一种LncRNA作为深静脉血栓形成诊断标志物的应用制造技术

本发明专利技术公开了血清中LncRNA NONHSAT175366作为深静脉血栓形成诊断标志物的应用，并以LncRNA NONHSAT175366作为诊断深静脉血栓形成的诊断标志物，开发了相应的检测试剂盒，该试剂盒检测灵敏度高、特异性高、检测方便，满足诊断深静脉血栓形成病人的检测需求，经临床验证诊断准确率高。

【技术实现步骤摘要】
一种LncRNA作为深静脉血栓形成诊断标志物的应用
本专利技术属于生物医学领域，具体涉及血清中LncRNANONHSAT175366作为深静脉血栓形成诊断标志物的应用。
技术介绍
深静脉血栓形成(DVT)是常见的周围血管疾病，年发病率约1.6‰，且45岁之后发病率迅速增长。DVT急性期肺栓塞并发症是常见急性致死原因，慢性期则多见静脉瓣膜破坏所导致的患肢肿胀、淤积性皮炎、顽固性小腿溃疡等后遗症，严重危害患者生命与健康，因此对DVT进行快速、准确的诊断具有重要的临床意义。但是DVT的临床症状和体征缺乏特异性，根据这些诊断或排除DVT已被证实不准确。D-二聚体(D-dimer)是目前临床用于诊断DVT的主要生物学指标，并不是血栓栓塞性疾病的特异性血清学指标，在感染、外伤、肿瘤等疾病中D-dimer表达均可以升高。超声影像检查对于DVT的诊断有重要意义，但存在价格偏于昂贵、受仪器设备限制、对检查医生专业能力要求高等因素影响。因此，寻找特异性强、灵敏度高、稳定性好、操作方便的生物学指标对DVT临床诊断具有重要的意义。最近研究表明90％的基因组转录成非编码RNA。非编码RNA最初被认为是“转录噪声”；然而，越来越多的证据表明非编码RNA在许多生理病理过程中都有重要的作用。非编码RNA可以分为短链非编码RNA(小于200bp)和长链非编码RNA(长于200bp)。长链非编码RNA(LncRNA)可以分为反义长非编码RNA，内含子非编码RNA(LincRNA)，启动子相关LncRNA和非翻译区LncRNA。先前的研究结果表明，LncRNA在多种细胞和生物学过程中都有重要作用，例如细胞增殖、细胞周期、染色体重塑和组蛋白修饰。另外，LncRNA的异常表达与多种肿瘤相关，包括乳腺癌、胃癌、肝细胞性肝癌和前列腺癌等。然而，LncRNA在深静脉血栓形成中的作用以及LncRNA的表达与深静脉血栓形成之间的关系尚未见报道。综上所述，目前有必要探寻新的有效的长链非编码RNA作为深静脉血栓形成临床诊断、治疗和预后检测的标记物，为诊断、治疗深静脉血栓形成和研发相关药物提供依据。
技术实现思路
针对以上现有技术，专利技术人经过大量的技术研究和长期的临床实践，提供了一种诊断深静脉血栓形成的相关产品，以及提供LncRNANONHSAT175366作为深静脉血栓形成标志物的应用。在本专利技术的第一个方面，提供了LncRNANONHSAT175366作为深静脉血栓形成诊断标志物在制备用于诊断深静脉血栓形成产品中的应用。其中，所述LncRNANONHSAT175366的核酸序列如下：CGGGCTGGGACGGGCGTAAAGAGGTAGATATTTGGACCTCGTTTCACAGACAAAGAAACTAGGCCCAGGAAAGTGGCGTTGCTCTCAAGGTCACGCAGCTACAACGGGAAACGGGCTGAGCCGGGACTCAAACCAATTACCCAGATTGAGAATTCCGGGCTCCGAAAAAAACTGGAAACAGAAAGGGAGGGAAAAAAAACCATAACCAGGGTCTGCCCAAGTGGAAAGGTGGTCTCGAATAGAATAGAACTGTTTTGTGCTATGGAAGAGCAAGGGTGAGATGAGGGGAAATGGGAGTGACTGCTAATAGGTATGGGATTTCGTTTTGG进一步的，所述LncRNANONHSAT175366为血清样本中的LncRNANONHSAT175366。本专利技术的第二个方面，提供了检测LncRNANONHSAT175366的试剂盒或基因芯片在制备用于诊断深静脉血栓形成产品中的应用。进一步的，所述试剂盒至少包括针对LncRNANONHSAT175366的正向引物5'-GTTGCTCTCAAGGTCACGCA-3'和反向引物5'-CCTTTCCACTTGGGCAGACC-3'。进一步的，所述基因芯片至少包括与LncRNANONHSAT175366的核酸序列杂交的探针。进一步的，所述产品能够通过检测血清中LncRNANONHSAT175366表达水平来诊断患者是否患有深静脉血栓形成，LncRNANONHSAT175366高表达与深静脉血栓形成的发生发展相关。更进一步的，所述检测LncRNANONHSAT175366的表达水平的产品包括：通过RT-PCR、实时定量PCR、原位杂交、基因芯片或基因测序检测LncRNANONHSAT175366的表达水平以诊断深静脉血栓形成的产品。本专利技术的第三个方面，提供了一种用于诊断深静脉血栓形成的产品，该产品的特点是：所述产品能够通过检测血清中的LncRNANONHSAT175366表达水平来诊断深静脉血栓形成，高通量检测结果显示LncRNANONHSAT175366在DVT组表达较正常人显著升高。进一步的，所述产品为芯片或检测试剂盒；其中芯片包括与LncRNANONHSAT175366的核酸序列杂交的探针。进一步的，所述检测试剂盒包括用于配制反转录反应体系的试剂和用于配制qPCR反应体系的试剂。本专利技术的第四个方面，提供LncRNANONHSAT175366在制备治疗深静脉血栓形成的药物中的应用。进一步的，所述药物为LncRNANONHSAT175366的抑制剂。与现有技术相比，本专利技术的技术方案的有益效果是：(1)本专利技术经过高通量深度测序，筛选得到LncRNANONHSAT175366能够作为诊断深静脉血栓形成的标志物，其诊断准确率和效率较高。(2)本专利技术为将来研制抑制LncRNANONHSAT175366靶点的药物提供了依据。(3)本专利技术以LncRNANONHSAT175366作为诊断深静脉血栓形成的诊断标志物，开发了相应的检测试剂盒，该试剂盒检测灵敏度高、特异性高、检测方便，满足诊断深静脉血栓形成病人的检测需求，经临床验证诊断准确率高。附图说明构成本专利技术的一部分的说明书附图用来提供对本专利技术的进一步理解，本专利技术的示意性实施例及其说明用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的不当限定。图1：差异LncRNA筛选。图2：LncRNANONHSAT175366表达验证。图3：ROCCurve图，A为LncRNANONHSAT175366ROC曲线图，B为D-dimerROC曲线图。具体实施方式应该指出，以下详细说明都是示例性的，旨在对本专利技术提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本专利技术所属
的普通技术人员通常理解的相同含义。需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本专利技术的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作和/或它们的组合。术语解释：LncRNANONHSAT175366：长链非编码核糖核酸NONHSAT175366，核酸序列如SEQIDNO:1所示。正如
技术介绍
所介绍的，现有技术中采用D-二聚体等作为诊断深静脉血栓形成存在一定的不足，为了解决如上的技术问题，本专利技术通过高通量深度测序，筛选得到LncRNANONHSAT175366能够作为深静脉血栓形本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.LncRNA NONHSAT175366作为深静脉血栓形成诊断标志物在制备用于诊断深静脉血栓形成产品中的应用，其特征是：所述LncRNA NONHSAT175366核酸序列如SEQ ID NO:1所示。

