一种甘草多糖的提取方法及其在养鸡生产中的应用技术

本发明专利技术涉及生物提纯技术领域，且公开了一种甘草多糖的提取方法及其在养鸡生产中的应用，包括以下步骤，预处理：将甘草加热60摄氏度烘干至衡重量，并且粉碎甘草过80目筛；热水提取：将粉碎后的甘草末加入热水进行提取，其中提取方式为甘草末和水1:30的添加，并且将混合物利用微波热水加热，加热至一百摄氏度三个小时，并且提取两次；浓缩：将热水提取中得到的两次液体进行混合，并且进行60摄氏度水浴浓缩。该甘草多糖的提取方法及其在养鸡生产中的应用，通过利用简单的制备方法得到纯度较高的甘草多糖，大大降低了甘草多糖的生产成本，适合大面积推广，同时针对甘草多糖进行了分析和提纯，并且针对甘草多糖的理化性质和其他生物化学性质进行分析。

【技术实现步骤摘要】
一种甘草多糖的提取方法及其在养鸡生产中的应用
本专利技术涉及生物提纯
，具体为一种甘草多糖的提取方法及其在养鸡生产中的应用。
技术介绍
抗生素自上世纪40年代开始在畜禽饲料中作为促生长剂使用以来，对畜牧生产做出了巨大的贡献；近年来随着健康观念的兴起，抗生素滥用带来的一系列问题随之出现；目前随着绿色、安全食品的推广，人们希望更安全有效的饲料添加剂代替抗生素已势在必行。中草药是一种纯天然的绿色药物，能防治疾病，且含有丰富的营养物质，副作用小，畜禽使用不易产生耐药性和残留，被认为是抗生素理想的替代品。同时从各种中草药中提取了大量生物活性多糖，发现其具有提高机体免疫力、抗菌、抗病毒、抗寄生虫、抗肿瘤、延缓衰老等一系列作用，也广泛应用于医药、食品和保健品等领域。关于甘草多糖(GP)的研究则多集中于乌拉尔甘草和光果甘草。在我国二十世纪六、七十年代仍没有关于GP及其药理作用的报道，直到1986年史勇等人对甘草GP在小鼠淋巴细胞的激活增殖效应及其免疫学活性才进行了报道；1989年赵秀英以甘草种子为原料分离和鉴定了GP。目前国内对于甘草多糖的研究和应用较为不完善。
技术实现思路
(一)解决的技术问题针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种甘草多糖的提取方法及其在养鸡生产中的应用，具备提取方便简单且纯度高，应用范围广成本低的优点，解决了目前国内对于甘草多糖的提纯较为不完善且对于动物的应用研究较少的问题。(二)技术方案为实现上述一种甘草多糖的提取方法及其在养鸡生产中的应用提取方便简单且纯度高，应用范围广成本低的目的，本专利技术提供如下技术方案：一种甘草多糖的提取方法及其在养鸡生产中的应用，包括以下步骤：预处理：将甘草加热60摄氏度烘干至衡重量，并且粉碎甘草过80目筛；热水提取：将粉碎后的甘草末加入热水进行提取，其中提取方式为甘草末和水1:30的添加，并且将混合物利用微波热水加热，加热至一百摄氏度三个小时，并且提取两次；浓缩：将热水提取中得到的两次液体进行混合，并且进行60摄氏度水浴浓缩；脱蛋白：向提取液中加入1/4倍体积的氯仿－正丁醇溶液，混合20min，3500rpm离心5min，中层白色絮状沉淀为蛋白质，故取上清，重复离心2-3次，至中间没有明显沉淀为止；醇脱：脱蛋白完毕，向提取液中缓缓加入无水乙醇，边加边搅拌，使乙醇浓度为60％，静置过夜，4000rpm离心5min，倒掉上清，沉淀物用蒸馏水溶解，再用80％乙醇沉淀一次，沉淀物60℃干燥直至质量不再发生变化，即为甘草粗多糖。优选的，所述应用范围包括如下方向方向1，甘草多糖对雏鸡新城疫疫苗抗体滴度的影响；方向2，甘草多糖对蛋鸡生产性能及蛋品质的影响；方向3，甘草多糖对肉鸡生产性能的影响。