用于预测急性疼痛转变为慢性疼痛的MYO1A以及MYO1A用于治疗疼痛的用途制造技术

本发明专利技术涉及将Myo1a鉴定为急性疼痛转变为慢性疼痛的生物标志物，并鉴定为治疗靶标。本发明专利技术特别涉及用于评估受试者产生损伤诱导的慢性机械性疼痛和/或发炎诱导的慢性热性疼痛的倾向的产品和方法，并且特别适用于哺乳动物，优选人类受试者。本发明专利技术更具体地涉及优选使用MYO1A基因作为生物标志物来评估受试者产生损伤诱导的慢性机械性疼痛和/或发炎诱导的慢性热性疼痛的倾向。在本文中发明专利技术人提供了对MYO1A具有特异性的结合试剂，含有所述试剂的组合物、装置、试剂盒，以及动物模型，并进一步描述了它们用于评估受试者罹患慢性疼痛的倾向的用途。本发明专利技术还涉及用于诊断、预防、管控或治疗慢性疼痛的产品和方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于预测急性疼痛转变为慢性疼痛的MYO1A以及MYO1A用于治疗疼痛的用途
本专利技术涉及将Myo1a鉴定为急性疼痛转变为慢性疼痛的生物标志物，并鉴定为治疗靶标。本专利技术特别涉及用于评估受试者产生损伤诱导的慢性机械性疼痛和/或发炎诱导的慢性热性疼痛的倾向的产品和方法，并且特别适用于哺乳动物，优选人类受试者。本专利技术更具体地涉及优选使用MYO1A基因作为生物标志物来评估受试者产生损伤诱导的慢性机械性疼痛和/或发炎诱导的慢性热性疼痛的倾向。在本文中本专利技术人提供对MYO1A具有特异性的结合试剂，含有所述试剂的组合物、装置、试剂盒，以及动物模型，并进一步描述了它们用于评估受试者罹患慢性疼痛的倾向的用途。本专利技术还涉及用于诊断、预防、管控或治疗慢性疼痛的产品和方法。
技术介绍
疼痛通常分为急性和慢性疼痛。急性疼痛持续时间短，并且对于维持我们的身体完整性是必需的，而慢性疼痛在正常愈合时间后持续并对我们的健康产生不利影响。慢性炎性或神经性疼痛导致高度衰弱和持久的感觉异常，如痛觉过敏、异常性疼痛和自发性疼痛(Munro等人,2009)。这些症状由外周和中枢神经系统中疼痛路径的异常延长的敏化引起，从而导致疼痛传递回路中的促进增加或抑制减弱。(Sandkuhler,2009；Zeilhofer等人,2012)。在发炎和神经损伤的情况下通过各种机制发生减少的脊髓抑制。这些包括前列腺素E2介导的对抑制性甘氨酸受体的抑制(Ahmadi等人,2002；Harvey等人,2004；Muller等人,2003；Zeilhofer等人,2012)和来源于脑的神经营养因子(BDNF)介导的氯化钾输出物KCC2下调，这扰乱了氯化物稳态，从而改变了GABA能和甘氨酸能抑制功能(Coull等人,2005；Coull等人,2003；Zeilhofer等人,2012)。最近的研究解密了数种微回路，所述微回路涉及参与控制急性和损伤诱导的持续疼痛的脊髓(SC)兴奋性和抑制性中间神经元的不同子集(Bourane等人,2015a；Bourane等人,2015b；Duan等人,2014；Foster等人,2015；Peirs等人,2015；Petitjean等人,2015)。这些数据一起展示我们对如下分子和细胞机制有很多了解，这些机制是控制损伤诱导的急性疼痛发作的外周和中枢敏化的基础。然而，我们对触发急性疼痛向慢性疼痛转变的分子和细胞事件的了解仍然有限。