The invention discloses a BRAF V600E gene mutation detection primer, a method and a kit, which contains the primers mentioned in SEQ ID NO:1 and SEQ ID NO:2, and a detection probe. The invention adopts better primers and probes, and only needs 10 ng for sample gDNA, with sensitivity as high as 0.1%, and high specificity. It can directly judge whether there is a mutation or not according to mutation amplification curve without calculating Ct. The result is simple and direct, and has good clinical application prospects.
【技术实现步骤摘要】
BRAFV600E基因突变检测引物、方法及试剂盒
本专利技术属于生物
，具体涉及BRAFV600E基因突变检测引物、方法及试剂盒。
技术介绍
BRAF是人类最重要的原癌基因之一，位于7q34，长约190kb，编码783个氨基酸。BRAF基因突变发生于黑色素瘤、结肠癌、甲状腺癌、肺癌、肝癌和胰腺癌等恶性肿瘤中，且绝大部分突变为BRAFV600E(c.1799T>A)突变。该突变导致下游MEK-ERK信号通路持续激活，对肿瘤的生长增殖和侵袭转移至关重要。2011年，首个BRAFV600E靶向抑制剂维罗非尼被FDA批准上市，用于治疗BRAFV600E突变的晚期黑色素瘤患者，有效延长了患者无进展生存期及总生存期，取得了突破性的治疗效果。《NCCN甲状腺癌临床实践指南2016版》中，明确提出对细针穿刺活检结果出现不能判断的应对BRAF基因突变状态进行检测，有助于病理分型诊断和临床预后预测及制定个体化治疗方案。《NCCN结直肠癌临床实践指南》(2016版)中要求在使用西妥昔单抗(Erbitux/Cetuximab)或帕尼单抗(Vectibix/Panitu...
【技术保护点】
1.BRAF V600E基因突变检测引物，引物的核苷酸序列如下所示：F1：5'‑GGTGATTTTGGTCTAGCTACCGA‑3'(SEQ ID NO:1)；R1：5'‑CCATCCACAAAATGGATCCAGAC‑3'(SEQ ID NO:2)。
【技术特征摘要】
1.BRAFV600E基因突变检测引物，引物的核苷酸序列如下所示：F1：5'-GGTGATTTTGGTCTAGCTACCGA-3'(SEQIDNO:1)；R1：5'-CCATCCACAAAATGGATCCAGAC-3'(SEQIDNO:2)。2.一种BRAFV600E基因突变检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒含有权利要求1所述的引物。3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：该试剂盒还含有检测探针，其核苷酸序列如下所示：P1：5'-TGGAGTGGGTCCCATCA-3'(SEQIDNO:3)，或者为该序列的核苷酸反向互补序列。4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述探针序列5’端标记的荧光基团选自FAM、JOE、HEX、VIC、CY5、TET中一种，探针序列3’端标记的淬灭基团选自TAMRA、MGB、BHQ中一种。5.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，该试剂盒还含有荧光定量PCR反应缓冲液，dNTPs，DNApolymerase，阴性对照品，阳性对照品，外标引物F2(SEQIDNO:4)、R2(SEQIDNO:5)以及探针P2(SEQIDNO:6)，内标引物F3(SEQIDNO:7)、R3(SEQIDNO:8)以及内村探针P3(SEQIDNO:9)。6.一种BRAFV600E基因突变检测方法，其特征在于，包括以下步骤：1)...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨明，蔡兴盛，闫文瑞，曹绵旺，李梦真，邓泱泱，王春林，马志海，黄行许，杨冬成，
申请(专利权)人：广州迈景基因医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。