本发明专利技术公开了一种癌症治疗药物，包含海鞘多肽和顺铂。本发明专利技术还公开了海鞘多肽和顺铂的联用在制备癌症治疗药物方面的应用。海鞘多肽和顺铂的联用表现出明显协同增效的作用，其联用可以提高顺铂对肝癌患者的疗效和肝癌患者的生活质量。此联合用药方案为肝癌临床治疗提供了新的治疗思路和方案，具有推向肝癌临床的巨大开发潜力和应用前景。
A drug for cancer treatment and its application
The invention discloses a cancer treatment medicine comprising sea cucumber polypeptides and cisplatin. The invention also discloses the application of the combination of sea cucumber polypeptides and cisplatin in the preparation of cancer treatment drugs. The combination of sea sheath polypeptide and cisplatin shows obvious synergistic effect. The combination of sea sheath polypeptide and cisplatin can improve the curative effect of cisplatin on patients with hepatocellular carcinoma and the quality of life of patients with hepatocellular carcinoma. This combination regimen provides a new therapeutic idea and scheme for the clinical treatment of hepatocellular carcinoma, and has great development potential and application prospects to promote the clinical treatment of hepatocellular carcinoma.
【技术实现步骤摘要】
一种癌症治疗药物及应用
本专利技术属于生化与生物医药领域，具体说是一种癌症治疗药物及应用。
技术介绍
中国肝癌患者占据全球肝癌患者的1/2，肝癌是中国癌症患者中占比以及死亡率位居前三的恶性肿瘤之一。由于我国庞大的乙型以及丙型肝炎病毒携带者，中国肝癌患者数量在未来一段时间将会进一步上升。顺铂是癌症治疗的常用化疗药物，但长期使用会引起肿瘤的耐药发生，另外，顺铂有引起患者呕吐、腹泻以及脏器损伤等的副作用。现有的肝癌在治疗方案通常使用手术、介入、化疗、放疗。顺铂是常用的肝癌治疗药物，但顺铂存在很大的毒副作用，并容易使癌细胞产生耐药性，限制了顺铂的应用。海鞘多肽是从海洋生物海鞘中分离到的多肽，与人类颗粒体蛋白A高度同源，海鞘多肽可以抑制多种肿瘤细胞生长，海鞘多肽为蛋白多肽，具有副作用低、药效高的特点。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是为解决现有顺铂耐药以及毒副作用的缺陷，提供一种联合用药方案，即海鞘多肽与顺铂联合应用的方案。一种癌症治疗药物，包含海鞘多肽和顺铂。进一步地，海鞘多肽和顺铂的摩尔比为0.8-1.2:2-2.5。进一步地，癌症为肝癌。进一步地，药物是抑制肝癌生长的药物。本专利技术的另一个目的是提供一种癌症治疗药物在癌症治疗方面的应用，所述的癌症治疗药物包含海鞘多肽和顺铂。进一步地，癌症为肝癌。进一步地，癌症治疗药物抑制癌细胞的增殖并促进细胞凋亡。进一步地，癌症的细胞为肝癌细胞。进一步地，肝癌细胞为肝癌细胞HepG2以及Bel-7402细胞。申请人经过大量实验研究发现：顺铂耐药与烯醇酶-1(ENO1)相关。申请人经过大量实验研究发现：海鞘多肽可与ENO1相互作用影响肿瘤细胞代谢过程，抑制纤维蛋白酶的活性，抑制肿瘤细胞迁移以及侵袭。申请人研究发现，将环磷酰胺、顺铂、5-FU、吉西他滨、甲氨蝶呤、紫杉醇和海鞘多肽的联合使用，其顺铂和海鞘多肽协同效果最好。通过MTS检测细胞活性的方法，验证药物的协同效应，计算联合药物的CI值(CombinationIndex)，其中拮抗效应(CI>1)，叠加效应(CI＝1)，协同效应(CI<1)。结果发现海鞘多肽和顺铂的联合应用具有协同效应可以显著抑制肝癌细胞的增殖，顺铂可以增强海鞘多肽的肿瘤抑制活性。本专利技术的有益效果如下：(1)在癌症治疗特别在肝癌方面可以显著提高顺铂的治疗效果，降低顺铂剂量，降低其毒副作用。(2)具有增强海鞘多肽活性的药效优点。附图说明图1为不同化疗药物单独使用时以及和海鞘多肽联用时，对肝癌细胞HepG2的抑制率；图2A为不同浓度的海鞘多肽和顺铂的联合应用对肝癌细胞Bel-7402的抑制率协同指数的模拟曲线；图2B为不同浓度的海鞘多肽和顺铂的联合应用对肝癌细胞HepG2的抑制率协同指数的模拟曲线；图3A为肝癌细胞HepG2在不同药物处理下的生长曲线；图3B为肝癌细胞Bel-7402在不同药物处理下的生长曲线；图3C为肝癌细胞HepG2在不同药物处理下的克隆形成能力图；图3D为肝癌细胞Bel-7402在不同药物处理下的克隆形成能力图；图4A为肝癌细胞HepG2在不同药物处理下的流式细胞检测，细胞凋亡统计图；图4B为肝癌细胞Bel-7402在不同药物处理下的流式细胞检测，细胞凋亡统计图；图5A为肝癌细胞移植到裸鼠的肿瘤模型在不同药物处理肿瘤体积增长曲线图；图5B肝癌细胞移植到裸鼠的肿瘤模型在不同药物处理体重变化图。具体实施方式实施例结合说明书附图进一步说明本专利技术，但是实施例不对本专利技术做任何形式的限定。除非特别说明，本专利技术采用的试剂、方法和设备均为本