例如，已确定在常见的外科程序如胸外科、腿截肢和冠状动脉旁路后，约10％至50％的个体会在急性术后疼痛后出现持续疼痛(Gilron等人,2013；Kehlet等人,2006)。这些患者中仅一小部分如何以及为何产生慢性术后疼痛(CPSP)尚未知晓。在临床中，已经提出了数种预测CPSP产生的风险因素。这些因素包括年龄、性别和手术类型、患者对引起的疼痛刺激的反应的术前和术后评估以及他们对产生CPSP的遗传易感性(Kehlet等人,2006)。鉴于缺乏关于慢性疼痛的产生、预防和治疗的信息，显然需要鉴定可适当管控慢性疼痛的新生物标记物以及可预防、减弱或治疗慢性疼痛的新治疗化合物。
技术实现思路
令人惊讶地，专利技术人在本文中首次展示，Myo1a的缺失或其表达的改变与受试者产生损伤诱导的慢性机械性疼痛和/或发炎诱导的慢性热性疼痛的倾向有关。因此，本专利技术的第一目的涉及编码肌球蛋白IA(Myo1a)的DNA或mRNA、优选Myo1a基因或Myo1a蛋白的用途，其用作生物标志物来评估受试者产生损伤诱导的慢性机械性疼痛和/或发炎诱导的慢性热性疼痛的倾向。本专利技术还涉及一种评估受试者产生损伤诱导的慢性机械性疼痛或发炎诱导的慢性热性疼痛的倾向的体外方法，其中所述方法包含对从受试者的生物样品中获得的Myo1a核酸序列进行分析、通常是测序的步骤，检测到在与以SEQIDNO：1鉴定的Myo1a野生型核酸序列比较时受试者的Myo1a的核酸序列改变，则指示受试者倾向于产生损伤诱导的慢性机械性疼痛和/或发炎诱导的慢性热性疼痛，而不存在改变则指示受试者没有产生损伤诱导的慢性机械性疼痛和/或发炎诱导的慢性热性疼痛的倾向。本专利技术的其它目的涉及编码Myo1a的DNA、编码Myo1a的mRNA或Myo1a蛋白(“肌球蛋白IA”)的激动剂，其用于预防或治疗受试者的疼痛，特别是损伤诱导的慢性机械性疼痛和/或发炎诱导的慢性热性疼痛；涉及包含Myo1a蛋白的激动剂以及药学上可接受的载体或承载体的组合物；并且涉及其用于预防或治疗受试者的疼痛、特别是损伤诱导的慢性机械性疼痛和/或发炎诱导的慢性热性疼痛的用途。本文还描述了一种Myo1a调节剂的体外或离体筛选方法，所述方法包含确定候选药物活化或刺激或相反地降低或抑制Myo1a功能性表达和/或生物学功能的能力，并且如果所述能力得到证实，则将候选药物鉴定为Myo1a激动剂(活化剂)，并可能鉴定为用于预防、减少或治疗疼痛的候选药物，或相反地鉴定为Myo1a拮抗剂(抑制剂)。专利技术人在本文中揭示了Myo1aKO(Myo1a-/-)动物模型用于筛选Myo1a调节剂和/或筛选用于预防、减少或抑制疼痛的药物的潜在用途。本专利技术还涉及适用于实施上述方法的试剂盒和装置，例如包含固定在承载体上的至少一种互补核酸的装置，所述互补核酸结合Myo1a基因或Myo1a基因座的全部或部分，通常是用于对Myo1a核酸进行测序的寡核苷酸，或用于评估受试者产生损伤诱导的慢性机械性疼痛或发炎诱导的慢性热性疼痛的倾向的试剂盒，所述试剂盒包含用于对从受试者的生物样品中获得的Myo1a核酸进行测序的寡核苷酸。在一个特定方面，本专利技术涉及包含固定在承载体上的至少一种互补核酸的装置用于评估受试者产生损伤诱导的慢性机械性疼痛或发炎诱导的慢性热性疼痛的倾向的用途，所述互补核酸结合Myo1a基因或Myo1a基因座的全部或部分。