优选的，所述使用设备型号为紫外光谱仪(天美公司，UV1102PC型)；自动平衡离心机(北京医用离心机厂，LDZ5-2)；数显恒温水浴锅(国华，HH-4)；生化培养箱(HPS-250，哈尔滨市东联电子技术开发有限公司)；超净工作台(SW-CJ-1F，苏州安泰空气技术有限公司)；手提式高压蒸汽灭菌锅(YXQ，上海医用核子仪器厂)；低温冰箱(新飞，BCD-213KA)；电子天平(上海天平仪器厂，FA1104型)。优选的，所述方向1中的甘草多糖注射液包括1mg/mL、5mg/mL、10mg/mL和20mg/mL四种浓度，并且甘草多糖水溶液经消毒、杀菌和热原试验，确认符合要求后，4℃保存待用。优选的，所述方向3中的甘草多糖纯度为92.39％，使用时以石粉稀释100倍再混入配合饲料中。优选的，所述甘草多糖为淡黄色粉末，极易溶于水；经测定甘草多糖提取率为18.59％，总糖纯度为92.39％，对所提甘草多糖进行定性分析，含有多糖和蛋白质、氨基酸，不含皂甙、黄酮类和生物碱等物质。(三)有益效果与现有技术相比，本专利技术提供了一种甘草多糖的提取方法及其在养鸡生产中的应用，具备以下有益效果：1、该甘草多糖的提取方法及其在养鸡生产中的应用，通过利用简单的制备方法得到纯度较高的甘草多糖，大大降低了甘草多糖的生产成本，适合大面积推广，同时针对甘草多糖进行了分析和提纯，从而保证了分析的方便性，并且针对甘草多糖的理化性质和其他生物化学性质进行分析。2、该甘草多糖的提取方法及其在养鸡生产中的应用，通过采取了三个方向对于养鸡的应用保证了应用范围的广泛性和适用性。具体实施方式下面将结合本专利技术的实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。一种甘草多糖的提取方法及其在养鸡生产中的应用，包括以下步骤：预处理：将甘草加热60摄氏度烘干至衡重量，并且粉碎甘草过80目筛；热水提取：将粉碎后的甘草末加入热水进行提取，其中提取方式为甘草末和水1:30的添加，并且将混合物利用微波热水加热，加热至一百摄氏度三个小时，并且提取两次；浓缩：将热水提取中得到的两次液体进行混合，并且进行60摄氏度水浴浓缩；脱蛋白：向提取液中加入1/4倍体积的氯仿－正丁醇溶液，混合20min，3500rpm离心5min，中层白色絮状沉淀为蛋白质，故取上清，重复离心2-3次，至中间没有明显沉淀为止；醇脱：脱蛋白完毕，向提取液中缓缓加入无水乙醇，边加边搅拌，使乙醇浓度为60％，静置过夜，4000rpm离心5min，倒掉上清，沉淀物用蒸馏水溶解，再用80％乙醇沉淀一次，沉淀物60℃干燥直至质量不再发生变化，即为甘草粗多糖。优选的，所述应用范围包括如下方向方向1，甘草多糖对雏鸡新城疫疫苗抗体滴度的影响；方向2，甘草多糖对蛋鸡生产性能及蛋品质的影响；方向3，甘草多糖对肉鸡生产性能的影响。优选的，所述使用设备型号为紫外光谱仪(天美公司，UV1102PC型)；自动平衡离心机(北京医用离心机厂，LDZ5-2)；数显恒温水浴锅(国华，HH-4)；生化培养箱(HPS-250，哈尔滨市东联电子技术开发有限公司)；超净工作台(SW-CJ-1F，苏州安泰空气技术有限公司)；手提式高压蒸汽灭菌锅(YXQ，上海医用核子仪器厂)；低温冰箱(新飞，BCD-213KA)；电子天平(上海天平仪器厂，FA1104型)。