常规试剂、方法和设备。实施例1顺铂与海鞘多肽的联合应用显著抑制肝癌细胞生长海鞘多肽为蛋白干粉制剂，可以是玻璃海鞘多肽，也可以是海鞘多肽CS5931。步骤一：培养HepG2肝癌细胞，待细胞稳定后使用胰酶消化此细胞，然后取合适的细胞均匀混合后，接种到96孔板，每孔6000个，放置于在37℃、5％CO2的恒温恒湿二氧化碳培养箱中。24小时后，分别以单个药物处理，所用药物分别为环磷酰胺、顺铂、5-FU(氟尿嘧啶)、吉西他滨、甲氨蝶呤、紫杉醇及海鞘多肽；联合用药处理，所用药物分别为氟尿嘧啶+海鞘多肽、紫杉醇+海鞘多肽、环磷酰胺+海鞘多肽、顺铂+海鞘多肽、吉西他滨+海鞘多肽、甲氨蝶呤+海鞘多肽。药物处理后，HepG2肝癌细胞在37℃、5％CO2的条件下继续培养48小时后，使用MTS方法(细胞活性检测法)检测单个药物以及联合药物的细胞抑制率，筛选出具有增强海鞘多肽细胞毒活性的化疗药物。所述联合用药方案为设定两种药物联合应用，为方便评估，上述单个药物所使用的量对肿瘤细胞的抑制率在20％-60％。结果如图1，和其他化疗药物相比，海鞘多肽与顺铂联合应用对肝癌细胞HepG2具有最佳的协同效果。步骤二：根据药物IC50值，药物顺铂与海鞘多肽的摩尔比为2.29：1(作为示例性说明，药物顺铂与海鞘多肽的摩尔比也可以是2.5:1、2:1、2:0.8、2:1.2、2.5:1.2、2.5：0.8等)。使用MTS(细胞活性检测法)方法测定单个药物以及联合药物不同浓度时对肝癌细胞HepG2和Bel-7402细胞毒活性的影响，使用Chou-Talalay药物协同理论以及软件计算出联合药物的协同指数。结论，MTS结果显示顺铂与海鞘多肽联合用药优于单一用药，如图1所示；根据海鞘多肽与顺铂的协同指数，CI小于1，说明海鞘多肽和顺铂联合使用有对肝癌细胞具有协同效应，如图2A和图2B，联合用药对Bel-7402细胞的抑制率(Fa)分别为为48.22％，49.75％，57.34％，63.55％，对应的CI值分别是0.75，0.89，0.73.,0.44。联合用药对HepG2细胞的抑制率分别为为21.33％，31.17％,43.72％，57.29％，74.48％，对应的CI值分别是0.63，0.73，0.64.,0.66,0.48。实施例2海鞘多肽、顺铂、联合用药分别对肝癌细胞生长、克隆形成及细胞凋亡的作用步骤一：取适量的细胞均匀混合后，接种到96孔板。HepG2接种量为每孔6000个，Bel-7402接种量为每孔4000个。放置于在37℃、5％CO2的恒温恒湿二氧化碳培养箱中。24小时后，按照对照组(没有放任何化疗药物)、顺铂组(16.67μM)、海鞘多肽组(14.29μM)、顺铂(16.67μM)+海鞘多肽(14.29μM)组加入各个孔中，每组药物做三个复孔，在此条件下继续培养。每24小时测定一次各孔的OD值，每48小时更换新培养液，新培养液可以是1640的10％血清，共计六天，绘制各组的生长曲线。上述顺铂、海鞘多肽、顺铂+海鞘多肽的量只是示例性说明，μM表示微摩尔。所得结果，如图3A和图3B，两株肝癌HepG2及Bel-7402细胞生长曲线，对于不同药物处理组均表现为抑制作用，其中联合药物组的抑制作用最为显著，说明联合药物的抑制肿瘤作用优于单一药物组。步骤二：将HepG2及Bel-7402分别铺6孔板，两种细胞的接种量为每孔2000个。待培养24小时后，按照对照组(没有放任何化疗药物)、顺铂(16.67μM)、海鞘多肽(14.29μM)、顺铂(16.67μM)+海鞘多肽(14.29μM)加入各个孔中，放置于37℃、5％CO2的本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种癌症治疗药物，其特征在于，包含海鞘多肽和顺铂。
【技术特征摘要】
1.一种癌症治疗药物，其特征在于，包含海鞘多肽和顺铂。2.根据权利要求1所述的癌症治疗药物，其特征在于，所述的海鞘多肽和顺铂的摩尔比为0.8-1.2:2-2.5。3.根据权利要求1所述的癌症治疗药物，其特征在于，所述的癌症为肝癌。4.根据权利要求1所述的癌症治疗药物，其特征在于，所述的药物是抑制肝癌生长的药物。5.一种癌症治疗药物在癌症治疗方面的应用，其特...
【专利技术属性】
技术研发人员：林秀坤，乔淦，曹寿松，
申请(专利权)人：首都医科大学，
类型：发明
国别省市：北京,11
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