在另一个特定方面，本专利技术涉及试剂盒用于评估受试者产生损伤诱导的慢性机械性疼痛或发炎诱导的慢性热性疼痛的倾向的用途，其中所述试剂盒包含用于对从受试者的生物样品中获得的Myo1a核酸进行测序的寡核苷酸。在本专利技术的上下文中，所述受试者是任何哺乳动物受试者，特别是人类受试者。具体实施方式疼痛是与实际或潜在组织损害相关的令人不快的感觉体验。因此，疼痛是各种损伤和疾病的最常见症状。存在不同的疼痛分类，例如伤害性疼痛通常区别于炎性疼痛和病理性疼痛，病理性疼痛是由损害神经系统(即神经性疼痛)或其异常功能(功能障碍性疼痛，如在纤维肌痛、肠易激综合征、紧张型头痛等中)引起的疾病状态。疼痛通常是短暂的，只持续到有害刺激被去除或潜在的损害或病理已经治愈为止，但是一些疼痛病状，如类风湿性关节炎、外周神经病、癌症和特发性疼痛(在创伤或病理已经治愈后持续或没有任何明显原因产生的疼痛)，可能会持续多年。持续长时间的疼痛被称为慢性疼痛，并且迅速消除的疼痛被称为急性疼痛。传统上，急性和慢性疼痛之间的区别依赖于距离发作的任意时间间隔；两种最常用的标志物是疼痛发作后3个月和6个月(Turk,Okifuji,疼痛的术语和疼痛的分类(Paintermsandtaxonomiesofpain)；Bonica,Loeser,Chapman,Turk,Butler,Bonica的疼痛管控(Bonica'sman本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.编码肌球蛋白IA(Myo1a)的DNA、编码Myo1a的mRNA或Myo1a蛋白的用途，其用作生物标志物来评估受试者产生损伤诱导的慢性机械性疼痛和/或发炎诱导的慢性热性疼痛的倾向。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.03.08 EP EP16305257.41.编码肌球蛋白IA(Myo1a)的DNA、编码Myo1a的mRNA或Myo1a蛋白的用途，其用作生物标志物来评估受试者产生损伤诱导的慢性机械性疼痛和/或发炎诱导的慢性热性疼痛的倾向。2.权利要求1的用途，其中当与表达功能性肌球蛋白IA(Myo1a)的Myo1a纯合子(Myo1a+/+)参比受试者中观察到的表达比较时，受试者中Myo1a的缺失、表达减少或非功能性表达使所述受试者倾向于产生损伤诱导的慢性机械性疼痛和/或发炎诱导的慢性热性疼痛。3.权利要求1或2的用途，其中所述损伤诱导的慢性机械性疼痛是炎性慢性机械性疼痛、神经性慢性机械性疼痛或术后慢性机械性疼痛。4.一种评估受试者产生损伤诱导的慢性机械性疼痛或发炎诱导的慢性热性疼痛的倾向的体外方法，其中所述方法包含对从所述受试者的生物样品中获得的Myo1a核酸序列进行分析、通常是测序的步骤，检测到在与以SEQIDNO：1鉴定的Myo1a野生型核酸序列比较时所述受试者的Myo1a的核酸序列改变，则指示所述受试者倾向于产生损伤诱导的慢性机械性疼痛和/或发炎诱导的慢性热性疼痛，而不存在改变则指示所述受试者没有产生损伤诱导的慢性机械性疼痛和/或发炎诱导的慢性热性疼痛的倾向。5.权利要求4的方法，其中所述生物样品是血液、血浆或血清样品。6.编码Myo1a的DNA、编...

【专利技术属性】
技术研发人员：阿卜杜勒阿齐兹·莫奇里其，
申请(专利权)人：艾克斯马赛大学，法国国家科学研究中心，
类型：发明
国别省市：法国,FR