优选的，所述方向1中的甘草多糖注射液包括1mg/mL、5mg/mL、10mg/mL和20mg/mL四种浓度，并且甘草多糖水溶液经消毒、杀菌和热原试验，确认符合要求后，4℃保存待用。优选的，所述方向3中的甘草多糖纯度为92.39％，使用时以石粉稀释100倍再混入配合饲料中。优选的，所述甘草多糖为淡黄色粉末，极易溶于水；经测定甘草多糖提取率为18.59％，总糖纯度为92.39％，对所提甘草多糖进行定性分析，含有多糖和蛋白质、氨基酸，不含皂甙、黄酮类和生物碱等物质。实施例一：甘草多糖注射液：本部分试验甘草多糖用去离子水稀释成4种浓度(GP-1，GP-5，GP-10和GP-20)：1mg/mL、5mg/mL、10mg/mL和20mg/mL。制备的甘草多糖水溶液经消毒、杀菌和热原试验(中华人民共和国兽医药典委员会，2005)，确认符合要求后，4℃保存待用。新城疫(ND)活疫苗和油疫苗均购自齐鲁动物保健品有限公司。氯化本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种甘草多糖的提取方法及其在养鸡生产中的应用，其特征在于，包括以下步骤：预处理：将甘草加热60摄氏度烘干至衡重量，并且粉碎甘草过80目筛；热水提取：将粉碎后的甘草末加入热水进行提取，其中提取方式为甘草末和水1:30的添加，并且将混合物利用微波热水加热，加热至一百摄氏度三个小时，并且提取两次；浓缩：将热水提取中得到的两次液体进行混合，并且进行60摄氏度水浴浓缩；脱蛋白：向提取液中加入1/4倍体积的氯仿－正丁醇溶液，混合20min，3500rpm离心5min，中层白色絮状沉淀为蛋白质，故取上清，重复离心2‑3次，至中间没有明显沉淀为止；醇脱：脱蛋白完毕，向提取液中缓缓加入无水乙醇，边加边搅拌，使乙醇浓度为60％，静置过夜，4000rpm离心5min，倒掉上清，沉淀物用蒸馏水溶解，再用80％乙醇沉淀一次，沉淀物60℃干燥直至质量不再发生变化，即为甘草粗多糖。

【技术特征摘要】
1.一种甘草多糖的提取方法及其在养鸡生产中的应用，其特征在于，包括以下步骤：预处理：将甘草加热60摄氏度烘干至衡重量，并且粉碎甘草过80目筛；热水提取：将粉碎后的甘草末加入热水进行提取，其中提取方式为甘草末和水1:30的添加，并且将混合物利用微波热水加热，加热至一百摄氏度三个小时，并且提取两次；浓缩：将热水提取中得到的两次液体进行混合，并且进行60摄氏度水浴浓缩；脱蛋白：向提取液中加入1/4倍体积的氯仿－正丁醇溶液，混合20min，3500rpm离心5min，中层白色絮状沉淀为蛋白质，故取上清，重复离心2-3次，至中间没有明显沉淀为止；醇脱：脱蛋白完毕，向提取液中缓缓加入无水乙醇，边加边搅拌，使乙醇浓度为60％，静置过夜，4000rpm离心5min，倒掉上清，沉淀物用蒸馏水溶解，再用80％乙醇沉淀一次，沉淀物60℃干燥直至质量不再发生变化，即为甘草粗多糖。2.根据权利要求1所述的一种甘草多糖的提取方法及其在养鸡生产中的应用，其特征在于，所述应用范围包括如下方向方向1，甘草多糖对雏鸡新城疫疫苗抗体滴度的影响；方向2，甘草多糖对蛋鸡生产性能及蛋品质的影响；方向3，甘草多糖对肉鸡生产性能的影响。3.根据权利要求1所述的一种甘草多糖的提取方法及其在养鸡生产中的应用，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：张淑红，盛花娟，焦海峰，赵海军，
申请(专利权)人：张淑红，盛花娟，
类型：发明
国别省市：河北,13