【技术特征摘要】
1.LncRNANONHSAT175366作为深静脉血栓形成诊断标志物在制备用于诊断深静脉血栓形成产品中的应用，其特征是：所述LncRNANONHSAT175366核酸序列如SEQIDNO:1所示。2.如权利要求1所述的应用，其特征是：所述LncRNANONHSAT175366为血清样本中的LncRNANONHSAT175366。3.检测LncRNANONHSAT175366的试剂盒或基因芯片在制备用于诊断深静脉血栓形成产品中的应用。4.如权利要求3所述的应用，其特征是：所述试剂盒至少包括针对LncRNANONHSAT175366的正向引物5'-GTTGCTCTCAAGGTCACGCA-3'和反向引物5'-CCTTTCCACTTGGGCAGACC-3'。5.如权利要求3所述的应用，其特征是：所述基因芯片至少包括与LncRNANONHSAT175366的核酸序列杂交的探针。6.如权利要求3所述的应用，其特征是：所述产品能够通过检测血清中LncRNANONHSAT175366表达水平来诊断患者...

【专利技术属性】
技术研发人员：王彬，李霞，刘明，赵霖，张振，张云虹，郝清智，朱肖肖，魏然，郭强，尹训强，
申请(专利权)人：山东中医药大学附属医院，
类型：发明
国别省市：山东,37