淀粉相关的神经退化性疾病的个体，且该羊蹄甲属萃取物的口服剂量为10-50毫克/公斤。2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，该羊蹄甲属植物是羊蹄甲或艳紫荆。3.如权利要求2所述的用途，其特征在于，该羊蹄甲属植物萃取物的口服剂量为约20毫克/公斤。4.如权利要求3所述的用途，其特征在于，该羊蹄甲属植物萃取物是一水萃取物或一乙醇萃取物。5.如权利要求3所述的用途，其特征在于，该羊蹄甲属植物水萃取物是以1:5(w/v)至1:20(w/v)的比例混合羊蹄甲属植物茎粉末和水，并且在约30-100℃下处理0.5-5小时所制得。6.如权利要求5所述的用途，其特征在于，该羊蹄甲属植物水萃取物是以1:10(w/v)的比例混合羊蹄甲属植物茎粉末和水，并且在约50℃下处理2小时所制得。7.如权利要求4所述的用途，其特征在于，该羊蹄甲属植物乙醇萃取物是以1:5(w/v)至1:20(w/v)的比例混合羊蹄甲属植物茎粉末和95％乙醇(vol％)，并且在约15-35℃下处理1-10天所制得。8.如权利要求7所述的用途，其特征在于，该羊蹄甲属植物乙醇萃取物是以1:10(w/v)的比例混合羊蹄甲属植物茎粉末和95％乙醇(vol％)，在约25℃下处理7天所制得。9.如权利要求1所述的用途，其特征在于，该神经退化性疾病是选自于以下成员所组成的群组：阿兹海默症、亨汀顿氏舞蹈症、血管型失智症、颞叶型失智症、语意性失智症和路易氏体失智症、肌肉萎缩性脊髓侧索硬化症以及帕金森氏症。10.一种治疗患有或疑似患有与类淀粉相关的神经退化性疾病个体的方法，包含：经口施用一预防或治疗有效量的羊蹄甲属植物萃取物至所述个体，以向上调节脑啡肽酶、诱导细胞自噬作用、保护神经元免于类淀粉病变或Tau蛋白病变和/或促进轴突生长，进而改善或缓减与类淀粉相关的神经退化疾病的症状。11.如权利要求10所述的方法，其特征在于，该羊蹄甲属植物是羊蹄甲或艳紫荆。12.如权利要求11所述的方法，其特征在于，该羊蹄甲属植物萃取物是一水萃取物或一乙醇萃取物。13.如权利要求12所述的方法，其特征在于，该羊蹄甲属植物水萃取物是以1:5(w/v)至1:20(w/v)的比例混合羊蹄甲属植物茎粉末和水，并且在约30-100℃下处理0.5-5小时所制得。14.如权利要求13所述的方法，其特征在于，该羊蹄甲属植物水萃取物是以1:10(w/v)的比例混合羊蹄甲属植物茎粉末...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄铨珍，陈佩烨，廖永丰，吴百凯，陈柏廷，蔡蕙冰，郑奕正，方成立，简虹琪，童天送，陈廷硕，邱淑娇，
申请(专利权)人：中央研究院，财团法人工业技术研究院，
类型：发明
国别省市：中国台湾,71