人MMP13基因干扰序列、shRNA-MMP13病毒及其低表达细胞系制造技术

本发明专利技术公开了一种人MMP13基因干扰序列，如SEQ ID NO1所示。还公开了人shRNA‑MMP13病毒，为上述序列构建到表达质粒中。还公开了低表达MMP13蛋白的细胞系，为被上述病毒感染的软骨细胞。本发明专利技术以慢病毒为载体构建表达干扰MMP13蛋白表达的shRNA。慢病毒基因组可以整合到宿主基因组中，从而稳定表达外源基因，可在药物压力和荧光蛋白双重条件下筛选，更方便阳性克隆的筛选。在软骨细胞中低表达MMP13的稳定细胞系，可用于研究低表达MMP13引起的相关蛋白表达量变化，从而找出与ONFH发生发展相关的机理，为临床和治疗提供更多的靶点。在细胞水平上研究骨关节炎的病理发生过程，缩短实验周期，更便利地进行科学研究。

【技术实现步骤摘要】
人MMP13基因干扰序列、shRNA-MMP13病毒及其低表达细胞系
本专利技术涉及人MMP13基因干扰序列、shRNA-MMP13病毒及低表达MMP13蛋白的细胞系。
技术介绍
股骨头坏死(osteonecrosisofthefemoralhead,ONFH)是一种常见的骨科疑难疾病。股骨头坏死以骨组织缺血坏死为特征性病理表现，进而造成股骨头塌陷变性，并最终发展成为骨性关节炎。基质金属蛋白酶-13(Matrixmetalloproteinases-13，MMP13)是在骨关节炎(osteoarthritis,OA)发生发展过程中的一种关键介质。在正常滑膜组织中，其表达很低，但在骨性关节炎的滑膜中广泛表达(Matrixmetalloproteinasesinvolvementinpathologicconditions,2010)。金属基质蛋白酶家族其他亚型降解Ⅱ型胶原也需要通过MMP13起作用。而Ⅱ型胶原是构成软骨基质中最具特征性且含量最多的成分。因此在OA的疾病发展过程中，MMP13启动了早期的软骨破坏机制(Istherearoleforinatrialfibrillation,本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种人MMP13基因干扰序列，如SEQ ID NO1所示。

【技术特征摘要】
1.一种人MMP13基因干扰序列，如SEQIDNO1所示。2.一种人shRNA-MMP13病毒，为权利要求1的序列构建到pLKD-CMV-G&PR-U6-shRNA质粒中，然后包装成病毒。3.一种低表达MMP...

【专利技术属性】
技术研发人员：方卫斌，张海灵，
申请(专利权)人：天德悦北京生物科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：北京,11